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T-Select MHC Tetramer可以特异性检测抗原特异性 T细胞的试剂

研究用

第 5 版

在 T细胞上表达的 T细胞受体（T Cell Receptor，TCR）可以特异性识别 MHC分子与肽片段的复合物（MHC/peptide complex）并与其结合。CD8 阳性 T 细胞可以识别 MHC Class I 分子与肽片段的复合物（MHC class I/peptide complex），由于其会直接攻击、排除病毒感染细胞与癌细胞等目标细胞，因此称为细胞毒性 T细胞（Cytotoxic T Lymphocyte, CTL）。另一方面，CD4阳性 T细胞通过识别MHC Class II分子与肽片段的复合物（MHC class II/peptide complex）被活化。CD4 阳性 T 细胞主要指辅助 T 细胞（T helper cells，Th），并存在以下几种：作用于承担细胞免疫的 CTL、巨噬细胞等的 Th1 细胞，以及作用于树突状细胞与 B细胞并激活体液免疫的 Th2细胞。1996年，Altman等人使用 MHC四聚体试剂，成功地通过流式细胞仪在单个细胞水平上对特异性 T细胞进行了检测。抗原特异性 T细胞原本只能通过细胞因子的产生和细胞毒性活性的确认等间接方式检测，而 MHC 四聚体这项突破性的技术，不仅使抗原特异性 T 细胞可以被直接检测和分离，也可以实现对其功能与表型等的详细分析。现在，MHC 四聚体试剂作为 T 细胞免疫应答的必要监测工具，广泛应用于传染病及癌症疫苗疗法、细胞免疫疗法、移植免疫、自身免疫疾病等基础

研究或临床开发领域中。

NKTTarget cells

Cell death

B cell

Dendritic cellsCD8+T

IL-2IFN-γTNF-α

IL-4IL-5IL-10IL-13

IL-4IL-12

Antibodies

IL-10TGF-β

IL-6+TGF-β

TGF-β

S100A8/A9PerforinGranzymeIFN-γTNF-α

Pathogens

T-Select MHC Tetramer

MHC class II

MHC class I

Th17β2m

T细胞受体

MHC分子

荧光标记物

抗原特异性T细胞

使用 MHC 四聚体检测抗原特异性 T 细胞的原理 ..................................................................... 3

T-Select MHC class I Tetramer 试剂的制备方法 .................................................................... 3

T-Select HLA class I Tetramer 的高特异性 ............................................................................. 4

T-Select MHC Tetramer 染色方法 ........................................................................................... 5

全血 ......................................................................................................................................................... 5人外周血单核细胞（Human PBMC）, 小鼠脾细胞（Mouse splenocyte） .............................................. 6

抗人 CD8 抗体的克隆引起的染色效果差异 ............................................................................. 6

MHC 四聚体直接识别 CTL 的特异性 ....................................................................................... 7

使用外周血诱导细胞毒性 T 细胞 [ MLPC 法（Modified by MBL）] ........................................ 7

癌抗原 WT1（突变型）特异性 CTL 的诱导与检测 .................................................................. 8

癌抗原 survivin-2B 特异性 CTL 的检测 .................................................................................... 9

癌症相关 T-Select MHC Tetramer 的染色例 ......................................................................... 10

病毒·传染病相关 T-Select MHC Tetramer 的染色例........................................................... 10EBV ....................................................................................................................................................... 10CMV ....................................................................................................................................................... 11Influenza M1 .......................................................................................................................................... 12HTLV-1 .................................................................................................................................................. 13

抗原特异性 CTL 的各种测定方法与 MBL 试剂盒 ................................................................... 14

IMMUNOCYTO CD107a Detection Kit .................................................................................................. 14IMMUNOCYTO Cytotoxity Detection Kit ................................................................................................ 15

MHC 四聚体相关产品 ............................................................................................................ 16

利用抗 HLA 抗体进行 HLA 的初步分型 .................................................................................................. 16Clear Back（Human FcR blocking reagent）- Tetramer 染色的封闭试剂 ............................................. 16抗原特异性 CTL 诱导用 peptide ............................................................................................................ 16

抗原特异性小鼠 CTL 的诱导方法 .......................................................................................... 17

体外刺激诱导小鼠抗原特异性 CTL（流感病毒） ................................................................................... 17

Mouse MHC class I Tetramer 的染色例 ................................................................................ 18

H-2Kb OVA Tetramer ............................................................................................................. 20

使用 T-Select Mouse MHC Tetramer 的 Tetramer blocking assay ....................................... 22

T-Select Mouse MHC class II Tetramer ................................................................................ 23I-Ab OVA323-339 Tetramer-PE .................................................................................................................. 23

I-Ab ESAT-61-20 Tetramer-PE ................................................................................................................. 24

T-Select CD1d Tetramer ....................................................................................................... 26

T-Select MHC Tetramer 与 MBL ........................................................................................... 28

定制四聚体试剂 ..................................................................................................................... 29MHC class I custom Tetramer ............................................................................................................... 29Human MHC class II custom Tetramer .................................................................................................. 30

QuickSwitchTM Custom Tetramer Kit ..................................................................................... 31

T-Select MHC Tetramer 使用文献 ......................................................................................... 34

T-Select MHC Tetramer 产品列表 ......................................................................................... 36

2 欲了解产品详情，请致电产品热线：400-000-9858

使用 MHC 四聚体检测抗原特异性 T细胞的原理

在抗原呈递细胞（antigen-presenting cell, APC）内部被加工的特定多肽序列，通过 APC 上表达的 MHC分子被呈递到细胞表面形成 MHC/多肽复合物，T 细胞受体（TCR）可以识别 MHC/多肽复合物，通过与其结合激活 T 细胞。根据该原理，可以利用 MHC/多肽复合物检测抗原特异性 T 细胞。但是，当 MHC/多肽复合物处于单体（Monomer）状态时，对 TCR 的亲和性较低，且二者的结合不稳定，因此很难将单体作为检测工

具使用。若将 MHC/多肽复合物生物素化，通过链霉亲和素将 MHC/多肽复合物单体四聚体（Tetramer）化，就可以使其与 TCR 保持在一个稳定的结合状态，成为可以利用的检测工具。T-Select MHC Tetramer使用了FITC、PE、APC（别藻蓝蛋白）或 BV421 等荧光物质标记，因此可以使用流式细胞仪或荧光显微镜检测抗原

特异性 T 细胞。

MHC/ 多肽复合物的单体（Monomer）与 TCR的亲和性较低，无法稳定结合，因

此无法用来检测特异性

CTL。

通过将 MHC/多肽复合物四聚体（Tetramer）化，使其与TCR 稳定结合，可以检测特异性 CTL。

T-Select MHC class I Tetramer试剂的制备方法

＜制备过程概述＞

HLA Peptide

生产者的话

折叠

生物素化

四聚体化

进行 MHC class I heavy chain, β2m,多肽的折叠，形成 MHC class I/多肽复合物(单体)。每天监测形成的单体。

单体

利用 BirA酶生物素化MHC class I heavy chain C端上的赖氨酸残基。通过层析柱纯化除去杂质。

d-Biotin

利用生物素－亲和素结合进行四聚体化。

从折叠到四聚体化需要 9～14天。

荧光标记的链霉亲和素

MHC四聚体

由 Altman 等建立的 MHC Class I Tetramer试剂制备技术被广泛地应用。Altman 等证实了利用 MHC class I/多肽复合物四聚体作为探针，可以定量检测抗原特异性CTL（Science 1996, 274: 94-96）。Bodinier 等在 HLA class I heavy chain α3 结构域中引入单点突变（A245V），有效地降低了与 CD8 分子的非特异性结合，将其特异性大幅地提高（Nat. Med. 2000, 6：707 – 710）。因此 T-Select Human HLA class I Tetramer是用 α3 结构域引入了变异的 HLA class I heavy chain 制备而成的。制备过程如右图所示。在大肠杆菌表达的重组蛋白 MHC class I heavy

chain和 β2-microglobulin（β2m）中加入抗原多肽片段并进行折叠后，形成可溶性的 MHC class I/多肽复合物单体。然后，利用 BirA 酶将复合单体中 MHC class I heavy chain的 C 端上的赖氨酸残基生物素化。将生物素化复合单体通过柱层析的方法纯化。纯化后的生物素

化单体与标记了荧光色素的链霉亲和素结合，形成四聚

体，从而完成 T-Select MHC Tetramer 的制备。

T细胞受体

MHC分子β2m

荧光标记物

抗原特异性 T细胞

北京博尔迈生物技术有限公司 http://www.bio-med.com.cn 3

T-Select HLA class I Tetramer 的高特异性

在人体内，CD8 分子具有辅助 HLA 与 CTL 结合的功能。

因此，在 HLA 分子上存在与 CD8 分子结合的位点。T-Select HLA class I Tetramer 在与 CD8 分子结合的 α3 结构域内引入一

个点突变，由此抑制了 CD8 分子与四聚体试剂的非特异性结

合，这极大地提高了四聚体试剂的特异性。（法国专利号：FR9911133）

＜参考文献＞

1）Gao GF, et al., Nature 387: 630 − 634 （1997） 2）Bodinier M, et al., Nat. Med. 6: 707 − 710 （2000）

染色例 1：HLA-A*02:01 CMV pp65 Tetramer

α3 domain of HLA-A2.11)

利用 HLA-A*02:01 CMV pp65 Tetramer试剂，对 HLA-A*02:01阳性 CMV 阳性患者外周血（左），和 HLA-A*02:01 阴性外周血（右）进行染色。从实验结果可以看出，使用 HLA class I heavy chain α3 结构域中引入突变的 T-Select MHC 四聚

体试剂（下），和原来没有引入突变的四聚体试剂（上），所表现出的特异性有明显差别。

T-Select HLA class I Tetramer 通过向 HLA class I heavy chain α3 结构域中引入变异，将与 CD8 分子的非特异性结合降

到最低，极大地提高了特异性。

法国专利号：FR9911133

非特异性结合位点没有引入突变

非特异性结合位点引入突变

MHC/多肽复合物

可以有选择性的检测出特异性 TCR

MHC/ 多肽复合物

非目标特异性TCR

CD8 分子与四聚体试剂非特异性结合，会检测出非特异性 CD8 阳性细胞

四聚体

试剂

四聚体

试剂

特异性 TCR

没有引入突变的四聚体

CD8-FITC HLA-A*02:01 CMV pp65包含特异性 CTL 的细胞群

CD8-FITC HLA-A*02:01 CMV pp65不包含特异性 CTL 的细胞群

引入突变的四聚体

CD8-FITC HLA-A*02:01 CMV pp65包含特异性 CTL 的细胞群

CD8-FITC HLA-A*02:01 CMV pp65

不包含特异性 CTL 细胞群

245228

染色例 2：HLA-A*24:02 EBV BRLF1 Tetramer

从 HLA-A*24:02 阳性健康人外周血中分离 PBMC，利用 MLPC 法诱导获得 EBV BRLF1 CTL line。使用 HLA α3 结构域中引入突变的 HLA-A*24:02 EBV BRLF1 Tetramer-PE （MBL 货号 TS-M002-1）和 HLA-A*24:02 Negative Tetramer-PE（MBL 货号 TS-M007-1），以及 HLA α3 结构域中没有引入突变的 HLA-A*24:02 EBV BRLF1 Tetramer-PE 分别进行染

