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REPUBLIQUE DU BENIN ------------
MINISTERE DE L’ENSEIG EMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE
SCIENTIFIQUE --------- ECOLE SUPERIEURE LE ‘‘FAUCON’’ ---------
DEPARTEMENT DE GENIE DE BIOLOGIE HUMAINE ---------
OPTION : ANALYSE BIOLOGIQUE ET BIOCHIMIQUE -------
RAPPORT DE STAGE DE FIN DE FORMATION Pour l’obtention du
DIPLOME DE LICENCE PROFESSIONNELLE
THEME :
PRESENTE ET SOUTENU PAR :
OGODO D. Augustin SOUS LA DIRECTIONB DE :
TUTEUR : SUPERVISEUR : Mr DEGBELO Jean-Eude Dr DEGBEY C. Cyriaque Chef service du laboratoire Maitre-assistant, Microbiologie et Hygiène Ingénieur biomédical IRSP-UAC
ANNEE ACADEMIQUE : 2019-2020
9ème promotion
CORRELATION ENTRE LA VITESSE DE SEDIMENTATION ET LA PROTEINE C REACTIVE CHEZ LES PATIENTS DU SERVICE DE
LA PEDIATRIE AU CHUZ ABOMEY-CALAVI/Sô-AVA
Corrélation entre la protéine c reactive et la vitesse de sédimentation chez les patients du service de la pédiatrie au chuz Abomey-calavi/Sô-ava
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LES DIRIGEANTS DE L’ECOLE SUPERIEURE LE FAUCON
DIRECTEUR GENERAL : Mr Jean Michel SOARES
DIRECTEUR ACADEMIQUE : Prof. Hyacinthe AHISSOU AAAAHISSOU
CHEF DEPARTEMENT : Dr. Paulin K. YOVO
MINISTERE DE L’ENSEIGNEMENT SUPERIEUR ET DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE
**********
ECOLE SUPERIEURE LE FAUCON
**********
SPECIALITE : ANALYSES BIOLOGIQUES ET BIOCHIMIQUES
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Nom et Prénoms Matières Enseignées
ADJISSE Simplice Mathématiques
AHISSI Vahid Biochimie Structurale
AHISSOU Hyacinthe Biochimie Métabolique
AHOUIGNAN Gilbert Hématologie générale/Hématologie pathologie
/Hémostase
AKPOVI Casimir Biochimie Clinique
ANAGO Eugénie Enzymologie
ATCHADE Pascal Parasitologie générale/Mycologie/Parasitologie
Médicale
ATREVI Nicolas Anatomie générale
BANKOLE S. Honoré Bactériologie appliquée, Virologie
DEGBEY Cyriaque Microbiologie Médicale /Hygiène Hospitalière /Santé
Publique
DESSOUASSI Noel Biophysique
DJEDATIN Gustave Génétique Moléculaire
DOUGNON Victorien Microbiologie générale/Méthodologie de Recherche
GLELE Moise Transfusion sanguine
KANFON Aurélien Immunohématologie/Sérologie/Contrôle Qualité
KLOTOE Jean-Robert Technique instrumentale/Equipements biomédicaux et
Maintenance
LAFIA Edgard Immunologie generale /Management des services de santé
MASLOKONON Vincent Histologie générale/Histologie Pathologie
NONVIGNON Gisèle Technique d’expression écrite et orale
LISTE DES ENSEIGNANTS DE GBH
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QUENUM Chantal Education physique et sportive
QUIRINO Clet Informatique
SEGBO Julien Biologie moléculaire
SOARES R. Armel Gestion des ressources humaines
TCHOBO P. Fidel Chimie organique
TOBOSSI Boniface Statistique et Probabilité
TOKPANOU Nikita Chimie générale
YADOULETON Anges Entomologie médicale
YOKOSSI Daniel Anglais générale/Anglais Scientifique
YOVO K. Paulin Pharmacologie/Toxicologie
YOVOGAN Julien Sciences-Physiques
PAZOU Elisabeth Biologie cellulaire
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DEDICACES JE DÉDIE CE TRAVAIL
À mes parents en particulier ma très chère mère : RAMANOU Philomène, le
plus beau cadeau de ma vie, aucune dédicace ne saurait être assez éloquente
pour exprimer ce que tu mérites pour tous les sacrifices consentis depuis ma
naissance.
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HOMMAGES • A son Excellence Monsieur le Président du jury, pour ce grand honneur
que vous nous faites en présidant ce jury de soutenance de Licence. Nous
vous en sommes gré et vous prions de recevoir l’expression de notre profond
respect.
• Aux Honorables membres du jury, pour avoir accepté juger ce travail qui,
nous le savons, reste à parfaire ; nous vous disons merci. Vos critiques et
suggestions contribueront à l’amélioration de la qualité scientifique de ce
travail.
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REMERCIEMENTS L’accomplissement de ce travail est le fruit d’importants concours. Nous nous emparons de
cette utile et inestimable occasion pour témoigner nos sincères remerciements à tous ceux qui
de près ou de loin ont contribué de manière avérée à la réalisation de ce travail.
• A notre superviseur Dr DEGBEY Cyriaque ; vous nous avez dirigé pour la
réalisation de ce travail malgré vos multiples occupations. Recevez l’expression de
nos sentiments les plus respectueux et le témoignage de notre reconnaissance.
SINCERES REMERCIEMENTS !
• A mon tuteur Mr ASSANI Mohamed et son épouse pour leur esprit social, leur comp
assion et leur humble volonté de m’accompagner très loin dans mes études.
QUE DIEU VOUS BENISSE !
• A mes sœurs et frères Kalif, Hubert, Marcelin, Barthelemy, Ornella ; Sylvestre merci
pour vos conseils et votre soutien. Puisse l’affection, la confiance et la solidarité qui n
ous animent rester inébranlables.
FRATERNELLEMENT !
• Aux autorit és et enseignants de l’Ecole Supérieure le Faucon. En particulier ceux d
u département d’Analyses Biomédicales. Chers professeurs, vous avez contribué très e
fficacement à notre formation universitaire. Recevez ici le témoignage de notre profon
de gratitude.
• A monsieur Jean-Eude DEGBELO ; notre tuteur pour avoir été toujours disponible
à répondre à nos préoccupations. Que Dieu vous comble de ses grâces.
• A tous mes camarades de la 9ème promotion ; tous ces moments passés ensemble s
ont inoubliables. Que Dieu vous donne la force d’aller loin dans vos études.
• A tous ceux qui de près ou de loin ont contribué à la réalisation de ce travail ; nos sinc
ères remerciements
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LISTE DES ABREVIATIONS - ABB : analyse biologique et biochimique
- ALAT : alanine amino-transferase
- ASAT : aspartatet amino-transferase
- CHUZ : centre hospitalier universitaire de zone
- CRP : protéine c réactive
- ECBU : examen cytobactériologique des urines
- EDTA : ethylène diamine tetra acetique
- ESF : école supérieure le faucon
- GBH : génie de biologie humaine
- GE-DP : goutte epaisse densité parasitaire
- IgG : immunoglouline de type G
- LCR : liquide cephalo rachidien
- TPHA : treponema pallidum hemagglutination essay
- VS : vitesse de sedimentation
- VS1 : vitesse de sédimentation à la prémière heure
- VS2 : viesse de sédimentation à la deuxième heure
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LISTE DES TABLEAUX
Tableau I : procédure du dosage de la CRP latex semi-quantitatif. .................. 26
Tableau II : répartition de la population d’étude par sexe et tranche d’âge
.................................................................................... Erreur ! Signet non défini.