色。结果显示，使用 HLA α3 结构域中没有引入突变的

四聚体，CD8 阳性细胞中发现了非特异性染色。而使用

HLA α3 结构域中引入突变的四聚体则没有发现非特异

性染色。

※ 通过淋巴细胞门以及 7-AAD 阴性门分析本数据。

T-Select MHC Tetramer 染色方法

阴性对照四聚体

EBV BRLF1 Tetramer

α3 结构域有突变结构域无突变

CD8(T8)-FITC

■ 全血1）采集静脉血于肝素采血管中。 2）在 200 μL 的全血中加入 10 μL 的 T-Select MHC Tetramer-PE。 3）轻柔地进行涡旋震荡混合。 4）在室温下孵育 20 分钟，或者在 4℃下孵育 30 分钟。

5）加入 CD8 抗体等，在室温下孵育 20 分钟，或者在 4℃下孵育 30 分钟。

6）使用 OptiLyse C （BECKMAN COULTER Code No. A11895）、或者 OptiLyse B （BECKMAN COULTER Code No. IM1400）进行溶血、固定处理。请按照各

说明书中的方法进行操作。 7）溶血、固定的操作结束后，加入适量的 PBS 重悬细胞。 8）400 x g，离心 5 分钟。 9）小心地去掉上清，用 500 μL PBS 重悬细胞。

* 请将样品于 4℃避光保存，并在 24 小时内进行分析。

采血

200 μL 全血

添加试剂、孵育

MHC Tetramer-PE 10 μL CD8-FITC 20 μL

溶血固定处理

HLA-A*24:02 BRLF1

HLA-A*24:02 Negative

仅淋巴细胞门

FSC-H CD45-PC5

通过 CD45 染色将红细胞漫反射 gate out 处理，可以降

低干扰（右图）。

CD8(T8)-FITC

淋巴细胞门与 CD45 阳性门

使用流式细胞仪进行分析

★ 溶血处理不充分时，可以观察到红细胞漫反射引起的非特异性染色。请利用 CD45 同时染色，并通过淋巴细胞门进行分析。

于 PBS 中重悬

淋巴细胞门 CD45 阳性门

1）按照常规方法制备细胞，重悬细胞，使浓度在 1×106-7

cells/mL。

2）向 50 μL 的细胞悬液中加入 10 μL 的 Clear Back（MBL 货号 MTG-001），并在室温下反应 5 分钟。

3）加入 10 μL 的 T-Select MHC Tetramer-PE。 4）在室温下孵育 15-30 分钟，或者在 4℃下孵育 30-60 分钟。 5）加入 CD8 抗体等，在 4℃下孵育 20 分钟。 6）加入适量的 FCM 缓冲液 [2% FCS/0.05% NaN3/PBS] ，

400 x g，离心 5 分钟。 7）小心地去掉上清液。

8）将细胞置于 500 μL 的 FCM 缓冲液或者 0.5%多聚甲醛

/PBS 中再次重悬。

* 请将样品于 4℃避光保存，并在 24 小时内进行分析。

细胞

细胞的洗涤 (2% FCS/0.05% NaN3/PBS)

Clear Back (Human FcR blocking reagent)

封闭处理

添加试剂注 1)

T-Select MHC Tetramer-PE 10 μL CD8-FITC 20 μL

在室温下反应 15-30 分钟

或在 4℃下反应 30-60 分钟

注 1）・抗人 CD8 抗体强烈推荐使用克隆 SFCI21Thy2D3（俗称 T8）。其他的克

隆可能会抑制或者增强 TCR 与四聚体试剂的结合。

・抗小鼠 CD8 抗体强烈推荐使用克隆 KT15（MBL 货号 D271-4）。其他的

克隆可能会抑制或者增强 TCR 与四聚体试剂的结合。

・先使用四聚体试剂染色，然后使用 CD8 抗体进行染色，会使染色效果更好。・为了判断所用四聚体试剂的特异性，建议您同时使用阴性对照四聚体和阳

性对照四聚体进行染色。

注 2）・如细胞经过培养，请加入 7-AAD Viability 染料（死亡细胞检测试剂），根

据 FSC/FL3 点状显示图的走向，去除死亡细胞并进行分析。

抗人 CD8 抗体的克隆引起的染色效果差异

从 HLA-A*24:02 阳性健康人外周血中分离 PBMC，利用 HLA-A*24:02 EBV BRLF1 Tetramer-PE（MBL 货号 TS-M002-1）或 HLA-A*24:02 Negative Tetramer-PE（MBL 货号 TS-M007-1），和抗人 CD8 抗体的 3 种克隆（T8, SK1, B9.11）同时进行染色。

结果显示，在克隆 T8 中以斑点形式

T8 (推荐) SK1 B9.11

检测出了特异性 CTL，但是在 SK1 与

B9.11 中却出现了偏差变大的倾向。

＜参考文献＞ Rita C. et al., Int. Immunol. 14: 39 − 44 （2002）

HLA-A*24:02 EBV BRLF1 Tetramer-PE

HLA-A*24:02 Negative Tetramer-PE

CD8-FITC

洗涤

使用流式细胞仪进行分析注 2）

人外周血单核细胞（Human PBMC）小鼠脾细胞（Mouse splenocyte）

MHC 四聚体直接识别 CTL 的特异性

间接的

使用外周血诱导细胞毒性 T 细胞 [MLPC 法(Modified by MBL)]

T-Select MHC Tetramer 作为病毒抗原特异性或癌抗原特异性 CTL 的检测用试剂而被使用。但是，与病

毒抗原不同，癌抗原特异性 CTL 的数量非常少，在采血后很难立即被检测出。因此，研究人员设计了 MLPC法（Mixed Lymphocyte-Peptide Cultures）。该方法利用 96 孔板，在进行短时间的多肽刺激培养后，可以计

算出癌抗原特异性 CTL 在血中的频率。在 Karaniks 等人的论文（J. Immunol, 2003, 171:4898）中，通过

MLPC 法诱导接受疫苗疗法后的黑色素瘤患者的外周血中特异性 CTL，可以确认其数量出现增加。MBL 参考

了该方法并对其进行改良，提出了可以简便经济地从健康者的外周血中诱导癌抗原特异性 CTL 的方法。

将血细胞稀释 2 倍

室温离心室温离心

3,000 rpm 10 分钟.

未刺激时(Day 0)的分析

● 加入 10 μg/mL 抗原肽，使用多道移液器以 100 μL/孔的量向 96 孔板（U 形底）加液。48 小时后，向每孔加入含

有 IL-2 的培养基 100 μL。之后，观察培养基的颜色变化，适时进行换液，大致按照最初 1 周 1 次，接下来一周，

按每 2 ～ 3 天 1 次的频率，每次换掉一半培养基。加入的多肽与 IL-2 的浓度没有进行优化，多肽浓度需参考多肽

的溶解度与 BIMAS 等的评分，对其最佳条件进行探讨。

抗原刺激 ● 诱导病毒抗原特异性 CTL 时，大多数情况利用试管进行 MLPC 操作就可以满足测定要求，但是，诱导癌抗原特异性

CTL 时，由于其存在频率较低，因此推荐您使用下述利用 96 孔板进行的 MLPC 法。

四聚体染色抗原刺激分离淋巴细胞移去血浆肝素化血液

间接的

抗原特异性 T 细胞原本只能通过细胞因子的产

生和细胞毒性活性的确认等间接方式检测，而 MHC四聚体这项突破性的技术出现后，第一次可以利用

TCR 立体结构上的特征直接捕捉到特异性的 CTL。

病毒抗原

培养几小时-15 天

癌抗原

培养 12-15 天

96 孔板

-305% autoplasma/50 U/mL IL-2/2-ME/antibiotics/ RPMI1640

细胞毒性活性

直接的

细胞因子

64.2 35.4

96 孔板

0.04 0.02

35.4 64.6

癌抗原 WT1（突变型）特异性 CTL 的诱导与检测

淋巴细胞 1-3x105cells/well

5% autoplasma 抗原肽

1. 对每纵列的样品进行混合、染色

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

2. 对阳性纵列的每个样品进行染色

C 培养 12-15 天

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12

未刺激时（Day 0）的分析

: 四聚体阳性孔

(四聚体阳性孔数)

(细胞数/ 孔) x (总孔数) x (Day 0 的 CD8 阳性率)

2 2 x 105 x 96 x 0.35

2.98 x 10-7

of whole blood CD8 T cell

血浆分离前的采血管

96 个孔中有 2 个孔已确认存在四聚体阳性细胞。因此，可以判断采血时，收集的细胞中存在 2 个 WT1 特异性 CTL。除以采血时的 CD8 阳性细胞数，便可以计算出存在频率。

计算 CTL 的存在频率

分析抗原刺激分离淋巴细胞

0.06 2.74

35.661.6

以癌抗原 WT1 为例，展示 96 孔 MLPC 法的操作流程。从 HLA-A*24:02 阳性健康人外周血中分离

PBMC，利用 96 孔 MLPC 法诱导 WT1（突变型）特异性 CTL。进行多肽刺激后，在第 14 天使用 T-Select WT1（mutant）Tetramer（MBL 货号 TS-M014-1）进行染色。首先从 96 孔板中 1 纵列（8 孔）中的每个样

品各取一部分进行混合，分别对 12 个混合样品进行染色。然后，对检测出四聚体阳性细胞的纵列的每个孔进

行取样，用四聚体试剂染色确定特异性 CTL 所存在的孔。根据这些阳性孔的数量，运用下列公式，计算出特

异性 CTL 在采血时的存在频率。

1.29% 0.05%

用于目标四聚体与阴性

对照四聚体，共需要

2x106 个细胞。

因为目标四聚体与阴性对照四聚体可以同时进行染色，因此仅需要 1 x106 个细胞就可以进行分析。

癌抗原 survivin-2B 特异性 CTL 的检测

survivin

survivin-2B

142 aa

exon 1 exon 2 exon 2B exon 3 exon 4 165 aa

EPDDDPI----------------------------------EEHKKHSSGEPDDDPIGPGTVAYACNTSTLGGRGGRITREEHKKHSSG

survivin-2B 80-88

染色例：HLA-A*24:02 survivin-2B Tetramer-PE

survivin-2B 80-88 的参考文献

1) Hirohashi Y, et al., Clin. Cancer Res. 8: 1731 − 1739 (2002)2) Tsuruma T, et al., J Transl Med. 2: 19 − 29 (2004)3) Idenoue S, et al., Clin. Cancer Res. 11: 1474 − 1482 (2005)4) Kurotaki T, et al., J. Immunol. 179: 1803 − 1813 (2007)5) Tsuruma T, et al., J Transl Med. 6: 24 − 34 (2008)

HLA-A*24:02 survivin-2B

HLA-A*24:02 HIV (Negative) CTL clone 1 CTL clone 2

CD8-FITC Sample: 使用 survivin-2B 多肽刺激培养的淋巴细胞

CD8-FITC Sample: survivin-2B CTL clone

数据提供：北海道公立大学法人札幌医科大学病理学第一讲座鸟越俊彦教授、佐藤升志教授

染色例：HLA-A*24:02 Negative Tetramer-FITC/survivin-2B Tetramer-PE 的双重染色

在癌抗原中特别容易出现染色的样品量受到限制的情况。当客户的待测样品比较稀少时，我们提供了 HLA-A*02:01 以及 HLA-A*24:02 的 Negative Tetramer-FITC。通过使用 PE 或 APC 标记的目标四聚体试剂与 FITC 标记的阴性四聚体试剂对样品进行双

重染色，可以在一管样品中确认细胞是否被目标四聚体试剂特异性染色。

例：使用 1x106cells/sample 进行染色

对 CD8 阳性细胞集体进行 gating、分析

HLA-A*24:02 survivin-2B Tetramer-PE

HLA-A*24:02 Negative Tetramer-FITC

TS-M027-3 T-Select HLA-A*02:01 HIV gag Tetramer-SLYNTVATL-FITC TS-M007-3 T-Select HLA-A*24:02 HIV env Tetramer-RYLRDQQLL-FITC

使用以下试剂进行染色。・HLA-A*24:02 Negative Tetramer-FITC・HLA-A*24:02 survivin-2B Tetramer-PE・CD8-PC5

数据提供：北海道公立大学法人札幌医科大学病理学第一讲座鸟越俊彦教授、佐藤升志教授

Negative Tetramer-PE

目标Tetramer-PE

Negative Tetramer-FITC

目标Tetramer-PE

exon 1 exon 2 exon 3 exon 4 生存素（survivin）属于抑制细胞凋亡的 IAP（Inhibitor of Apoptosis）家族中一员，在正常细胞中的表达水平非常

低。据报告 survivin-2B（生存素的剪接变体之一）不会在

胸腺以外的正常组织中表达，但却在各种癌细胞中高水平

表达。札幌医科大学的佐藤等人确定了 survivin-2B 80-88

表位是一种不会在正常组织中表达的 survivin 序列，因此

可以成为癌免疫疗法中理想的目标。在日本，以札幌医科

大学为中心，使用 survivin-2B 80-88 表位的临床试验正在不

断开展。

（）内的数字表示 HLA-A*24:02 阳性健康人外周血中，

采血后利用每种四聚体检测出阳性的人数。（阳性检测者数/检测者总数）

癌症相关 T-Select MHC Tetramer 的染色例

染色例：HLA-A*24:02 WT1 Tetramer

从 HLA-A*24:02 阳性健康人外周血中分离

PBMC，经 MLPC 法诱导 WT1（mutant）特异性 CTL后，利用四聚体试剂进行染色。左起分别为 T-Select HLA-A*24:02 Negative Tetramer, HLA-A*24:02 WT1 （ wild ） Tetramer ， HLA-A*24:02 WT1 （ mutant ） Tetramer 染色的图片。右上的数值表示 CD8 阳性细胞

中的四聚体阳性细胞率（%）。

染色例：癌抗原四聚体试剂

从健康人外周血中分离 PBMC ，利用 MLPC 法诱导癌抗原特异性 CTL，通过四聚体试剂进行染色。

右上的数值表示 CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细胞

率（%）。

病毒·传染病相关 T-Select MHC Tetramer 的染色例

■ EBV染色例：HLA-A*24:02 EBV Tetramer

T-Select HLA-A*24:02 EBV Tetramer 中，有针对 5 种表

位的试剂供您选择（见下图）。T-Select HLA-A*24:02 EBV mix Tetramer （MBL 货号 TS-M009-1，上左）中混合有这 5种试剂，1 支试剂可以对 5 种 EBV 特异性 CTL 进行染色。各

表位的反应性存在个体差异，通过 5 种四聚体分别染色可以

判断 EBV mix 检测出的阳性图片来自于哪一个表位。

A*24:02 Negative(TS-M007-1)

A*24:02 WT1 (mutant)(TS-M014-1)

A*24:02 WT1 (wild)

CD8 (T8)-FITC

1.1 %0.0 % 1.0 %

10.6 %7.78 %

CD8 (T8)-FITC

HLA-A*24:02 WT1(mutant) HLA-A*24:02 hTERT HLA-A*02:01 NY-ESO-1

EBV mix Negative

EBV BRLF1(7/13)

EBV EBNA3A(5/13)

EBV EBNA3B(3/13)

EBV BMLF1(3/13)

EBV LMP2(2/13)

0.00 %

CD8 (T8)-FITC

0.00 %0.01 % 0.01 %0.06 %

0.25 %

0.17 %

(TS-M010-1) (TS-M011-1)(TS-M014-1)

■ CMV染色例：HLA-A*02:01 CMV pp65 Tetramer

从 HLA-A2 阳性健康人外周血中分离PBMC，然后用 T-Select HLA-A*02:01 CMV pp65 Tetramer （MBL 货号 TS- 0010-1）进行染色。 TS-0010-1 可以与HLA-A*02:01 以及 HLA-A*02:06 反应，但是不与 HLA-A*02:07 反应。右上的数值表示 CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细

胞率（%）。

＜参考文献＞ Morita Y, et al., Bone Marrow Transplant 36: 803 − 811 （2005）

染色例：HLA-A*24:02 CMV pp65 Tetramer

从 HLA-A*24:02 阳性健康人外周血中分离

PBMC，然后用 T-Select HLA-A*24:02 CMV pp65 Tetramer（MBL 货号 TS-0020-1）进行染色。右上的

数值表示 CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细胞率

（%）。使用 HLA-A*24:02 时，可能出现采血后没有

检测出特异性 CTL 的情况。阳性率虽然存在个体差

异，但与 HLA-A*02: 01 CMV pp65 相比大致较低。不

过，如下图所示，利用 MLPC 法诱导可以检测出 CMV 特异性 CTL 。

染色例：HLA-A*24:02 CMV pp65 特异性 CTL 的诱导与四聚体染色

从 HLA-A*24:02 阳性健康人外周血中分离 PBMC，经 MLPC 法诱导 HLA-A*24:02 CMV pp65 特异性 CTL 后，使用四聚体

试剂进行染色。结果显示，经过 1 周左右的培养，从采血后四聚体阳性率为 0% 的 PBMC 中可以得到出现明显阳性染色结果的

图片。通过该方法，对 10 名 HLA-A*24:02 阳性健康人外周血进行诱导，均可以检测到 CMV 特异性 CTL。右上的数值表示

CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细胞率（%）。

Donor 4 Donor 8Donor 6

A*02:07A*02:06A*02:01

0.00 %6.64 % 3.33 %

0.00 %0.01 %0.17 %

CD8（T8）-FITC

0.00 %0.02 % 0.01 %

CD8 (T8)-FITC

Day 0 Day 8 Day 11 Day 14

20.3 %0.00 % 1.37 %

CD8 (T8)-FITC

31.9 %

染色例：HLA-A*11:01, HLA-B*15:01 CMV pp65 Tetramer

从 HLA-A*11:01 及 HLA-B*15:01 阳性健康人外周血中分离 PBMC ，然后用 HLA-A*11:01 CMV pp65 Tetramer（MBL 货号 TS-M012-1）与 HLA-B*15:01 CMV pp65 Tetramer（MBL 货号 TS-M013-1）分别进行染

色。右上的数值表示 CD8 阳性细胞中的四聚体

阳性细胞率（%）。

经 MLPC 法诱导 CMV pp65 特异性 CTL后，第 14 天时用各四聚体试剂进行染色。结

果显示，经过 2 周左右的培养，从采血后四聚

体阳性率为 0.01% 与 0.06% 的 PBMC 中可以

得到出现明显阳性染色结果的图片。

■ Influenza M1染色例：HLA-A*02:01 Influenza M1 Tetramer

从 HLA-A2 阳性健康人外周血中分离 PBMC，然后用 T-Select HLA-A*02:01 Influenza M1 Tetramer （MBL 货号 TS-0012-1）进行染色。TS-0012-1 除了与 HLA-A*02:01 反应之外，也可以与 HLA-A*02:06 以及 HLA-A*02:07 反应。右上的数值表示

CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细胞率（%）。

day 0 day 14

HLA-B*15:01CMV pp65 Tetramer-PE

(TS-M013-1)

HLA-A*11:01CMV pp65 Tetramer-PE

(TS-M012-1)

CD8 (T8)-FITC

A(HLA-A*02:01)

B(HLA-A*02:01 /HLA-A*02:06)

C(HLA-A*02:06)

D(HLA-A*02:07)

HLA-A*02:01Influenza M1 Tetramer-PE

NegativeTetramer-PE

CD8 (T8)-FITC

0.00 % 0.01 %0.01 %0.01 %

0.19 % 0.06 %0.43 %0.12 %

■ HTLV-1染色例：HTLV-1 Tetramer

在无症状 HTLV-1 携带者（AC），ATLL，HAM / TSP 和自身免疫性疾病患者中检测出 HTLV-1 特异性 CTL 阳性的频率

等位基因四聚体 AC ATLL HAM/TSP AC with

autoimmune diseases A*02:01 Tax11-19 33% (3/9) 90% (9/10)

0% (0/9) 20% (2/10) 55% (6/11) 45% (5/11)

0% (0/9) 10% (1/10) 0% (0/9) 20% (2/10)

0% (0/11) 18% (2/11)

0% (0/9) 0% (0/10) 0% (0/9) 0% (0/10) 0% (0/9) 10% (1/10) 0% (0/9) 0% (0/10)

A*02:01 Tax123-131 A*02:01 Tax155-163 A*02:01 Tax178-186 A*02:01 Tax307-315 A*02:01 Env175-183 A*02:01 Env239-247 A*02:01 Env442-450 A*24:02 Tax12-20

73% (8/11) 9% (1/11) 0% (0/11) 9% (1/11) 9% (1/11) 0% (0/11) 0% (0/11) 0% (0/11)

11% (2/18) 0% (0/22) 13% (2/15) A*24:02 Tax187-195 11% (2/18) 0% (0/22) 7% (1/15) A*24:02 Tax289-297 0% (0/18) 0% (0/22) 13% (2/15)

0% (0/11) 9% (1/11)

18% (2/11) 18% (2/11) 24% (4/17) 18% (3/17) 18% (3/17)