Tableau III : répartition de la population d’étude par CRP et VS .................... 43
Tableau IV : coefficient de corrélation .............................................................. 44
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LISTE DES FIGURES
Figure 1 : matériels nécessaire pour le dosage de la CRP ................................. 36
Figure 2 : Test CRP au latex .............................................................................. 38
Figure 3 : Tube de westergren…………………………..……………………..39
Figure 4 : Répartition des résultats de la CRP ................................................... 42
Figure 5 : répartition des résultats du VS ........................................................... 42
Figure 6 : courbes de corrélation entre CRP et VS1 .......................................... 43
Figure 7 : courbe de corrélation entre VS1 etVS2 ............................................. 44
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Résumé Introduction : La réaction inflammatoire constitue une ligne de défense de l’organisme, non
spécifique, dirigée contre les agressions des agents infectieux. La CRP est donc un paramètre
diagnostic de l’inflammation tout comme la VS
Objectif : Cette étude avait pour objectif d’étudier la corrélation entre la Protéine C Réactive
et la vitesse de sédimentation des hématies chez les patients du service de la pédiatrie au
Centre Hospitalier Universitaire Abomey-calavi/Sô-ava
Méthodes : Nous avons mené une étude transversale descriptive sur une population de 62
patients de la pédiatrie du CHUZ Abomey-calavi / Sô-Ava. Chaque patient a bénéficié de
deux types de prélèvements : un sur tube à anticoagulant et le second sur tube sec. Nous avons
fait le dosage de la CRP par la méthode d'agglutination (CRP-Latex) et la vitesse de
sédimentation par la méthode de Westergren chez le même patient.
. Résultats : 19,35% des patients affichent une vitesse VS normale/CRP négative, 38,71%
présentent une VS accélérée/CRP positive, 25,81% présentent une VS normale/CRP positive
et enfin 16,13% présentent une vitesse de sédimentation accélérée/CRP négative dont 8
anémiés. Les valeurs du coefficient de corrélation entre CRP/VS1, CRP/VS2 et VS1/VS2 sont
respectivement de 0,297 ; 0,260 et 0,990. La concordance et la discordance obtenue entres les
deux paramètres CRP et la vitesse de sédimentation montrent l’existence d’une faible
corrélation dont l'importance varie selon l’âge entre la vitesse de sédimentation et la CRP
dans la recherche d'un syndrome inflammatoire.
Conclusion : il est donc utile de revoir l’intérêt des deux prescriptions pour déterminer quel
paramètre est plus utile selon l’âge et le sexe pour le diagnostic de syndrome inflammatoire.
Mots clés : Corrélation, Protéine C réactive, vitesse de sédimentation, pédiatrie, centre
hospitalier universitaire Abomey-calavi/So-ava
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Abstract Introduction: The inflammatory reaction is a body’s non-specific line of defence against
attack by infectious agents. The C-reactive protein is therefore a diagnostic parameter of
inflammation, as is the sedimentation rate.
bjective: The objective of this study was to evaluate the correlation between c-reactive
protein and the sedimentation rate of red blood cells in patients in the pediatric department of
the Abomey-calavi/Sô-ava University hospital centre
Methods: We conducted a descriptive cross-sectional study on a population of 62 patients
from the pediatrics department of the Abomey-calavi/Sô-ava University hospital centre. Each
patient received two types of samples: one on anticoagulant tube and the second on dry tube.
We measured the CRP by the agglutination method (CRP-Latex) and the sedimentation rate
by the Westergren method in the same patients.
Result: 19,35% of the patients showed a negative CRP/sedimentation rate normal; 38,71%
showed a positive CRP/accelerated sedimentation rate; 25,81% showed a positive CRP/
normal sedimentation rate and finally 16,13% showed a negative CRP/accelerated
sedimentation rate, 8 of which were anemic. The values of the correlation coefficient between
CRP/VS1; CRP/VS2 and VS1/VS2 were 0,297, 0,260 and 0,990 respectively. The
concordance and discrepancy obtained between the two parameters CRP and the
sedimentation rate show the existence of a weak age-dependent correlation between the
sedimentation rate and CRP in the search for an inflammatory syndrome.
Conclusion: It is useful to review the value of the two prescriptions to determine which
parameter is more useful for the diagnosis of inflammatory syndrome.
Key words: correlation, C-reactive protein, sedimentation rate, pediatrics, Abomey-
calavi/Sô-Ava University Hospital Center
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SOMMAIRE
INTRODUCTION ............................................................................................. 14
Présentation du cadre de stage ................................... 15
Déroulement du stage ................................................ 17
: Etude du thème ......................................................... 30
RESULTATS ............................................................ Erreur ! Signet non défini.
COMMENTAIRES ........................................................................................... 44
CONCLUSION ......................................................... Erreur ! Signet non défini.
SUGGESTIONS ................................................................................................ 47
REFERENCE .................................................................................................... 48
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INTRODUCTION
La réaction inflammatoire constitue une ligne de défense de l’organisme, non spécifique,
dirigée contre les agressions des agents infectieux (bactéries, virus, parasites et champignons)
le plus souvent, mais aussi traumatiques, tumorales et auto-immunes [1]. L’inflammation est
aussi l’ensemble des mécanismes réactionnels de défense par lesquels l’organisme reconnaît,
détruit et élimine toutes les substances qui lui sont étrangères [2]. En effet, elle est la
conséquence d’une réaction immunologique dont les agents responsables sont les antigènes
qui sont les non soi et les anticorps dirigés contre ces derniers. L’un des principaux
mécanismes visant à limiter ces processus pathologiques passe par la production (par le foie)
de façon précoce des protéines dites « inflammatoires » dont les principales sont : la protéine
C réactive, la fibrinogène et l’haptoglobine qui peuvent être facilement dosées à partir d’une
prise de sang. La protéine C réactive(CRP) est donc un paramètre diagnostic de
l’inflammation tout comme la vitesse de sédimentation.
Par ailleurs, un taux de sédimentation érythrocytaire est un test sanguin non spécifique
commun, qui est utilisé pour détecter et surveiller l’inflammation dans le corps. Elle occupe
encore une place importante dans les bilans sanguins à la recherche du syndrome
inflammatoire [3].
Ce travail avait pour objectif d’étudier la nécessité de l’association de la prescription dans le
cadre de la recherche d’un syndrome inflammatoire, par l’étude de corrélation entre la vitesse
de sédimentation (VS) et la protéine C réactive chez les patients du service de la pédiatrie
dans le diagnostic du syndrome inflammatoire.
Ce travail a été réalisé après avoir remarqué que les demandes reçues au niveau du laboratoire
pour l’investigation d’un syndrome inflammatoire comportent le plus souvent une association
de deux paramètres dont la VS et la CRP en même temps.
Ce travail effectué au laboratoire du Centre Hospitalier Universitaire de Zone Abomey-calavi
/ So-Ava est subdivisé en trois (03) parties.
La première partie va s’occuper de la présentation du cadre de stage, ensuite la deuxième
partie du déroulement du stage et enfin la troisième partie du traitement du sujet choisi.
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Présentation du cadre de stage
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1. PRESENTATION DU CADRE DE STAGE
1.1. Cadre institutionnel
Le déroulement de notre formation s’est effectué au département du Génie de la Biologie
Humaine (GBH), spécialité Analyse Biologique et Biochimique (ABB) à l’Ecole Supérieure
le Faucon (ESF). Le parcours a duré trois années comme prévu pour la licence
professionnelle.
1.2. Cadre technique
L’étude s’est déroulée au CHUZ Abomey-Calavi/Sô-Ava. Ce centre de santé comprend les
services suivants : le service administratif et financier, la médecine, le laboratoire polyvalent
de biologie, le service de radiologie, le service de la pédiatrie, le service des urgences, le
service de néonatologie, un bloc opératoire et la maternité. Notre étude a été faite au
laboratoire polyvalent de biologie clinique.
1.2.1. Historique de l’Hôpital de Zone d’Abomey-Calavi / Sô-Ava
Selon la pyramide sanitaire du Benin, chaque zone sanitaire doit être dotée d’un centre de
référence. C’est dans ce cadre qu’il a été démarré dans la zone sanitaire d’Abomey-Calavi, au
cours de l’année 2000, la construction d’un Hôpital de zone. Les communes d’Abomey-
Calavi et de Sô-Ava dépendent de ce centre. Cet hôpital de zone a été inauguré le 12 mai 2003
par le Ministre de la santé d’alors. Il n’a été mis en service que le 18 aout 2003. Il convient de
noter que le Centre Hospitalier Universitaire de zone d’Abomey-Calavi / Sô-Ava est une
structure périphérique de la pyramide sanitaire et est placé sous la tutelle technique et
administrative du Ministère de la Santé et dépend directement de la Direction Départementale
de la sante de l’Atlantique et du Littoral.