A*24:02 Tax301-309 94% (17/18) 55% (12/22) 87% (13/15) A*24:02 Tax311-319 0% (0/18) 0% (0/22) 7% (1/15)

76% (13/17) 6% (1/17)

6% (1/18) 0% (0/22) 40% (6/15) 0% (0/18) 0% (0/22) 13% (2/15)

A*24:02 Env11-19 A*24:02 Env21-29 A*24:02 Env153-161 0% (0/18) 0% (0/22) 13% (2/15)

47% (8/17) 35% (6/17) 24% (4/17)

Tax CTL positives Env CTL positives Total CTL positives

22% (32/145) 10% (15/155) 26% (33/125) 1% (1/87) 0% (0/93) 15% (11/75)

14% (33/232) 6% (15/248) 22% (44/200)

26% (37/140) 27% (23/84) 27% (60/224)

(检测到 CTL 的受试者数/四聚体检测的受试者数)

HLA-A*24:02 HTLV-1 HLA-A*02:01 HTLV-1

Tax301-309 Tax12-20 Tax187-195 Env11-19 Tax11-19 Tax178-186 (TS-M018-1) (TS-M020-1) (TS-M021-1) (TS-M022-1) (TS-M017-1) (TS-M019-1)

HLA-A*11:01 HTLV-1 Tax88-96

(TS-M023-1)

CD8 (T8)-FITC

福冈大学药学部生化学・病态生化学教室小迫知弘教授

CD8 (T8)-FITC

参考文献：

1) Kannagi M, et al., J. Virol. 66: 2928-2933 (1992) 2) Yashiki S, et al., AIDS Res Hum Retroviruses 17: 1047-1061 (2001) 3) Harashima N, et al., J. Virol. 79: 10088-10092 (2005) 4) Kozako T, et al., J. Immunol. 177: 5718-5726 (2006) 5) Akimoto M, et al., J. Med. Virol. 79: 977-986 (2007) 6) Kozako T, et al., J. Med. Virol. 83: 501-509 (2011)

数据提供：

东京医科齿科大学研究生院医齿学综合研究科生物环境应答学系感染应答学讲座免疫治疗学领域神奈木真理教授

已知 HTLV-1（人 T 淋巴细胞白血病病毒-1，Human T-cell leukemia virus type1）会感染 T 细胞，引发成人 T 细胞白血病（ATLL）及 HTLV-1 相关性脊髓病（HAM/TSP），从感染者的数量以及相关疾病发病后的严重程度来看，HTLV-1 都是一种值

得关注的病毒。以 HTLV-1 感染及针对该感染的 CTL 为中心的宿主免疫应答，与相关疾病的发病有着紧密联系。日本研究者在

确定 HTLV-1 特异性 CTL 表位方面处于领先地位 1)-3)。鹿儿岛大学的团队使用 16 种四聚体试剂，发现在 ATLL 中 HTLV-1 Tax特异性 CTL 的多样性与数量有所减少 4)-5)，而在 HAM/TSP 中 HTLV-1 Env 特异性 CTL 的多样性与数量有所增加 6) 。

数据提供：国立大学法人鹿儿岛大学研究生院医齿学综合研究科难治病毒病态控制研究中心血液・免疫疾病研究领域有马直道教授

HLA-A*11:01 HTLV-1 Tax272-280

(TS-M024-1)

c ontrol peptide

cognate pept ide

抗原特异性 CTL 的各种测定方法与 MBL 试剂盒

MBL 不仅有四聚体试剂，还有用于检测抗原特异性 CTL 活性的试剂盒。如果与四聚体试剂联合使用，可以检测活化状态下的抗原特异性 CTL。

■ IMMUNOCYTO CD107a Detection KitCTL 受到抗原刺激而活化，会释放出细胞内囊泡中含有的穿孔素、颗粒酶等细胞毒性因子。伴随该过程，存在于囊泡内

膜中的 CD107a（LAMP-1）等出现在细胞膜上。因此，通过检测细胞表面上出现的 CD107 分子，可以间接检测细胞毒性因

子的释放。使用 IMMUNOCYTO CD107a Detection Kit （MBL 货号 4844），可以通过 CD107a mobilization assay 间接测定 CTL

引起的细胞毒性因子的释放情况。与 Intracellular IFN-γ assay 相比，虽然可以在短时间内完成测定，但是灵敏度稍低。不

过，通过 MBL 内部研究已知，在鉴别新 CTL 表位的研究中，与 IFN-γ 测定系统相比，CD107a mobilization assay 与四聚体

染色的相关性更好。

stimulation

99% 1% 100% 0%

CD107a CD107a

35% 65% 11% 89%

ELISPOT assay

T-Select MHC Tetramer

amer CD107a mobilization assay

Intracellular IFN-γ stain

Annexin V-KO

7.79 % 85.84 %

Cytotoxity detection assay

peptide (+) peptide ( - )

HLA-A*24:02 (CMV) HLA-A*24:02 (HIV) HLA-A*02:01 (CMV)

■ IMMUNOCYTO Cytotoxity Detection Kit ※ 本试剂盒不包含 CFSE 。

病毒感染细胞与肿瘤细胞等（靶细胞）被拥有细胞毒性活性的 T 细胞或 NK 细胞（效应细胞）直接识别，从而引起细胞

损伤。一般常用 51Cr 游离试验（铬释放试验）测定细胞毒性活性。但是，该试验需要使用放射性同位素（RI），使用时存在

一定限制。因此，研究者们设计了一种不使用 RI 测定细胞毒性活性的方法（Non-RI 法）。 IMMUNOCYTO Cytotoxity Detection Kit（MBL 货号 AM-1005）使用 CFSE 及标记了 Kusabira-Orange 的膜联蛋白 V

（Annexin V），对靶细胞进行双重染色，通过流式细胞仪测定细胞毒性活性。在被 CFSE 染色的靶细胞中，根据膜联蛋白

V（Annexin V）染色的细胞比例即死亡细胞的比例，可以测定效应细胞的细胞毒性活性。效应细胞没有被 CFSE 染色，因此

可以通过流式细胞仪简单区分与分析。有报道称此方法与铬释放试验有较高的相关性，并且可以不使用 RI 就能测定细胞毒

性活性，因此被广泛利用。

利用膜联蛋白 V（Annexin V）检测细胞凋亡的原理

在凋亡细胞中，由于膜结构的变化使存在于双层磷

脂质内侧的磷脂酰丝氨酸（PS）向细胞表层移动（右

图）。膜联蛋白 V（Annexin V）是一种 Ca2+依赖性磷

脂结合蛋白，对 PS 具有高亲和力，可以与凋亡细胞结

合。因此使用荧光素标记的膜联蛋白 V（Annexin V），

可以通过流式细胞仪检测出被效应细胞杀伤的靶细胞。 IMMUNOCYTO Cytotoxity Detection Kit 中，包含标记

了荧光蛋白 Kusabira-Orange（KO；Excitation Max 548 nm/Emission Max 559 nm ）的膜联蛋白 V（Annexin V）。

活细胞初期凋亡细胞

流式细胞仪的数据分析

右图为使用 IMMUNOCYTO Cytotoxity Detection Kit 分析细胞毒性活性的数据。效应细胞（E）、靶细

胞（T）如图下标注所示。发生杀伤后，CFSE 阳性的靶细胞会转变成膜联

蛋白 V 阳性。使用该数值（%），通过下列公式可以

计算出细胞毒性活性的数值。

细胞毒性 Cytotoxity(%)=[(ET-T0)/(100-T0)]×100

ET：共同培养效应细胞与靶细胞时的 CFSE+膜联

蛋白 V+ 细胞的比例（%）

T0：仅培养靶细胞时的 CFSE+ 膜联蛋白 V+ 细胞

的比例（%）

显示细胞毒性活性的图表

细胞毒性 Cytotoxity： 84.64% 细胞毒性 Cytotoxity：0.32%

右边 2 例为 HLA-A*24:02 CMV pp65 CTL line 的细胞毒性活性图表。

<图 1> 效应细胞： HLA-A*24:02 CMV pp65 CTL line 靶细胞: 由 OKT3 刺激而非特异性增殖的

HLA-A*24:02 auto PBMC line

<图 2> 效应细胞： HLA-A*24:02 CMV pp65 CTL line 靶细胞: 图中显示的各等位基因的 LCL ( )内为脉冲多肽的种类

该数据是根据“流式细胞仪的数据分

析”中记载的方法分析而来。

0 1:4 1:2 1:1

0 1:2 1:1 2:1

E:T=0:1 E:T=1:4 E:T=0:1 E:T=1:4

由于活细胞的 PS 不会暴露于细胞表面，因此无法与膜联蛋白 V 结合

在凋亡细胞中，膜结构损坏，PS 暴露于细胞表面，因此可以与膜联蛋白 V

结合。

E:T ratio E:T ratio

% 100 % 70

Annexin VKO

Annexin VCa2+

Ca2+PS

Annexin V

Annexin V-KO

E: A*24:02 EBV BRLF1 CTL lineT: BRLF1 peptide pulsed HLA-A24 LCL

Annexin V-KO

E: A*24:02 EBV BRLF1 CTL lineT: HLA-A2 LCL

7.79 %7.79 % 85.54% 8.43% 8.72%

FSC-H 淋巴细胞区 (R1) 单核细胞区 (R2)

MHC 四聚体相关产品

■ 利用抗 HLA 抗体进行 HLA 的初步分型

使用四聚体试剂时，判断样品的 HLA 基因型是必不可少的。即使是采

血时不清楚 HLA 类型的样品，在 HLA 基因分型之前使用抗 HLA 抗体，也可以初步判断 HLA 的血清类型。HLA-A24 阳性时使用 EBV mix Tetramer 染色，HLA-A2 阳性时使用 CMV pp65 Tetramer 染色，可以进一步提高可

能性。但是，用抗体进行的判断终究只是推断，请在相关机构进行 HLA 的基因分型。※使用抗 HLA-A24 抗体进行 HLA 分型的注意事项

・抗 HLA-A24 抗体（克隆 17A10, 22E1）经确认均与 HLA-B27 有交叉反应

性。但是，HLA-B27 在日本人中出现的频率极低。

・抗 HLA-A24 抗体（克隆 17A10, 22E1）虽然均与 HLA-B27 之外的某种

HLA 有交叉反应，但尚未明确是哪种 HLA。

・根据 MBL 的内部研究，A24 抗体阳性样品中约 20％为 HLA-A*24:02 阴

性。在抗 HLA-A24 抗体阴性样品中，还未检测到 HLA-A*24:02 阳性的样

品。HLA 类型间的差异大部分是几个氨基酸不同，而立体结构类似，使用

抗体检测如此微小差异是有极限的。请一定要进行 HLA 基因分型。

推断的 HLA 型

Donor A A24+/ A2+

Donor B A24+/ A2-

Donor C A24- /A2+

■ Clear Back（Human FcR blocking reagent）-Tetramer 染色的封闭试剂 -Clear Back（MBL 货号 MTG-001）作为抑制非特异性反应的试剂而开发，主要应用于使用流式细胞仪与荧光显微镜

的荧光抗体法中。如下图左边所示，对单核细胞使用该试剂可以明显抑制非特异性反应。使用四聚体试剂检测频率极低的细胞群时，抑制非特异性染色是一个关键点。Clear Back 亦能够抑制巨噬细胞与树突状细胞等抗原呈递细胞引起的内吞作用，

不仅对人，在小鼠样品中也同样可以发挥作用。并且使用方法也很简便（请参照第 5 页的染色方法）。下图右边为存在 Clear Back 或不存在 Clear Back 的情况下用 HLA-A*24:02 EBV BRLF1 Tetramer 对 PBMC 进行染

色的图片。可以看出四聚体阳性 CD8 阴性区的非特异性染色被抑制。

外周血单核细胞中 Clear Back 的效果外周血单核细胞中 Clear Back 的效果

With Clear Back Without Clear Back

CD8 (T8)-FITC

*利用 Clear Back ，使 CD8 阴性、四聚体阳性区的非特异性染色被抑制。

FL1-H FITC FL1-H FITC

在淋巴细胞区(R1) ，没有发现明显的非特异性染色。在单核细胞

区 (R2) ，通过 Clear Back 处理，非特异性染色被抑制。

■ 抗原特异性 CTL 诱导用 peptideMBL 销售用于 T-Select MHC Tetramer 的抗原表位多肽。在 MBL 您可以购买到与使用的四聚体相匹配的多肽序列，而

无需担忧定制多肽时出现序列错误。该产品以溶液状态发货，利用 MLPC 法诱导 CTL 时，操作方便。MBL 还提供用于诱导小鼠 CTL 的多肽，以及具有辅助功能的抗原肽。详情请参照产品列表（第 35 页）。

Tetramer code Peptide code 浓度容量溶液纯度备注

TS-XXXX-1 TS-XXXX-P 10 mg/mL 1 mg (100μL) DMSO 95%以上* 无菌等级

* 有部分序列不适用

使用 mouse IgG2a-FITC (5 μg/mL)反应

抗 A24 抗体（克隆 17A10）

抗 A2 抗体（克隆 BB7.2）

Donor D A24- /A2-

红色：有 Clear Back 处理绿色：无 Clear Back 处理

12.7%3.5% 2.6% 2.3% 10.6%

0.0% 0.0% 0.1% 0.2% 0.2%

抗原特异性小鼠 CTL 的诱导方法

小鼠模型主要用于感染实验、疫苗开发、免疫疗法的研究，以及观察

生物体内各种免疫应答等。

T-Select Mouse MHC Tetramer 可以用于检测小鼠的抗原特异性

CTL。MBL 内部研究发现，按照以下方法可以迅速、简便、便宜地诱导抗

原特异性 CTL。具体流程如下图所示。首先，混合目标抗原肽与具有辅助

功能的抗原肽，与免疫佐剂一同乳化，对小鼠进行腹腔免疫。最后一次免

疫后的 7-11 天摘除脾脏。在培养瓶内对脾细胞进行多肽刺激，培养 1 周。免疫次数根据抗原不同有所差异，根据 MBL 的研究结果，免疫 1-4 次即可以诱导抗原特异性 CTL 。由于存在个体差异，因此建议您 1 种抗

原使用 2 只以上的小鼠。详情请参照各四聚体产品的 Data Sheet。

免疫解剖刺激四聚体染色

分析分析

■ 体外刺激诱导小鼠抗原特异性 CTL（流感病毒）关于小鼠模型的流感病毒表位与其变异体的报道较多，广泛涉及 MHC 的结构分析与亲和性的研究，疫苗开发以及使用 CTL

克隆的免疫应答研究等。在通过多肽免疫进行 CTL 诱导时，由于流感病毒的表位抗原肽可以使 CTL 的诱导更有效的进行，因此

被认为是诱导 CTL 最适合的抗原之一。以下为 MBL 提供的小鼠流感病毒抗原肽信息一览表及体外 CTL 诱导数据。

MBL 货号等位基因表位流感毒株蛋白质 aa TS-M527-P H-2Db

A S N E N M D A M Influenza A/NT/60/68(H3N2) nucleoprotein (NP) 366-374TS-M502-P H-2Db

A S N E N M D T M Influenza A/NT/60/68(H3N2) nucleoprotein (NP) 366-374TS-M508-P H-2Db

A S N E N M E T M Influenza A/PR/8/34(H1N1) nucleoprotein (NP) 366-374TS-M528-P H-2Db

S S L E N F R A Y V Influenza A/PR/8/34(H1N1) RNA polymerase α subunit (PA) 224-233TS-M520-P H-2Kd

I Y S T V A S S L Influenza A/PR/8/34(H1N1) hemagglutinin (HA) 533-541

Day 0 Day 7

特异性

四聚体试剂

阴性对照

四聚体试剂

CD8 (KT15)-FITC

加入 peptide培养 1 周

antigenic peptide,helper peptide,CFA, PBS

摘除脾脏

小鼠品系

等位基因

H-2K H-2D H-2L

C57BL/- b b -

BXSB/Mp b b -

129/- b b -

BALB/c d d d

DBA/2 d d d

B10D2 d d d

C3H/He k k -

CBA/N k k -

Influenza NP (TS-M527-1)

Influenza PA (TS-M528-1)

Influenza HA (TS-M520-1)

Day 0Day 10 * *免疫后的天数没有最优化。

染色例：H-2Db Influenza NP Tetramer-PE (MBL 货号 TS-M502-1)

混合来源于 H-2Db 限制性 Influenza NP 的抗原肽（ASNENMDTM,MBL 货号 TS-M502-P）与具有辅助功能的抗原肽 I-Ab HBc helper peptide（MBL 货号 TS-M701-P），与免疫佐剂一同乳化，对 C57BL/6 小鼠进行腹腔免疫。11 天后摘除脾脏，制备脾细胞后，取出一部分使用 MHC 四聚

体试剂染色（Day 0）。通过来源于 Influenza NP 的抗原肽（1 μg/mL）对这些脾细胞进行体外刺激培养 1 周。同样使用 MHC 四聚体试剂进行染色（Day 7）。

< Day 0 >小鼠 A 小鼠 B

0.3% 0.2%

点状展开图右上的数值表示 CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细胞率（%）。在 FSC/SSC 展开图中将淋巴细胞区定为 R1，7-AAD 阴性细胞区定为 R2。在 R1 和 R2 区进行分析。

※ 各表位的诱导条件请参考各试剂的 Data Sheet。

< Day 7 >

刺激 (1 μg/mL peptide)

Mouse MHC class I Tetramer 的染色例

MBL 提供针对小鼠模式抗原、肿瘤抗原，以及病毒抗原等的四聚体试剂。以下的数据全部是多肽免疫，使用四聚体试剂对体外刺激诱导的各抗原肽特异性 CTL 进行染色的图片

（上）以及使用阴性四聚体进行染色的图片（下）。分别使用等位基因相同、表位序列不同四聚体试剂作为阴性对照。样品为多肽刺激 6 天后的小鼠脾细胞。图中右上的数值表示 CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细胞

率（%）。详细信息请参考各试剂的 Data Sheet。

病毒抗原

LCMV MuLV

LCMV gp33 (TS-5002-1)

LCMV gp33 (C9M) (TS-M512-1)

CD8 (KT15)-FITC CD8 (KT15)-FITC

2.3% 0.7%

0.0% 0.1%

3.3% 15.3% 7.9% 4.3 %

0.4% 0.13% 0.1% 0.2%

Negative (TS-M505-1)

CD8 (KT15)-FITC

LCMV NP396 H-2Ld

LCMV NP118 H-2Kb

MuLV p15E (TS-M513 -1) (TS-M514-1) (TS-M507-1)

MuLV gp70 (TS-M521-1)

用来源于 Influenza NP 的抗原肽（ASNENMDTM）免疫小鼠，通�体外刺激，诱导获得了 1.3～12.7%的 Influenza NP 特异性 CTL。使用阴性�照四聚体（H-2Db human gp100 Tetramer- KVPRNQDWL-PE, MBL �号TS-M505-1）进行对比染色，确认了其特异性。

0.1% 0.1% 0.39% 0.1% 0.2% 0.0% 0.4%

CD8 (KT15)-FITC

各种病毒

H-2Kb H-2Kb H-2Kb H-2Dd H-2Kd H-2Ld H-2Ld

HSV-1 gB SeV VSV NP HIV P8-I10 RSV MCMV IE1 HBsAg (TS-M523-1) (TS-M509-1) (TS-M529-1) (TS-M516-1) (TS-M506-1) (TS-M510-1) (TS-M522-1)

3.1% 4.5% 10.8% 17.8% 11.6% 1.6% 0.9%

polyomavirus MT (TS-M530-1)

H-2Dk HTLV-1

(TS-M531-1)

CD8 (KT15)-FITC

模式抗原细菌抗原

β-galactosidase (TS-M501-1)

β-galactosidase (TS-M511-1)

EGFP (TS-M525-1)

(TS-M503-1)

Malaria Pb9 (TS-M515-1)

BCG MPT51 (TS-M517-1)

CD8 (KT15)-FITC

次要组织相容性抗原小鼠癌抗原

CD8 (KT15)-FITC

HY Uty (TS-M524-1)

human gp100 (TS-M505-1)

CEA (TS-M518-1)

P815 (TS-M519-1)

HER2 (TS-M526-1)

0.0% 0.4% 0.1% 0.0%

CD8 (KT15)-FITC

2.8% 1.3%

0.2% 0.1%

2.1% 4.4% 1.4%

0.3% 0.1% 0.2%

7.2% 3.7% 2.0%

0.1% 0.0% 0.0%

Listeria LLO91- 99

诱导小鼠 WT1 特异性 CTL

以下显示 2 只 C57BL/6 小鼠在进行多肽免疫、培养以及体外刺激后，H-2Db WT1 Tetramer（MBL 货号 TS-M504-1）阳性率的变化。图中右上的数值表示 CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细胞率（%）。