1.2.2. Situation géographique
Implanté dans le département de l’Atlantique a environ trente (30) kilomètres de Cotonou et
plus précisément dans la commune d’Abomey-Calavi au quartier ZOPAH, le Centre
Hospitalier Universitaire de zone d’Abomey-Calavi / Sô-Ava est situé à moins d’un (1)
kilomètre du carrefour Arconville sur la voie de ZOPAH en face de la station terrienne de
BENIN TELECOM SA.
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Déroulement du stage
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2. DEROULEMENT DU STAGE
2.1. Objectif du stage
2.1.1. Objectif général
Apprendre à faire usage de tous les appareils de diagnostic en biologie et en biochimie.
2.1.2. Objectifs spécifiques
- Participer aux différentes étapes de réalisation des examens de biologie médicale en v
ue de diagnostic courant
- Identifier les difficultés liées au processus du diagnostic et à l’environnement du travai
l
- Analyser les difficultés identifiées
- Proposer des solutions techniques, administratives et ou de gestion appropriées
2.2. Travaux effectués par section de laboratoire
2.2.1. Hématologie
Dans cette section, différents examens sont réalisés. On a entre autres :
Vitesse de sédimentation
La détermination de la vitesse de sédimentation des globules rouges repose sur le principe
que dans du sang rendu incoagulable, les globules rouges sédimentent spontanément avec une
certaine vitesse. Cette vitesse est liée à l'équilibre protéique du plasma. Normalement, elle est
lente. Dans un grand nombre de maladie (syndrome inflammatoire), elle est augmentée, en
raison de l’augmentation des protéines dans le plasma. La hauteur de la colonne de plasma au-
dessus de la couche de globules rouges mesurée en millimètre représente la vitesse de
sédimentation.
Le sang veineux est recueilli dans un tube contenant un anticoagulant (du citrate de
sodium) après homogénéisation soigneuse du sang, on le dépose sur une échelle de lecture. La
lecture se fait après 1h.
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Tableau I : valeurs normales de la VS
sexe 1ere heure 2eme heure
Homme 3-15mm <20mm
Femme 4-15mm <20mm
Une augmentation de la VS (réalisée dans les règles de l'art) est une indication
aspécifique d'un trouble physiologique. Exemples : Anémie, grossesse, infections
(rhumatisme articulaire aigu, pneumonie, tuberculose, trypanosomiase, leishmaniose, etc),
cancer, leucémie. Une V.S. normale exclut la présence de beaucoup de maladies. Certaines
maladies ne provoquent cependant pas d'augmentation de la V.S. (exemples : malaria aiguë,
fièvre typhoïde, brucellose, maladie virales, maladies mentales, ...). Une lecture de la vitesse
de sédimentation après 2 heures est peu utile.
Hémogramme
La numération consiste à compter les cellules du sang grâce à un automate. Cet automate
est constitué de deux électrodes de platine. La tâche principale du technicien est de confirmer
la bonne utilisation de l'appareil. Pour cela il doit effectuer un contrôle quotidien qu'il doit
comparer à un abaque donné par le fournisseur. Tous les matins un contrôle est effectué pour
pouvoir confirmer le bon fonctionnement de la machine.
Après avoir homogénéisé pendant 15 minutes l’échantillon sur un rotor ; on plonge
l’électrode dans le sang et on l’aspire en appuyant sur le bouton d’aspiration une fois
l’aspiration terminée, on retire l’échantillon et la machine établit le dosage de l'hémoglobine
et détermine la Concentration Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine, la Teneur
Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine, le Volume Globulaire Moyen.
2.2.2. Parasitologie
On distingue plusieurs examens tels que :
Goutte Epaisse et Densité Parasitaire
C’est un examen qui a pour but de détecter dans le sang les parasites sanguicoles en
l’occurrence les trophozoites de Plasmodium falciparum (parasites responsables du
paludisme) et ceci sous leur forme de trophozoites.
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La GE est une méthode de concentration par contre le frottis sanguin est une méthode
d’identification de l’espèce plasmodiale. La technique se présente comme suit :
• Frottis sanguin
- Recueillir (sang capillaire) ou déposer (sang veineux) une petite goutte de sang à deux
centimètres de l’une des deux extrémités d’une lame propre et bien dégraissée
- Tenir la lame d’une main (entre le pouce et l’index), et de l’autre main le bord de la la
me rodée ou de la lamelle juste en avant de la goutte de sang afin que la goutte s’étale
au bord de la lamelle ou de la lame rodée
- Glisser la lame rodée ou la lamelle d’un mouvement doux et régulier jusqu’au bout de
la lame d’étalement
• Goutte épaisse
- Recueillir (sang capillaire) ou déposer (sang veineux) une goutte de sang à un centimè
tre du frottis
- Etaler le sang à l’aide d’une lame ou d’une lamelle en faisant un mouvement circulaire
de manière à obtenir un cercle d’un centimètre de diamètre
- Laisser sécher, identifier la lame (écrire au crayon le nom et le prénom du patient sur l
e frottis) et fixer le frottis
- Laisser sécher
- Recouvrir le frottis du May Grunwald pendant 3 minutes et rincer à l’eau
- Ensuite recouvrir le frottis et la goutte du Giemsa dilué à 10%
- Laisser pendant 15 minutes et rincer à l’eau
- Laisser sécher et observer au microscope à l’objectif 100X avec l’huile à immersion.
L’interprétation des résultats se fait de la manière suivante
• Densité parasitaire
Elle permet d’apprécier la parasitémie par la connaissance du nombre de parasite par
microlitre de sang. Soit X le nombre de leucocytes comptés et Y le nombre de plasmodies
comptés. La formule de la DP sera :
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6000 * Y
DP = = nombre de parasites /ul
X
NB :::: On s’arrête à 200 leucocyte si le nombre de parasite compté est supérieur ou égale à 10 ;
si moins de 10, on continue jusqu’à 500 leucocytes.
2.2.3. Biochimie
On distingue plusieurs examens tels que :
Les transaminases (Aspartate aminotransférase et Alanine aminotransférase)
Les aminotransférase catalysent le transfert d’un groupement amine d’un acide aminé
à α cétoglutarate pour former du glutamate et un autre produit selon l’acide aminé concerné. L
a vitesse de la réaction est proportionnelle à la vitesse de conversion du NADH en NAD+. Cet
te vitesse est déterminée à 340 nm. Pour le réaliser,
- Disposer de deux tubes étiquetés Blanc (tube 1), et Echantillon (tube 2)
- Prélever 1000µl du réactif d’ASAT dans les deux tubes
- Lire le Blanc
- Ensuite ajouter 100µl de l’échantillon au contenu du tube 2, homogénéiser et faire la l
ecture instantanément
- Faire le même processus pour l’ALAT en utilisant le réactif d’ALAT
Tableau II : valeurs normales de ALAT et ASAT
ALAT UI/L ASAT UI/L
Nouveau-né 13-45 Nouveau-né 39-117
Homme 10-40 Enfant 23-94
Femme 7-35 Adulte 13-31
- Une élévation légère se voit en cas de trouble hépatique lié à l’alcool, en cas d’hépati
te virale chronique ou de stéatose (accumulation de graisses dans les cellules du foie),
par exemple. Par ailleurs, un rapport ASAT/ALAT > 2 fait davantage penser à une ma
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ladie alcoolique du foie.
- Une élévation plus importante correspond plutôt à une hépatite virale aiguë (l’élévat
ion peut être très importante dans les 4 à 6 semaines qui suivent la contamination), à d
es lésions induites par des médicaments ou une intoxication, ainsi qu’une ischémie hé
patique (arrêt partiel de l’irrigation sanguine au niveau du foie).