WT1 Tetramer WT1 Tetramer WT1 Tetramer

0.0% 0.0% 0.6% 0.0% 3.2% 0.5%

小鼠 1

刺激刺激

0.1% 0.1 μg/mL

peptide

0.2% 0.1 μg/mL

peptide

4.9% 0.6%

小鼠 2

CD8 (KT15)-FITC

诱导来源于癌抗原或其他抗原的特异性 CTL 时，根据情况不同，有时进行 1 次多肽刺激 (in vitro stimulation)难以获得足够

的四聚体阳性细胞。使用多肽施加第二次刺激，可以使特异性 CTL 扩增，但是由于多肽被 MHC class I 分子呈递，特异性

CTL 显示出细胞毒性活性，如<Day 14> 所示，常会出现 CD8 阴性细胞锐减的情况。另外，所使用的多肽浓度过高时，会出现

特异性 CTL 相互杀伤，从而导致阳性率过低。想要避免此类情况的话，建议您在第二次的多肽刺激时使用接受了多肽脉冲的抗

原呈递细胞。

H-2Kb OVA Tetramer染色例：T-Select H-2Kb OVA Tetramer （TS-5001-1C）

以下为使用 T-Select H-2Kb OVA Tetramer (MBL 货号 TS-5001-1C) 对 C57BL/6 小鼠（2 只）脾细胞进行染色的图片。图

中右上的数值分别表示 CD8 阳性细胞中的四聚体阳性细胞率(%) 。混合来源于 H-2Kb 限制性 OVA 的抗原肽与具有辅助功能的抗原肽，与免疫佐剂一同乳化，对 2 只 C57BL/6 小鼠进行腹腔

免疫。10 天后摘除脾脏，制备脾细胞后，取出其中一部分使用 MHC 四聚体试剂染色（下图左）。将这些脾细胞与接受了

OVA 多肽脉冲的其他同种个体的脾细胞体外混合培养 1 周。同样使用 MHC 四聚体试剂进行染色（下图右）。

小鼠 1 小鼠 2 小鼠 1 小鼠 2

0.04 % 0.01 % 0.43 % 0.42 %

CD8 (KT15)-FITC

0.03 % 0.02 % 7.68 % 1.14 %

Negati ve Tetramer Negat ive Tetramer Negati ve Tetramer

Negative Tetramer

OVA Tetramer

Wilms 肿瘤因子 WT1 是一种抑制生长因子等转录的转录因子。已知 WT1 基因在白血病与各种实体瘤中有着高水平表达，

并与这类疾病的发病相关。WT1 特异性 CTL 会杀伤 WT1 表达量较高的癌细胞，但不损伤正常细胞，与此相关的临床试验正在

不断开展。WT1 作为免疫疗法的靶分子，是一种备受关注的癌抗原。

0.0%0.2%

小鼠 CD8 抗体的克隆导致 H-2Kb OVA Tetramer 染色性能的差异（OT- I 小鼠）

使用 H-2Kb OVA Tetramer-PE (10 μL/sample) 与梯度稀释的抗小鼠 CD8 抗体（克隆 KT15 或克隆 53.6.7）对 OT-I 小鼠脾

脏细胞进行染色并分析（反应体系：1×106 cells/sample, 共 100 μL/sample）。使用 H-2Kb β-galactosidase Tetramer-PE (10μL/sample) 作为阴性对照四聚体检测非特异性反应。结果显示，使用 53.6.7 时，OVA 四聚体与 β-galactosidase 四聚体均可以

对 OT-I 小鼠脾脏细胞中的 CD8 阳性细胞染色。即使是将 53.6.7 稀释后使用，同样可以通过两种四聚体进行染色。使用 KT15 时，仅能通过 OVA 四聚体对 OT-I 小鼠脾脏细胞中的 CD8 阳性细胞进行特异性染色，而使用 10 μL/ sample 的

KT15 时，OVA Tetramer-PE 的荧光强度明显有所下降。经过浓度探讨发现，使用 0.63 μL/sample 的 KT15 时，OVA 四聚体阳

性细胞群的荧光强度较高。在此基础上再次稀释后使用，KT15-FITC 阳性细胞群的荧光强度会更降低。但是，将多肽免疫诱导

了 OVA 特异性 CTL 的小鼠脾脏细胞作为样品使用时，使用 10 μL/sample 的 KT15 也没有发现异常（参照下一个项目）。

利用抗小鼠 CD8 (KT15)-FITC/Tetramer-PE 进行染色利用抗小鼠 CD8 (53.6.7)-FITC/Tetramer-PE 进行染色

OVA Tetramerβ-galactosidase

Tetramer

KT15 抗体量

10 μL （建议使用量）

2.5 μL（建议使用量的 1/4）

OVA Tetramer β-galactosidase

Tetramer

53.6.7 抗体量

10 μL （建议使用量的 1/2）

0.31 μL （建议使用量的 1/64）

※ 本研究中使用的浓度终究只是一个大致标准，建议您根据实验系统，按照需要进行浓度探讨。

小鼠 CD8 抗体的克隆导致 H-2Kb OVA Tetramer 染色性能的差异（多肽免疫 C57BL/6 小鼠）

使用 H-2Kb OVA Tetramer-PE (10 μL/sample) 与抗小鼠

CD8 抗体 ( 克隆 KT15 或克隆 53.6.7）对多肽免疫诱导了特异

性 CTL 的小鼠脾脏细胞染色，并进行分析。使用 H-2Kb β-galactosidase tetramaer-PE (10 μL/sample) 作为阴性四聚体研

究非特异性反应。结果显示，使用 KT15 时，与阴性四聚体进行

比较，发现了四聚体阳性细胞，而使用 53.6.7 时，H-2Kb OVAtetramer-PE 与 H-2Kb β-galactosidase tetramer-PE 均出现了强

烈的非特异性染色。可见 53.6.7 与 H-2Kb OVA tetramer-PE 的

相容性很差。且不限于 OVA 四聚体，因此使用时请多加注意。

MBL 建议您尽可能使用 KT15。

克隆 KT15 克隆 53.6.7

CD8-FITC

H-2Kb OVATetramer-PE

H-2Kb β-galactosidaseTetramer-PE (Negative Control)

1.31% 32.7%

0.71% 61.5%

CD8 (KT15)-FITC CD8 (53.6.7)-FITC

综上可知，将来源于 OT-I 小鼠（转基因小鼠）的细胞作为样品使用时，小鼠 CD8 抗体克隆 KT15 需要调至适量，并且，设

置阴性四聚体作为对照是十分重要的。

me r- P

使用 T-Select Mouse MHC Tetramer 的 Tetramer blocking assay

Tetramer blocking assay 是一种通过使用 MHC-Tetramer 试剂对 TCR 进行封闭，使抗原特异性的细胞毒

性活性受抑制的实验体系。也就是说，经铬释放试验与 IMMUNOCYTO Cytotoxity Detection Kit 等确认的细胞

毒性活性，可以通过此实验进一步确认是否来源于四聚体阳性 CTL。据报道被四聚体染色的 CTL 在 24 小时左

右会恢复细胞毒性活性。

细胞

毒性

A. 野生型 B. OT-I 转基因小鼠410

OT-I 小鼠脾细胞

210 210

010 98.5%

010 8.6% 010 101 102 103 104 100 101 102 103 104制备被四聚体染色、

以及没有染色的样品。 CD8-FITC CD8-FITC

C D 有四聚体染色无四聚体染色 60 60

50 常规的 cell cytotoxity assay

四聚体染色 50 Non-treated

51Cr 标记的靶细胞 (E.G7)

OT-I CTL vs E.G7OT-I CTL + Tetramer vs E.G7

OT-I CTL vs EL-4 20

Pre-treated 10 10

与靶细胞共同培养 4 小时。

分析

0 2 : 1 1 : 1

0 0.5 : 1 (μg/mL)

vs E.G7 vs EL-4

利用四聚体染色，特异性 TCR 介导的细胞毒性活性被抑制。

伴随四聚体试剂浓度增加细胞毒性活性被抑制。

<Tetramer blocking assay 使用文献 > 1）Wakita D, et al., Int. Immunol. 18: 425 − 434 (2006) 2）Chamoto K, et al., Cancer Res. 66: 1809 − 1817 (2006)3）Yokouchi H, et al., Cancer Sci. 97: 148 − 154 (2006)4）Yokouchi H, et al., Clin Exp Metastasis 24: 533 − 540 (2007)

数据提供：北海道大学基因疾病控制研究所免疫控制领域茶本健司教授、西村孝司教授

E:T = 4 : 1

细胞

毒性

在 OT-I 小鼠的脾细胞中，约 90%的 CD8+T 细胞呈现出 OVA 四聚体阳性。

CD4-FITC

T-Select Mouse MHC class II Tetramer

＜参考文献＞

1) Barnden MJ, et al., Immunol Cell Biol. 76: 34 − 40 (1998)2) Moon JJ, et al., Immunity. 27: 203 − 213 (2007)3) Landais E, et al., J Immunol. 183: 7949 − 7957 (2009)

染色例 1-1：OT-II 小鼠中的反应性确认例染色例 1-2：多肽刺激培养后（6 天）的染色例

I-Ab MOG35-55 I-Ab OVA323-339 OVA323-339 多肽浓度

0 μg /mL

CD4-FITC

1 μg /mL

染色例 2：使用 OVA323-339 peptide 免疫小鼠的染色例

OVA323-339 peptide 免疫的小鼠脾细胞〈Day 0〉〈Day 8〉

小鼠 1 小鼠 2Tetramer

Tetramer

1.5 % 79.2 %

I-Ab O

I- Ab O

I -Ab M

■ I-Ab OVA323-339 Tetramer-PEOVA 作为引起多种免疫反应的模式抗原广泛应用于各种研究领域。

在 I-Ab OVA323-33 9 表位（ISQAVHAAHAEINEAGR）被呈递的状态下，能够对其进行特异性识别的 TCR 转基因小鼠（OT-II

小鼠）作为分析 T 细胞分化过程、活化等的工具为免疫学研究做出了巨大贡献。I-Ab OVA323-339 Tetramer 作为各种实验体系中的

重要工具备受期待。

使用 OT-II 小鼠的脾细胞研究 I-Ab OVA323-339 四聚体试剂的反应性时，发现存在检测出了阳性细胞群的个体（小鼠 2）与未被染色的个体（小鼠 1）（染色例 1-1）。

考虑到小鼠 1 的 OVA323-339 特异性 TCR 的表达水平较低，因此对其进行多肽特异性刺激，验证是否可以提高表达水平。

向小鼠 1 的脾细胞加入 OVA323-339 peptide（ISQAVHAAHAEINEAGR, MBL 货号 TS-M703-P）使终浓度为 1μg/mL，培养 6

天后，研究 MHC 四聚体试剂的反应性（染色例 1-2）。结果显示，在小鼠 1 中，确认通过体外多肽刺激可以诱导特异性 T 细胞。使用 I- Ab MOG35-55 tetramer 作为阴性对照时，没有检测出阳性细胞。

将 100 nmol 的 OVA323-339 peptide 、10 μg 的霍乱毒素与免疫佐剂一同乳化，对

C57BL/6 小鼠进行 2 次腹腔免疫。

11 天后摘除脾脏，制备脾细胞，取出其中一部分使用 MHC 四聚体试剂染色（Day 0）。

向脾细胞加入终浓度为 1 μg/mL 的 OVA323-339 peptide，并培养 8 天（Day 8）。同样使用 MHC 四聚体试剂对其进行染色。

在 OVA323-339 peptide 免疫的小鼠中，确认通过体外多肽刺激可以诱导特异性 T 细胞。使用 I-Ab MOG35-55 四聚体作为阴性对照时，没有检测出阳性细胞。

CD4-FITC

0. 2% 0.2%

75.2 %

2.2 % 1.0 %

0.3 % 0.2 %

展开图脾脏细胞中特异性细胞的染色例

在 FSC/SSC 展开图中，将淋巴细胞区定为 R1，CD4 阳性细胞区定为 R2 ， 7-AAD 阴性细胞区定为 R3。在 R1、 R2 、 R3 区的交集进行分析。

I-Ab ESAT-61-20

Tetramer-PE

I-Ab MOG35-55

Tetramer-PE (Negative Control)

肺组织中特异性细胞的染色例结核菌感染后非感染

数据提供

国立大学法人京都大学研究生院医学研究科

基础医学系感染・免疫学讲座微生物感染症学

酒井俊祐教授、光山正雄教授

CD4-FITC

室温 1 小时冰上 1 小时

CD4(GK1.5)-FITC

I-Ab MOG35-55

Tetramer-PE (Negative Control)

数据提供：国立大学法人京都大学研究生院医学研究科基础医学系感染・免疫学讲座微生物感染症学

酒井俊祐教授、光山正雄教授

I-Ab ESAT-61-20

Tetramer-PE

人型结核杆菌（Mycobacterium tuberculosis, Mtb）属于革兰氏阳性菌，作为肺结核等结核病的病原菌广为人知。ESAT-6（Early Secreted Antigenic Target 6）是一种 Mtb 分泌的主要的低分子蛋白，具有较强的抗原性。结核疫苗中使用的 M. bovis BCG 株缺失 ESAT-6 基因，因此可以利用对该抗原具有特异性的 T 细胞应

答诊断 BCG 接种者的结核感染。ESAT-61-20 作为 I-Ab 限制性的免疫显性表位，广泛用于生物体内免疫应答的

检测与新疫苗的开发等研究中。具有 I-Ab ESAT-61-20 特异性 TCR 的转基因小鼠已经被制备出来， I-Ab ESAT-61-20 Tetramer 作为可以用于各种实验体系中的重要工具备受期待。

经小鼠尾静脉注射（5x105 CFU/只），使其感染人型结核杆菌

H37Rv 株或 BCG Pasteur 株，4 周后摘除肺与脾脏，制备细胞。使用

MHC 四聚体试剂对这些细胞进行染色。结果显示，在感染人型结核杆

菌小鼠的肺淋巴细胞中，检测出了 CD4 阳性细胞中 7.73% 的 I-Ab

ESAT-61-20 Tetramer 阳性细胞（下图）。另外，只有在感染人型结核

杆菌感染小鼠的脾脏细胞中检测出了 I-Ab ESAT-61-20 Tetramer 阳性

细胞，BCG 感染小鼠中没有检测出（右图）。

结核菌感染后

BCG 感染后

非感染

CD4-FITC

7.73% 0.08%

0.02% 1.19%

0.02% 0.03%

左图为探讨四聚体染色时反应温度的数据。将感染了结核杆菌的小

鼠脾脏细胞置于室温或冰上反应 1 小时。结果显示， I-Ab ESAT-61-20

Tetramer 与小鼠脾脏细胞在室温下发生了反应，且荧光强度较强。虽

然数据中没有显示，但是，即使在同一条件下反应 2 个小时，置于冰

上的反应体系也没有出现荧光强度的提高。

※本数据中将 FSC/SSC 展开图中的淋巴细胞区定为 R1，7-AAD 阴性细胞区定

为 R2。在 R1、 R2 区的交集进行分析。

的反应温度导致的染色性能的差异

多肽免疫诱导的 I-Ab ESAT-61-20 Tetramer 特异性 CTL

Day 0 Day 8

I-Ab ESAT-61-20

Tetramer-PE

I-Ab MOG35-55

Tetramer-PE(Negative Tetramer)

CD4(GK1.5)-FITC

※本数据中将 FSC/SSC 展开图中的淋巴细胞区定为 R1 ，7-AAD 阴性细胞区定为 R2。在 R1、 R2 区的交集进行分析。

识别小鼠 MHC class II/OVA epitope 复合物的抗体

抗小鼠 TCR DO11.10 抗体（MBL 货号 K0221-5, 克隆 KJ1.26）作为识别 I-Ad 限制性 OVA323-339 特异性 TCR 的抗体广为

人知。OVA323-339（ISQAVHAAHAEINEAGR，MBL 货号 TS-M703-P）还可以作为诱导抗原特异性 CTL 时的辅助多肽使用。

抗小鼠 TCR DO11.10 抗体染色例 DO11.10 T 细胞杂交瘤免疫了 OVA323-339 peptide 的 BALB/c 小鼠脾脏细胞

isotypic control Anti-mouse TCR DO11.10 抗体

Sample: DO11.10 T 细胞杂交瘤

0.18 % 4.85 %

0.06 % 0.27 %

0.3 % 0.0 %

CD4- FITC CD4-FITC

trol-P

将 100 n mol 的 I-Ab ESAT-61-20 peptide（MTEQQWNFAGIEAAASAIQG, MBL 货号 TS-M707-P）、10μg 的霍乱毒素

与免疫佐剂进行乳化，对小鼠进行 2 次腹腔免疫。11 天后摘除脾脏，制备脾细胞后，取出其中一部分使用 MHC 四聚体试剂染

色（Day 0）。使用 ESAT-61-20 peptide（0.1μg/mL）对这些脾细胞体外刺激培养 8 天。同样使用 MHC 四聚体试剂进行染色

（Day 8）。结果显示，可以检测出 I-Ab ESAT-61-20 Tetramer 特异性 CD4+T 细胞。阴性四聚体（I-Ab MOG35-55 Tetramer， MBL 货号 TS-M704-1）中没有检测出阳性细胞。

Sample: OVA 323-339 免疫的小鼠脾细胞

IFN-γ

IL-4CD161

CD1d分子

T-Select CD1d Tetramer

CD1d 分子是一种与 β2-microglobulin（β2m）非共价结合的膜蛋

白，在人、小鼠间同源性极高。CD1d 分子通过呈递从海绵动物中提取、

分离的糖脂 α-半乳糖苷神经酰胺（α-GalCer），可以激活人以及小鼠的

CD1d 限制性 NKT 细胞。

T-Select CD1d Tetramer 是一种使用标记了 PE 或 APC 的链霉亲和

素将 CD1d 与 β2m 的复合物四聚体化的试剂。将本试剂与 α-GalCer 结

合，可以利用流式细胞仪高灵敏度的检测出 CD1d 限制性 NKT 细胞。通

过与 NKT 细胞相关抗体组合，可以更简便地进行 NKT 细胞的功能分

析。

＜参考文献＞

1) Stephane S, et al., J. Immunol. Methods 268: 107 − 121 (2002)

2) Matsuda JL, et al., J. Exp. Med. 192: 741 − 754 (2000)

3) Benlagha K, et al., J. Exp. Med. 191: 1895 − 1903 (2000)

CD1d Tetramer 中使用的 α-GalCer 的溶解与 load

★本产品中不含 α-GalCer。

Pyridine 0.9% NaCl/0.5% Tween-20

α-GalCer stock 溶液

(1 mg/mL)

200 μg/mL

α-GalCer 稀释液向 CD1d Tetramer-PE（100 μL）中

添加 α-GalCer 稀释液（10 μL）

在 4℃下贮存

（避光）

染色例：使用 T-Select CD1d Tetramer 进行 NKT 细胞检测

＜人＞＜小鼠＞

CD3-FITC CD4 (GK1.5)-FITC

从健康人外周血中分离 PBMC，加入 40 μL 的 ClearBack

（ Human Fc receptor blocking reagent, MBL 货号 MTG-

001），在室温下孵育 5 分钟。向其中加入 CD3-FITC 与 T-

Select human CD1d Tetramer-PE （无 α-GalCer 结合、有 α-

GalCer 结合），在 4℃避光静置 30 分钟。利用流式细胞仪检

测时，检测出 0.05% 的 NKT 细胞。

制备 C57BL/6 小鼠脾脏细胞，加入 CD4-FITC 与

T-Select mouse CD1d Tetramer-PE（无 α-GalCer 结

合，有 α-GalCer 结合），在 4℃避光静置 30 分钟。

利用流式细胞仪检测时，检测出 2.33% 的 NKT 细

胞。

NKT 细胞检测用试剂

产品名称 50 tests

MBL 货号

Human CD1d Tetramer-PE TS-HCD-1

Human CD1d Tetramer-APC TS-HCD-2

Mouse CD1d Tetramer-PE TS-MCD-1

Mouse CD1d Tetramer-APC TS-MCD-2

本产品中本不含 α-GalCer 。

α-GalCer (－)

0.42 % 2.33 %

α-GalCer loadα-GalCer (－)

0.00 % 0.05 %

α-GalCer load

E在室温（20～30℃）或 37℃下避光静置 12～18 小时。

T 细胞受体

CD1d 分子NKT 细胞

糖脂荧光标记物

T-Select CD1d Tetramer

糖脂

树突状细胞

树突状细胞成熟化

获得性免疫系统活化糖脂

抗原受体穿孔素

靶细胞死亡NKT 细胞

抑制受体产生细胞因子

NKT 细胞活化

0.00 % 0.05 % 0.05 % 0.04 %

0.45% 16.9%

CD1d Tetramer FAQ

Q1. Pyridine 使用 DMSO 溶解 α-GalCer

200 μg/mLQ2. α-GalCerA2. α-GalCer 在 200 μg/mL

用 Pyridine 溶解成 1 mg/mL 的溶液，置于−20℃下贮存， CD1d Tetramer 200 μg/mL 。

CD4 阳性细胞中的 CD1d 四聚体阳

性细胞率(%) 。

Q3. α-GalCer load 后的 CD1d Tetramer，置于 4℃A3. Human Mouse 12

没有 α-GalCer α-GalCer load 后 α-GalCer load 后 3 个月 α-GalCer load 后 12个月

0.45 % 16.9 % 16.4 % 16.2 %

CD4 阳性

细胞中的小鼠 CD1d 四聚体阳性

细胞率(%) 。

没有 α-GalCer α-GalCer load 后 3 个月 α-GalCer load 后 6 个月 α-GalCer load 后 12 个月

CD1d 四

聚体阳性细胞率(%) 。

Q4. CD1d A4.