Créatininémie
Il est basé sur la réaction de Jaffet. La créatinine forme en présence de l’acide picrique
en milieux alcalin du picrate de créatinine. La vitesse d’apparition du complexe jaune orangé
formé est proportionnelle à la concentration en créatinine dans l’échantillon. La lecture se fait
à 505nm. La technique est la suivante :
- Prélever 1000µl du réactif (500 µl du R1 et 500 µl du R2) dans trois tubes identifiés B
lanc, Etalon et Dosage
- Ajouter 100µl d’eau distillée dans le 1er tube, homogénéiser et faire instantanément la
lecture
- Ajouter 100ul de l’étalon au 2ème tube, homogénéiser et faire instantanément la lecture
- Ajouter 100µl du sérum de l‘échantillon au troisième tube, homogénéiser et faire insta
ntanément la lecture
Tableau III : valeurs normales de la créatinine
Créatininémie Mg/L
Homme 9-13
Femme 6-11
Enfant 3-10
Une concentration élevée de créatinine dans le sang peut être le signe :
- d’une atteinte de la fonction rénale
- d’une insuffisance cardiaque
- d’un épuisement physique
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- d’une déshydratation
- d’une blessure musculaire
Une concentration basse de créatinine dans le sang peut-être le signe :
- d’une faible masse musculaire
- d’une atteinte du foie
- d’une grossesse
NB : La valeur de la clairance revêt une signification sémiologique fondamentale lors de
l’étude d’une insuffisance rénale.
2.2.4- Sérologie
Les différents examens effectués dans cette section sont entre autres :
Treponema Pallidum Hemagglutinations Assay
Le TPHA est un test biologique quantitatif utilisé pour diagnostiquer la syphilis. Pour
la détecter, il étudie la réaction d'hémagglutination passive en utilisant des tréponèmes fixés
sur des globules rouges de mouton ou de poussin.
- Disposer d’une microplaque propre
- Identifier 3 puits 1, 2 et 3
- Mettre 190µl du diluant dans le puits 1
- Ajouter au contenu du puits 1 10µl du sérum du patient
- Homogénéiser le contenu du puits 1 et distribuer 25µl du mélange dans chacune des
puits 2 et 3
- Ajouter 75µl de cellules contrôle dans le puits 2
- Ajouter 75µl de cellules test dans le puits 3
- Homogénéiser mécaniquement ou manuellement le contenu des puits
- Couvrir la plaque et la placer à l’abri de la lumière de la chaleur et de toutes sources
de vibration
- Incuber 45-60 minutes à température ambiante et lire le résultat
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Tableau IV : La lecture du résultat de la TPHA
Résultats Cellules Test Cellules contrôles
Fortement positif Voile de cellules
couvrant la totalité du
fond du puits
Pas d’agglutination,
bouton compact
Légèrement positif Voile de cellules
couvrant les 1/3 du
fond du puits
Pas d’agglutination,
bouton compact
Indéterminé Voile de cellules avec
un trou central bien
visible
Pas d’agglutination,
bouton compact
Négatif Cellules compactées en
un bouton central,
habituellement avec un
petit centre clair
Pas d’agglutination,
bouton compact
Le dosage de la crp latex
Principe du test
Le réactif latex est une suspension de particules latex polystyrène de dimension uniforme
sensibilisées à la fraction IgG d’un sérum spécifique anti-CRP humain les particules de
lUatex permettent une observation visuelle de la réaction antigène anticorps (CRP-IgG
anti-CRP). Si la réaction à lieu, due à la présence de protéine C réactive dans le sérum, la
suspension de latex change son apparence uniforme et une agglutination claire devient
évidente. Cette modification a lieu car la protéine c réactive présente dans le sérum réagit
avec les IgG fixés sur les particules de latex, formant un tissu entre elles. Quand on
mélange le réactif latex avec le sérum, si celui-ci contient plus de 6 mg/L de protéine C
réactive, une agglutination nette apparait.
• Méthode quantitative
Mode opératoire :
- Porter les réactifs et les échantillons à la température ambiante (+15/+25°C).
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- Remettre en suspension le réactif latex par agitation répété du flacon (4-5 fois)
- Déposer 50ul de l’échantillon (ou une goutte de contrôle) sur une des sections de la
lame
- Ajouter une goutte de réactif à côté de la goutte d’échantillon
- Mélanger les deux gouttes à l’aide d’un bâtonnet en recouvrant toute la surface de la
section de la lame
- Agiter la lame avec un léger mouvement de rotation, manuellement ou à l’aide d’un
agitateur rotatif (80-100rpm) pendant 2 minutes
- Vérifier la présence ou l’absence de l’agglutination
Résultat positif
Tableau V : La lecture du résultat de la CRP
Résultats Interprétation
+++ Grand agrégat sur fond transparent
++ Agrégat modéré sur fond légèrement opaque
+ Agrégat fins sur fond opaque
Résultat négatif : Absence d’agrégat, suspension uniforme
• Test semi- quantitative
Matériel complémentaire :
-micropipette et tubes à essais
-chlorure de sodium (09g/L)
-un agitateur rotatif
Procédure :
Le test semi-quantitatif peut être effectué selon le même mode opératoire que le test
quantitative en réalisant des dilutions du spécimen dans Na Cl 9g/l comme suit :
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Tableau VI : Procédure du dosage de la CRP latex semi-quantitatif
Dilution ½ ¼ 1/8 1/16 1/32 1/64
Na Cl 9g/L 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl
Spécimen 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl
50µl
50µl
50µl
50µl
50µl
Transférer sur un cercle de la lame de test
Spécimen dilué 50µl 50µl 50µ 50µl 50µl 50µl
Réactif 1 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl
Calculer les résultats selon les formules suivante :
6 * N° de la
dilution
6 * 2 6 * 4 6 * 8 6 * 16 6 * 32 6 * 64
Résultat 12 24 48 96 192 384
2.2.5. Bactériologie
Plusieurs examens sont réalisés ; nous avons :
- L’Examen Cytobactériologique des Urines (ECBU),
- L’examen cytobactériologique du liquide céphalorachidien(LCR)
- Le spermogramme.
Examen cytobactériologique des urines
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L’examen cytobactériologique des urines, ou sédiment urinaire est un examen de biologie
médical, étudiant l’urine d’un patient. Il est fréquemment utilisé pour diagnostiquer une
infection urinaire. C’est une analyse qui s’effectue en plusieurs étapes que sont :
Technique
Au laboratoire, l’urine doit être analysée sans retard.
• Examen macroscopique
- Noter l’aspect de l’urine (couleur, turbidité, odeur, corps étranger)
- Prélever 2 à 5 ml d’urine homogénéisée
- Centrifuger à 1500-2500 tours/min pendant 10 minutes
- Rejeter le surnageant ;
- Apprécier le culot
• Examen microscopique
1ere étape : Etat frais
- Homogénéiser le culot
- Disposer d’une lames porte objets en verre
- Déposer une goutte du culot sur la lame
- Recouvrir la goutte avec la lamelle
- Monter au microscope pour l’observation à l’objectif×10 puis ×40 de l’état frais, pour
identifier et quantifier les sédiments.
A cet effet, on peut avoir, les leucocytes, les hématies, les levures, les cristaux
d’oxalate de calcium ou d’acide urique, des cellules épithéliales
2eme étape : Etat coloré
- A l’aide d’une anse de platine, faire l’étalement sur une seconde lame
- Délimiter la zone d’étalement
- Laisser sécher l’étalement à l’air ambiant
- Fixer la lame à la flamme du bec bunsen puis coloré au gram.
Coloration de Gram
C’est une coloration différentielle qui permet d’apprécier la morphologie des germes,
leur disposition et leur affinité au colorant (Gram+ ou Gram-). Le principe de cette coloration
est le suivant :
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- Recouvrir la lame avec le violet de gentiane pendant une minute
- Rincer abondamment à l’eau
- Rincer à l’eau distillée
- Recouvrir la lame avec le lugol et attendre une minute
- Rejeter le lugol et rincer
- Recouvrir la lame avec l’alcool à 95° degré ou alcool acétone pendant 30 à 60
secondes
- Rejeter et rincer
- Laisser agir 20 secondes Recouvrir la lame avec la solution de fuchsine
- Rincer et sécher
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2.3. Justification
La vitesse de sédimentation est un examen du laboratoire qui permet de déceler un
diagnostic, un syndrome inflammatoire, une infection chez le patient. Elle est un indice pour
le médecin que vous pourriez avoir une maladie lignée à l’inflammation, comme arthrite,
cancer ou infection. Le test de VS mesure la vitesse à laquelle les globules tombent au fond
d’un tube. L’inflammation créée des protéines qui accélère la chute des globules rouges. Elle
peut être une méthode pour suivre l’évolution du traitement des maladies caractérisées par
l’inflammation [9]. Toutefois, le test de vitesse de sédimentation ne peut qu’indiquer au
médecin que vous avez une inflammation quelque part dans votre corps, il ne peut pas
montrer où se trouve l’inflammation ou ce qui-là causer. De plus la VS peut également être
modifiée au cour d’un état pathologique n’impliquant pas un syndrome inflammatoire mais
une anomalie des immunoglobulines et hémoglobinopathie. Quant à la CRP, elle est une
protéine sérique spécifique de la réaction inflammatoire synthétisée par le foie, précocement
au cour de la réponse inflammatoire. En effet la CRP est beaucoup plus sensible et spécifique
à l’inflammation avec un diagnostic plus précis que la VS. La vitesse de sédimentation peut
être augmentée en absence d’inflammation par les facteurs tels que : l’âge, le sexe, la
grossesse, l’anémie, l’augmentation de la quantité d’immunoglobuline. La polyglobulie et
présence de certaines immunoglobulines anormales (la cryoglobuline) peuvent ralentir la VS
en présence d’inflammation [8]. Si la VS et la CRP pris séparément présente d’insuffisance
dans le diagnostic du syndrome inflammatoire, le couple permettrait de diagnostiquer un
syndrome inflammatoire.
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Etude du thème
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3. ETUDE DU THEME
3.1. OBJECTIFS DE L’ETUDE
3.3.1. Objectif général
L’objectif de ce travail était d’étudier la corrélation entre la vitesse de sédimentation et le
dosage de la protéine C réactive chez les patients du service de la pédiatrie au CHUZ
d’Abomey-Calavi/Sô-Ava dans le diagnostic du syndrome inflammatoire.
3.3.2. Objectifs spécifiques :
- Décrire l’intérêt de la VS dans le diagnostic du syndrome inflammatoire
- Décrire l’intérêt la CRP dans le diagnostic du syndrome inflammatoire
- Déterminer la corrélation entre la VS et la CRP
- Proposer des solutions pour une prise en charge correcte du syndrome inflammatoire.
3.2. SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE
3.2.1. Généralité sur le sang
3.2.1.1. Définition
Le sang est un liquide rouge qui circule dans les artères, les veines et les capillaires sous
l’impulsion du cœur, et qui irrigue tous les tissus de l’organisme, auxquels il apporte les
éléments nutritifs (glucose, par exemple) et l’oxygène, et dont il recueille les déchets.
3.2.1.2 Composition
Le sang est constitué de cellules (les globules et les plaquettes) qui baignent dans un liquide
salé, le plasma. Sont également présents dans ce plasma des substances dissoutes (le glucose,
le cholestérol, les sels minéraux, etc.), des grosses protéines (anticorps, globulines) ainsi que
des protéines géantes comme l’albumine qui servent de transporteur pour toutes les
substances qui ne peuvent être dissoutes dans le plasma en raison de leur taille ou de leurs
compositions
3.2.1.3 Le sérum
Le plasma est un liquide de couleur jaunâtre quand il est isolé (c’est-à-dire quand on a enlevé
tous les autres constituants du sang). Il transporte les nutriments fournis par la digestion et les
déchets produits par les cellules ainsi que les protéines et autres agents intervenants dans la
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coagulation. Il est composé de 90% d’eau dans laquelle baignent les protéines parmi
lesquelles l’albumine (la plus importante) et les globulines (immunoglobulines ou anticorps)
et des sels minéraux.
3.2.2. La vitesse de sédimentation :
La vitesse de sédimentation (VS) est un examen de laboratoire qui consiste à laisser
sédimenter les hématies dans un tube vertical. On mesure la distance parcourue en une heure
puis en deux heures. La méthode de référence est la méthode de Westergren La VS est un
examen simple, peu coûteux, reproductible et permet surtout de détecter une anomalie des
immunoglobulines (hypergammaglobulinémie, gammapathie monoclonal). [3]
La vitesse de sédimentation est un test sanguin qui vérifie l’inflammation dans le corps. C’est
un indice qui permet de vérifier que vous pourriez avoir une maladie liée à l’inflammation
comme infection, cancer, vascularite systémique.
3.2.3. La protéine C réactive
3.2.3.1 Définition
La protéine c réactive est une protéine sérique spécifique de la réaction inflammatoire,
synthétisée par le foie, précocement au cours de la réponse inflammatoire. [5]
C’est aussi une protéine synthétisée par le foie après pénétration dans le sang d’un antigène.
Son apparition dans le plasma sanguin s’effectue immédiatement après l’introduction d’un
antigène dans l’organisme et disparait plus tard lors de la formation des anticorps. [6,7]
La CRP est constituée chimiquement par l’association du sucre (polysaccharide extrait du
pneumocoque C et plus précisément de la capside de cette bactérie) et d’une protéine. Elle
porte pour cette raison le nom de glycoprotéine. [8]
3.2.3.2. CRP : caractéristiques générales
Le rôle de la CRP dans l’organisme n’est pas précisément déterminé mais on sait qu’elle a la
capacité d’interagir avec de nombreux ligands, qu’elle peut activer le complément et stimuler
la phagocytose [9]. Ainsi, un rôle protecteur de la CRP contre les infections a été évoqué [5].
Chez le sujet sain, la CRP existe à l’état de trace dans le plasma (généralement < 3 mg/L) et il
y a relativement peu de variations inter- et intra-individuelles [4].
Corrélation entre la protéine c reactive et la vitesse de sédimentation chez les patients du service de la pédiatrie au chuz Abomey-calavi/Sô-ava
Réaliser par : OGODO D. Augustin Page 33 sur 52
Le site principal de production de la CRP est l’hépatocyte, principalement sous le contrôle
transcriptionnel de la cytokine Il-6. Même si d’autres sites de production ont été décrits
(monocytes/macrophages alvéolaires, reins en période d’inflammation, cellules musculaires
lisses), leur contribution au taux de CRP circulante est marginale en comparaison avec la
production hépatocytaire. [10,4]
3.2.3.3. CRP : Déterminants du taux circulant
La synthèse de CRP est remarquablement dynamique : après un stimulus majeur, la
concentration plasmatique de CRP peut varier dans des rapports importants (jusqu’à 1000 fois
le taux de base) en 24 à 48 heures et peut chuter rapidement dans le même délai après
traitement du stimulus. La demi-vie plasmatique de la CRP est de 12 heures et demeure
constante dans différentes conditions chez le sujet sain ou malade [11]. Ainsi, le seul
déterminant de la concentration de CRP circulante est son taux de synthèse qui dépend
directement du stimulus à l’origine de la production de CRP [12].
La production de CRP fait partie de la phase aiguë non spécifique de réponse à une
inflammation, à une infection ou à un dommage tissulaire. En conséquence, une augmentation
du taux de CRP est mise en évidence dans de nombreuses pathologies : maladies
inflammatoires chroniques (par exemple : polyarthrite rhumatoïde), nécroses (infarctus du
myocarde, pancréatite aigüe), tumeurs, traumatismes, brûlures [11]. Il existe notamment une
littérature abondante et récente sur l’importance de la CRP dans l’athérosclérose : des
élévations modestes du taux de CRP circulante seraient associées à un risque augmenté de
pathologies coronariennes à long terme et, au cours de l’infarctus du myocarde, une
augmentation importante de la CRP serait associée à une augmentation des risques de
mortalité et de complications cardiaques [13].
3.2.3.4. CRP : Utilisation comme marqueur biologique d’infection
Comme il a été vu, beaucoup de facteurs influencent le taux plasmatique de CRP. Bien que la
CRP ne soit en rien spécifique de l’infection, de nombreuses études ont montré l’intérêt de
son dosage comme argument en faveur de la présence d’une infection, notamment en
réanimation. Ainsi, il a été montré que le dosage de la CRP présentait une puissance
supérieure à des paramètres tels que la température ou la numération des leucocytes dans le
diagnostic d’infection chez des patients de réanimation [14, 15].
Corrélation entre la protéine c reactive et la vitesse de sédimentation chez les patients du service de la pédiatrie au chuz Abomey-calavi/Sô-ava
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3.2.4. Réaction inflammatoire
La réaction inflammatoire est l’ensemble de mécanisme physiologiques de défense visant à
circonscrire et à réparer les lésions tissulaires. Ces lésions peuvent être provoquées par
différents pathogènes (bactéries, virus ou parasites), des traumatismes physiques ou
chimiques, les corps étrangers exogènes. [7,8]
La réaction inflammatoire est une composante de la réponse immune. Elle est impliquée dans
l’immunité naturelle en réponse à un signal de danger.
Elle est le plus souvent une réponse adaptée strictement contrôlée par multiples système
régulateur. Elle est généralement protectrice en participant aux processus de défense naturelle
et à la réparation de tissus lissés. Si la réaction inflammatoire est inadaptée ou mal contrôlée
elle peut devenir agressive. Ainsi les syndromes inflammatoires sont fréquemment rencontrés
en pratique courante et le médecin doit évaluer leur importance et en faire le diagnostic
étiologique car l’inflammation peut être associée à une grande variété de situation
pathologiques (infection, maladie du système, cancer, pathologie thromboemboliques). [6]
3.3. MATERIELS ET METHODES
3.3.1. Type et période d’étude
Il s’agit d’une étude transversale et descriptive qui s’est déroulée du 02 mars au 09 mai 2020
3.3.2. Population d’étude
Notre population était constituée des patients du service de la pédiatrie reçus au laboratoire de
sérologie Médicale et au laboratoire d’hématologie du CHUZ Abomey-calavi/ Sô-ava
3.3.2.1. Critères d’inclusion
Etaient inclus dans l’étude les sujets des deux sexes et d’âges comprise entre 2 mois à 17ans,
chez qui la protéine C réactive soit positive ou non et quel que soit le motif de consultation
3.3.2.2. Critères de non inclusion
Etaient exclus tout patient ayant un âge compris entre 2 mois et 17 ans chez qui la CRP et la
VS n’étaient pas demandés et les femmes enceinte qui ont un âge inferieur ou égale à 17 ans.
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3.3.3. Echantillonnage :
3.3.3.1. Méthode et technique d’échantillonnage
La méthode d’échantillonnage était non probabiliste avec la technique d’exhaustivité pour les
patients.
3.3.3.2. Taille de l’échantillon
Pour notre étude nous avons travaillé sur un effectif de 62 patients reçus pour suspicion
d’infection au laboratoire.
3.3.4. Collecte de données :
3.3.4.1. Techniques des données
Deux techniques de collecte des données ont été utilisées : L’enquête par questionnaire et le
prélèvement.
3.3.4.2. Outils de collectes
Les outils de collecte étaient le questionnaire et le matériel de prélèvement.
3.3.5. Le prélèvement
Chaque sujet de l'échantillonnage a bénéficié de deux types de prélèvements : un prélèvement
par ponction veineuse de 5 ml de sang dans un tube contenant de l'anticoagulant (citrate de
sodium ou EDTA) pour la VS et un autre prélèvement de 5 ml de sang dans un tube sec (tube
rouge) sans anticoagulant pour le dosage de la CRP.
3.3.6. Traitement et analyse des données :
3.3.6.1. Analyses au laboratoire
Le sang recueilli est centrifugé à 3000 tours/min pendant 3 minutes et le sérum servira à la
réalisation du CRP.
Un dosage de CRP-latex et une mesure de VS par la technique de Westergren ont été réalisé
pour le même sujet, suite à une prescription médicale
3.3.7. Dosage de la protéine C reactive
Test d’agglutination au latex sur lame pour la détermination qualitative et semi-qualitative de
la (CRP) dans le sérum humain.
E
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3.3.7.1. Principe du test
Le réactif latex est une suspension de particules latex polystyrène de dimension uniforme
sensibilisées à la fraction IgG d’un sérum spécifique anti-CRP humain les particules de latex
permettent une observation visuelle de la réaction antigène anticorps (CRP-IgG anti-CRP). Si
la réaction à lieu, due à la présence de protéine C réactive dans le sérum, la suspension de
latex change son apparence uniforme et une agglutination claire devient évidente. Cette
modification a lieu car la protéine c réactive présente dans le sérum réagit avec les IgG fixés
sur les particules de latex, formant un tissu entre elles. Quand on mélange le réactif latex avec
le sérum, si celui-ci contient plus de 6 mg/L de protéine C réactive, une agglutination nette
apparait après 2 minutes.
3.3.7.2. Composition du kite (MEDIFF : one for all)
- Réactif Latex : suspension de particules de latex sensibilisées avec des IgG d’anti-
CRP humaine, dans un tampon. Azide de sodium 0.95g/L
- Contrôle positif (+) : sérum humain immunisé (CRP>20mg/L). Azide de sodium
0.95g/L
- Contrôle négatif (-) : sérum animal. Azide de sodium. 0,95g/L
Figure 1 : matériels nécessaire pour le dosage de la CRP
Corrélation entre la protéine c reactive et la vitesse de sédimentation chez les patients du service de la pédiatrie au chuz Abomey-calavi/Sô-ava
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3.3.7.3. Prélèvement Utilisé le sérum prélevé selon les techniques standards de ponction veineuse dans les tubes en
verre ou en plastique avec ou sans gel séparateur.
Il faut s'assurer que la coagulation est terminée avant d'effectuer la centrifugation.
Conservation : La durée maximale de conservation est de 2 jours à température 2 à 8 C.
3.3.7.4. Mode opératoire
Nous avons effectué deux tests :
• Test quantitatif
• Test semi-qualitatif
3.3.7.4.1. Test quantitatif
- Porter les réactifs et les échantillons à la température ambiante (+15/+25°C).
- Remettre en suspension le réactif latex par agitation répété du flacon (4-5 fois)
- Déposer 50ul de l’échantillon (ou une goutte de contrôle) sur une des sections de la
lame
- Ajouter une goutte de réactif à côté de la goutte d’échantillon
- Mélanger les deux gouttes à l’aide d’un bâtonnet en recouvrant toute la surface de la
section de la lame
- Agiter la lame avec un léger mouvement de rotation, manuellement ou à l’aide d’un
agitateur rotatif (80-100rpm) pendant 2 minutes. Ne pas dépasser les 2 minutes pour
éviter le phénomène d’évaporation pouvant conduire à une erreur d’interprétation
- Vérifier la présence ou l’absence de l’agglutination à la fin du test
- Rincer la lame à l'eau déminéralisée et sécher à l'air libre.
• Lecture et interprétation :
Examiner macroscopiquement la présence ou l'absence de visible agglutination
immédiatement après le retrait de la lame du dispositif de rotation.
-La présence d'agglutination indique une concentration de CRP égale ou supérieure à 6 mg / L
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-l'absence d'agglutination indique une concentration de CRP inferieur a 6mg/l, figure 2
Résultat négatif : Absence d’agrégat, suspension uniforme
Figure 2 : Test CRP au latex
3.3.7.4.2. Test semi- quantitative
• Matériel complémentaire :
-micropipette et tubes à essais
-chlorure de sodium (09g/L)
-un agitateur rotatif
• Procédure :
Le test semi-quantitatif peut être effectué selon le même mode opératoire que le test
quantitatif en réalisant des dilutions du spécimen dans Na Cl 9g/l comme suit : préparé les
dilutions dans des tubes a essais.
Corrélation entre la protéine c reactive et la vitesse de sédimentation chez les patients du service de la pédiatrie au chuz Abomey-calavi/Sô-ava
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Tableau VI : Procédure du dosage de la CRP latex semi-quantitatif
Dilution ½ 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64
Na Cl 9g/L 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl
Spécimen 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl
50µl
50µl
50µl
50µl
50µl
Transférer sur un cercle de la lame de test
Spécimen dilué 50µl 50µl 50µ 50µl 50µl 50µl
Réactif 1 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl 50µl
Calculer les résultats selon les formules suivante :
6 * N° de la
dilution
6 * 2 6 * 4 6 * 8 6 * 16 6 * 32 6 * 64
Résultat 12 24 48 96 192 384
3.3.8. Mesure de la vitesse de sédimentation
3.3.8.1. Principe
Il s’agit de remplir le sang anti-coagulé des tubes de diamètres calibrés, disposer
verticalement et laisser reposer le mélange. La vitesse de sédimentation est la hauteur de la
colonne de plasma dépourvu de globule rouge après un temps donné.
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3.3.8.2. Matériels et réactifs
- Sang prélevé sur citrate de sodium dans la proportion de 1 volume de citrate pour 4
volume de sang ;
- Tube à sédimentation de westergren gradué de 0 à 200mm, d’une longueur de 30mm
et d’un diamètre de 2,5mm
- Support à sédimentation tenant les tubes dans une position parfaitement verticale,
- Une poire aspirante adaptée au tube pour le pipetage
Figure 3 : tube de Westergren
3.3.8.3. Technique
Le sang veineux est soigneusement mélangé. Le test doit être effectué dans les deux heures
qui suivent le prélèvent du sang, cependant un retard de 6h est toléré si le sang est conservé à
4°C.
- Remplir le tube westergren jusqu’au repère 0 en évitant la formation de bulle d’air ;
- placer le tube à sédimentation verticalement sur le support, laisser en attente. Après
première heure, lire la hauteur de la colonne du plasma dépourvu de globule rouge
directement en mm sur le tube
- Reprendre la lecture à la deuxième heure et les résultats.
NB : les supports des tubes doivent être à l’abri de toute variation. Cet examen doit être fait à
une température constante (20-22°C).
3.3.9. Analyse statistique des données
Nos données ont été saisies et analysées dans le logiciel SPSS version 21 et le logiciel Excel
2013. Des analyses descriptives (calcul de pourcentages) et analytiques (calcul du coefficient
de corrélation de Pearson) ont été effectuées. Les résultats ont été considérés comme
significatifs si p value < 0,05.
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Résultats
Caractéristiques des sujets
Le tableau ci-dessous nous renseigne sur la répartition de la population d’étude en
fonction du sexe et de tranche d’âge. En effet, 55% des patients étaient de sexe féminin.
S’agissant de la répartition de la population d’étude par tranche d’âge, la majorité des
enfants de la population d’étude ont un âge compris entre 2 mois à 5 ans (soit 53,2%).
Tableau II : répartition de la population d’étude par sexe et tranche d’âge
SEXE
Tranche
d’âge
Féminin Masculin
TOTAL Effectif % Effectif %
]2 mois-5ans]
18
29,12
15
24,19
33 (55,2%)
]5ans-10ans]
8
12,90
8
12,90
16 (25,8%)
]10ans-17ans]
8
12,90
5
8,06
13 ( 21%)
TOTAL
34
55
28
45
62 (100%)
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Résultats de la crp et de vs
La figure ci-dessous nous présente la répartition de la population d’étude en fonction des
résultats de la CRP. 65% des patients avaient un résultat de CPS positif (40 patients sur 62)
Figure 5 : Répartition des résultats de la CRP chez les sujets prélevés
La figure ci-dessous nous informe la répartition de la population d’étude en fonction des
résultats de la VS. En effet, il a été observé une VS normale chez 28 enfants (soit 45%) et une
VS accélérée chez 34 enfants (soit 55%).
Figure 6 : Répartition des résultats de la VS chez les sujets prélevés
65%
35%
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
P0SITIF NEGATIF
CRP
55%
45%
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
Accélérée Normal
VSVSVSVS
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Relation entre la CRP et la VS
Le tableau ci-dessous nous renseigne sur la distribution de la CRP et la VS. Il convient de
noter que les patients ayant une VS accélérée/CRP positive (38,71%) présentent un
pourcentage supérieur à ceux qui ont les VS normale/CRP positive (25, 81%). Il a été aussi
remarqué que chez 10 patients (16,13%) une VS accélérée/CRP négative dont 8 anémiés.
Tableau III : répartition de la population d’étude en fonction de la CRP et la VS
CRP TOTAL
CRP
POSITIVE(%)
CRP
NEGATIVE(%)
VS
(%)
Normale 25,81 19,35 45
Accélérée 38,71 16,13 55
TOTAL 65 35 100
La figure 7 nous renseigne une corrélation entre CRP et VS à la deuxième heure. Il a été noté
une faible corrélation entre CRP et VS à la 1ère heure égale à r=0,297.
Figure 7 : courbes de corrélation entre CRP et VS1
y = 0,5854xR² = 0,0471
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
0 20 40 60 80 100 120 140 160
CR
P (
mg/
L)
VS (mm/h)
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La figure 8 renseigne sur la corrélation entre VS1 et VS2. En effet, il a été constaté une forte
corrélation soit r=0,970 entre VS1 et VS2.
Figure 8 : courbe de corrélation entre VS1 etVS2
Le tableau ci-dessous nous montre les valeurs de coefficient de corrélation entre la CRP/VS1 ;
la CRP/VS2 et VS1/ VS2. Il a été remarqué qu’il y a une forte corrélation (0, 970) entre la
VS à la première heure et celle à la seconde heure.
Tableau IV : coefficient de corrélation
Coefficient de corrélation Valeurs
CRP et VS1 0 ,297
CRP et VS2 0,260
VS1 et VS2 0,970
y = 1,3726xR² = 0,9333
0
50
100
150
200
250
0 20 40 60 80 100 120 140 160
VS
2
VS 1
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COMMENTAIRES
Cette étude menée au CHUZ Abomey-calavi/Sô-ava a montré qu’il y a une faible corrélation
entre la CRP et la VS à la 1ère heure autant qu’à la 2ème heure ayant pour coefficients
respectivement 0,297 et 0,260. Cependant, il a été noté une forte corrélation entre la VS à la
première et celle à seconde heure soit un coefficient de 0,97. Ces résultats sont en accord avec
celui trouvé par Boukhari A. en Algérie dans son étude qui prend en compte 14 enfants âgés
de 06 ans à 16 ans chez qui il a trouvé comme coefficient de corrélation respectivement 0,564
; 0,432 et 0, 965 entre VS1/CRP ; VS2/CRP et VS1/VS2 [16]. Il convient de noter que l’étude
a permis de trouver 65% de CRP positive et 55% de VS accélérée de la population d’étude.
Ces résultats sont en accord avec ceux trouvés par Gabolde M. et Croisille L. en France
(2002) dans leur étude rétrospective prenant en compte 62 enfants âgés de 2 mois à 15 ans. La
CRP était supérieure à 100 mg/L dans 63% ; 64% ; 100% et 25 % des maladies de Still,
maladies de Kawasaki, des hémopathies malignes et des syndromes inflammatoires restés
sans diagnostic respectivement ; la VS était supérieure à 100 mm/h dans 88% ; 62% ; 100% et
12,5 % des maladies de Still, maladies de Kawasaki, des hémopathies malignes et des
syndromes inflammatoires restés sans diagnostic [17]. Le résultat était aussi concordant avec
celui de Mondé A. et Djessou P. en 2008 à Abidjan. 53 patients, soit 74,6% avaient une CRP
élevée, et 18 patients soit 25,4% avait une CRP normale [18]. Il est avéré que nos résultats
sont également en accord avec celui de Diallo O. en 2010 à travers son étude sur intérêt de la
CRP dans le diagnostic des infections bactérienne en néonatologie au mali. Les résultats de
ces études révèlent 60% de cas de CRP positives [19]. Les résultats obtenus étant en accord
avec ceux de Boukhari A. montrant une faible corrélation entre CRP et VS incitent à revoir la
prescription concomitante de la VS et la CRP chez certains cas, notamment chez les enfants
de 0 à 10 ans, l’interférence avec l’anémie, les hémoglobinopathies et anomalie des globules
rouges peuvent interférer dans la mesure de la VS. Nous avons remarqué que les patients qui
ont une valeur de CRP élevée n’ont pas toujours une VS accélérée. C’est le cas de certains
patients qui ont respectivement une concentration de 384mg/L ; 192mg/L et 192mg/L en CRP
et des valeurs de VS 60mm/h, 75mm/h et 120mm/h. Il a été noté également qu’il y a un grand
écart entre les valeurs de la CRP et celles de la VS chez les patients ayant un âge compris
entre 2 mois à 10 ans soit un écart de 56,75 comparativement aux patients qui ont un âge
compris entre 11ans à 17 ans soit un écart de 14,43. Ce grand écart empêcherait l’utilisation
judicieuse des résultats de la VS et de la CRP dans cette tranche d’âge
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Conclusion
Notre étude a été prospective et a concerné 62 enfants hospitalisés au service de la pédiatrie
du CHUZ Abomey-calavi/Sô-ava pendant la période allant de 02 mars au 09 mai 2020 pour
suspicion de syndromes inflammatoires. Au terme de cette étude, il a été noté une nette
prédominance féminine (55%) et une forte proportion d’enfants de 2mois à 5ans constaté dans
la population étudiée (53,2%). La vitesse de sédimentation et la C Réactive Protéine sont deux
marqueurs biologiques de routine pour diagnostiquer et suivre l’évolution d’une
inflammation. Les résultats qui ont été obtenu dans notre travail (65%) de CRP positive et
(55%) de la VS accélérée démontrent qu’il existe une variabilité de corrélation entre la vitesse
de sédimentation et la Protéine C Réactive selon l’âge. Revoir l’intérêt des deux prescriptions
est nécessaires pour déterminer quel paramètre est plus utile. Des études supplémentaires
peuvent être suggérées afin de confirmer la nécessité des deux paramètres dans le diagnostic
et dans le suivie des syndromes inflammatoires.
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SUGGESTIONS
Au terme de ce travail, nous suggérons :
A l’endroit des médecins cliniciens, de faire la prescription concomitante de la vitesse de
sédimentation et CRP.
A l’endroit des biotechnologistes, de faire le titrage en cas de CRP positif et d’éviter la
vibration du tout genre du dispositif de westergren lors de la réalisation de la vitesse de
sédimentation.
A l’endroit des autorités de l’Ecole Supérieure le Faucon, il s’agit d’augmenter la période du
stage pour les années à venir afin de permettre aux étudiants de parcourir toutes les sections
du laboratoire.
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REFERENCES
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et cliniques. Conduite à tenir. Module 8-Item 128
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5. Sacoub P., Terrier B. vitesse de sédimentation et les marqueurs de l’inflammation.
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7. Devulder B., Hatron Py, Hachulla : aspect clinico-biologique. Medicine interne. Abrégé
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9. Sangare, Monnet D., Diallo T. Et Yapo A. E. Intérêt clinique du dosage de la protéine C-
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10. Wilwert E., Dourson J. et Rausch S. Les marqueurs biologiques de l’inflammation.
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16. A. Boukhari, Maissaa H., Souad B. Etude de la corrélation entre la vitesse de
sédimentation des hématies et la protéine C reactive dans la recherche d’un syndrome
inflammatoire
17. C. Pajot, D. Pariente, S. Muller1, M. Gabolde1, L. Croisille, F. Archambaud.
Syndromes inflammatoires fébriles non infectieux de l’enfant : diagnostic, contribution des
examens complémentaires. Arch Pédiatre 2002 ; 7 : 671-8.
18. Monde A., Djessou P., Tiahou G., Niamke A., SESS E évaluation de la c reactive protéine
(crp) au cours du paludisme a plasmodium falciparum à Abidjan. Rev. Int. Sc. Méd. Vol.1O
N °3. 2008 pg 22-27
19. C. O. Diallo. Intérêt de la « C-reactive protéin » (CRP) dans le diagnostic des infections
bactériennes néonatales au CHU-GABRIEL TOURE. 2010. page : 20-58.
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TABLES DES MATIERES DEDICACES ............................................................................................................................ 5
HOMMAGES ........................................................................................................................... 6
REMERCIEMENTS ................................................................................................................ 7
LISTE DES ABREVIATIONS ............................................................................................... 8
LISTE DES TABLEAUX ........................................................................................................ 9
LISTE DES FIGURES ........................................................................................................... 10
RESUME ................................................................................................................................. 11
ABSTRACT ............................................................................................................................ 12
SOMMAIRE ........................................................................................................................... 13
INTRODUCTION .................................................................................................................. 14
Présentation du cadre de stage ................................................ 15
1. PRESENTATION DU CADRE DE STAGE ................................................................ 16
1.1. Cadre institutionnel ........................................................................................................ 16
1.2. Cadre technique ................................................................................................................... 16
1.2.1. Historique de l’Hôpital de Zone d’Abomey-Calavi / Sô-Ava .................................. 16
1.2.2. Situation géographique ............................................................................................... 16
Déroulement du stage................................................................. 17
2. DEROULEMENT DU STAGE ......................................................................................... 18
2.1. Objectif du stage ...................................................................................................................... 18
2.1.1. Objectif général ................................................................................................................ 18
2.1.2. Objectifs spécifiques .......................................................................................................... 18
2.2. Travaux effectués par section de laboratoire ......................................................................... 18
2.2.1. Hématologie ....................................................................................................................... 18
2.2.2. Parasitologie ...................................................................................................................... 19
2.2.3. Biochimie ............................................................................................................................ 21
2.2.4- Sérologie ............................................................................................................................. 23
Tableau I : procédure du dosage de la CRP latex semi-quantitatif. ........................................... 26
2.2.5. Bactériologie ....................................................................................................................... 26
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2.3. Justification contextuelle.......................................................................................................... 29
: Etude du thème .......................................................................... 30
3. ETUDE DU THEME ...................................................................................................... 31
3.1. OBJECTIFS DE L’ETUDE .................................................................................................. 31
3.3.2. Objectifs spécifiques : ........................................................................................................... 31
3.2. SYNTHESE BIBLIOGRAPHIQUE .......................................................................................... 31
3.2.1. Généralité sur le sang ........................................................................................................ 31
3.2.2. La vitesse de sédimentation : .......................................................................................... 32
3.2.3. La protéine C réactive ..................................................................................................... 32
3.2.4. Réaction inflammatoire .................................................................................................. 34
3.3. MATERIELS ET METHODES .......................................................................................... 34
3.3.1. Type et période d’étude ............................................................................................... 34
3.3.2. Population d’étude.......................................................................................................... 34
3.3.3. Echantillonnage .............................................................................................................. 35
3.3.4. Collecte de données : ...................................................................................................... 35
3.3.5. Le prélèvement................................................................................................................ 35
3.3.6. Traitement et analyse des données : .............................................................................. 35
3.3.7. Dosage de la protéine C reactive ..................................................................................... 35
Figure 1 : matériels nécessaire pour le dosage de la CRP ....................................................... 36
Figure 2 : Test CRP au latex ................................................................................................... 38
3.3.8. Mesure de la vitesse de sédimentation ............................................................................. 39
3.3.9. Analyse statistique des données ........................................................................................ 40
RESULTATS ................................................................................. Erreur ! Signet non défini.
Figure 4 : la réparation de la population d’étude en fonction du sexeErreur ! Signet non défini.
Tableau II : répartition de la population d’étude par tranche d’âgeErreur ! Signet non défini.
Figure 5 : Répartition des résultats de la CRP ........................................................................ 42
Figure 6 : répartition des résultats du VS ................................................................................ 42
Tableau III : répartition de la population d’étude par CRP et VS .......................................... 43
Figure 7 : courbes de corrélation entre CRP et VS1 ............................................................... 43
Figure 8 : courbe de corrélation entre VS1 etVS2 .................................................................. 44
Tableau 4 : coefficient de corrélation ..................................................................................... 44
COMMENTAIRES ................................................................................................................ 44
CONCLUSION .............................................................................. Erreur ! Signet non défini.
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SUGGESTIONS ..................................................................................................................... 47
REFERENCE ........................................................................................................................ 48
TABLES DES MATIERES ................................................................................................... 50