Q6. 使用 CD1d A6. 建议您使用 Clear Back Human FcR blocking reagent（MBL MTG-001）。

CD4(GK1.5)-FITC

CD3-FITC

1: 没有 load α-GalCer 的 Mouse CD1d Tetramer 2: 染色前一天，load 稀释成 200 μg/mL 的 α-GalCer 的 Mouse CD1d Tetramer 3: 将稀释成 200 μg/mL 的 α-GalCer 置于-30℃下冻结贮存 3 个月，并于染色前一天 load Mouse CD1d Tetramer

A1. 建议您使用 Pyridine 。根据 MBL 的研究，使用 DMSO 溶解 α-GalCer 时，在 80℃中孵育 10 秒后，加入 Mouse CD1d Tetramer-PE 中进行探讨，没有检测出 CD1d 阳性细胞。

Q5. 阳性率的程度大概为多少呢？ A5. 在 4 名健康人中有 1 名，采血后的 PBMC 能得出上图所示的阳性率。进行小鼠脾脏细胞染色时，在 CD4 阳性细胞中，小鼠 CD1d

四聚体阳性细胞的检出率为：BALB/c 为~ 5%，C57BL/6 为～ 20% （MBL 内部研究数据）。

T-Select MHC Tetramer 与 MBL

MBL 获得了美国 Beckman Coulter 公司的独家许可，从 2002 年起开始进行四聚体试剂的研发、生产与

销售。MBL 以四聚体试剂核心技术为中心，自研发以来，得到众多研究者的帮助与指导，积累了免疫学研究

的各种经验。作为 MHC 四聚体试剂的制造商，为了能够更好地应对各位四聚体试剂使用者的咨询与商谈，

我们将会持续不断地积累相关实验以及学术性经验，为大家提供更优质的服务。

Day 0 Day 14

CD107a

功能测定

检测诱导

肽刺激

CTL line

无刺激

α2 表位鉴定

CTL 活化

αCD137 或 αCD107a

分离

MHC 四聚体

α3 四聚体分选

分子

生物学

分析

TCR 克隆扩增

CD137 四聚体

3.24x107

150 1.81x107

6.9x105 6.9x105

3.21x106 5.49x106

1 7 14 天

抗小鼠 IgG1 微球

non-specific peptide specific peptide

抗-PE 微球

cells (x10E5)

被富集的抗原特异性 T 细胞

65%0% 35%100%31.9%

88.3 %

HLA-AA*01:01 A*02:01 A*02:06 A*02:07 A*03:01 A*11:01 A*23:01A*24:02 A*26:01 A*29:02A*31:01

HLA-CCw*01:02 Cw*03:03 Cw*03:04 Cw*08:01 Cw*12:02Cw*15:02

HLA-BB*07: 02 B*08:01 B*15:01B*15:02 B*27:05 B*35:01 B*40:01 B*40:06 B*42:01B*44:03 B*52:01 B*54:01 B *57:01

小鼠 H-2Kb

H-2 Ld

A2Kb(嵌合体) A24Kb(嵌合体)

鸡 BF2*1201 BF2*1501

恒河猴 Mamu-A*01

Mamu-A*90120-4 Mamu-A*90120-5

食蟹猴 Mafa-A*063

Mafa-B*104:01

HLA-EE*01:01 E*01:03

定制四聚体试剂

■ MHC class I custom TetramerMBL 提供相应的 MHC allele，并按照顾客要求的序列合成多肽，制备 T-Select MHC Tetramer。

提供定制的 allele HLA Peptide

折叠

单体

MHC-peptide complex 制备费用

①多肽合成费用(20 mg)*②折叠研究费用**

生物素化 +

四聚体化

d-Biotin ③四聚体化费用

50 tests (1 vial)

超过 50 tests 请先向我们咨询

Streptavidin-PE

* 若制备中所需的多肽由顾客提供，则不收取多肽合成费用。1 次折叠研究，需要使用 20 mg 纯度超过 90%的多肽。

** 折叠研究费用是指制备 MHC-多肽复合物所花的费用。根据 MHC 与多肽序列的亲和力，需要研究能否形成 MHC-多肽复合物。第 2 次定制相同 allele 及多肽序列时，不会收取折叠研究费。

Class I Tetramer 定制费用

＜ MHC 四聚体试剂的参考文献＞ 1) Altman JD, et al., Science 274: 94-96 (1996)2) Mcmichael AJ, et al., J. Exp. Med. 187: 1367-1371 (1998)3) Bodinier M, et al., Nat. Med. 6: 707-710 (2000)

村上昭弘 , 铃木进临床免疫 42: 134-138 (2004)

请通过以下方式告知我们您需要的 allele 以及多肽序列。MBLB 的相关负责人会与您联系具体事项。

电话： 4000009858 邮箱： info＠bio-med.com.cn

关于红色字体标注的 allele 请另外向我们咨询。

MHC 四聚体

Human MHC class II custom Tetramer

allele α β

Peptide (20 mg)***

d-Biotin

50 tests(1 vial)

Streptavidin-PE

allele

* 多多用。

1 使用 20 mg 90%的多肽。

** MHC-多 MHC 与多

MHC-多 2 allele 及多肽

・指定多肽

・negative 多肽

* Retention time 。

negative 多肽无多肽

26.068 min 26.087 min

0.447 min 0.019 min

MBL 多肽与指定多肽的 Retention time (HPLC 0.1 min ， MHC-peptide complex MBL 多

Human class I/II

Folding Test MHC/

Human Class II DRB1*01:01 DRB1*03:01 DRB1*04:01 DRB1*04:05 DRB1*04:10 DRB1*07:01 DRB1*08:02 DRB1*08:03 DRB1*09:01 DRB1*11:01 DRB1*12:02 DRB1*14:01 DRB1*15:01 DRB1*15:02 DRB4*01:01 DPB1*04:01

Class Tetramer

指定多肽26.515 min

37℃下静置

・无多肽

与 negative 多肽相比，指定多肽的 Retention time* 有较大移动。

MHC 四聚体

MHC-peptide complex 制备费用

QuickSwitchTM Custom Tetramer KitQuickSwitchTM Custom Tetramer Kit 使用 MBL 独有的多肽交换反应技术，可以简单地在研究室内制备四聚体试剂。

○○○○○

■ 多肽交换反应的原理

为了维持稳定的结构，试剂盒中提供的四聚体分子预先结合了 Exiting peptide（上图中蓝色）。加入目

的多肽（Experimental peptide：上图中红色），及添加多肽交换因子（Peptide Exchange Factor）后，开

始进行目的多肽与 Exiting peptide 的交换反应（反应时间约为 4 小时）。多肽交换的比例依赖于

Experimental peptide 的序列，Quant tetramer Kit 中包含有检测多肽交换效率的试剂。

■ 细胞检测前的操作流程

进行多肽交换反应约 8 小时后可以通过流式细胞仪分析 T 细胞。

Exiting peptide

Peptide Exchange Factor Experimental Peptide

4 hours@RT/dark

4 小时内即可制备出四聚体试剂。

无需 UV 灯等特殊设备。

试剂盒中包含可以检测多肽交换效率的试剂（Quant tetramer Kit）

可以选择 PE、APC、BV421 等荧光标记

提供可以用于 HLA-A*02:01 和 H-2Kb的试剂盒

0100 101 102 103

[Beads] Control #3

MFI: 20.38

■ 多肽交换比例的测定

QuickSwitchTM Quant Tetramer Kit 中含有 FITC 标记的抗体，可以检测出结合于 MHC 上的 Exiting Peptide。多肽交换反应结束后，用试剂盒中偶联有四聚体抗体的专用磁珠捕获四聚体分子，进一步使用 FITC 标记的抗体与其反应，通过流式细胞仪可以检测多肽的交换效率。

专用磁珠的 FITC 荧光强度。不含四

聚体分子。此时 Exiting Peptide 的存在比例为 0%，因此将此时多肽交

换效率设为 100%。

理论上任意多肽的 MFI 值应处于 0%至 100%之间

实验例：对 6 种任意多肽（A-F），进行多肽交换反应，测定交换效率。 % Peptide Exchange 的数值越高（接近 100%），表示交换效率越高。

0100 101 102 103

[Beads] Control #2

MFI: 0.28

PeptideSample

% PeptideExchange

75.0790.85

100.45

QuickSwitch Tetramer MFIFITC

after Peptide Exchange

5.292.12

多肽交换反应前的 QuickSwitch™ 四聚体分子的 FITC 荧光强度。此时Exiting Peptide 的存在比例为100%，因此将此时多肽交换效率设为 0%。

将利用 QuickSwitchTM Tetramer kit 制备的四聚体与我公司相同的四聚体产品进行了比较。发现该抗原肽的多肽交换效率为 92.5%（7 次实验后的平均值）。

将利用 QuickSwitchTM Tetramer kit 制备的四聚体与我公司相同的四聚体产品进行了比较。发现 Influenza M1 （GILGFVFTL）的多肽交换效率为 89%。

CD8 FITC

CD3+ Lymphocytes CD3+ Lymphocytes CD3+ LymphocytesTe

Negative Tetramer

Premium CMV pp65

NLVPMVATV

HLA-A*02:01 QuickSwitch™

Tetramer/NLVPMVATV

Negative Tetramer CD3+ Lymphocytes

NLVPMVATV CD3+ Lymphocytes

CD8 FITC

CD3+ Lymphocytes CD3+ Lymphocytes

Premium CMV pp65

Tetramer/

Tetramer/GILGFVFTL

PremiumInIfuenzaM1GILGFVFTL

染色例：HLA-A*02:01 CMV pp65（NLVPMVATV）与 HLA-A*02:01 Influenz a M1（GILGFVFTL）

染色例： HLA-A*02:01 CMV pp65 （NLVPMVATV）

T-Select MHC Tetramer使用文献

货号产品名称使用文献 TS-0009-1 HLA-A*02:01 Mart-1 Tetramer-PE Takahara M, et al., J. Leukoc. Biol. 83: 742−754 (2008)

Akiyama Y, et al., J. Transl. Med. 3: 4−13 (2005)

Tomiyama M, et al., Anticancer Res. 24: 3327−3334 (2004) TS-0013-1 HLA-A*02:01 gp100 (mutant) Tetramer-PE Akiyama Y, et al., J. Transl. Med. 3: 4−13 (2005)

TS-0017-1 HLA-A*02:01 proteinase 3 (PR1) Tetramer-PE Morita Y, et al., Int. J. Cancer 119: 1360−1367 (2006)

TS-0019-1 HLA-A*02:01 tyrosinase Tetramer-PE Akiyama Y, et al., J. Transl. Med. 3: 4−13 (2005)

TS-M014-1

或M015-1

HLA-A*24:02 WT1 (突变型) Tetramer-PE 或

WT1 (野生型) Tetramer-PE

Saitoh A, et al., Med. Oncol. 28: 219-230 (2011)

Narita M, et al., Int J Med Sci. 7: 72-81 (2010)

Chiba Y, et al., Jpn. J. Clin. Oncol. 40: 395−403 (2010) Tsuboi A,

et al., Int. J. Hematol. 86: 414−417 (2007) TS-M025-1 HLA-A*24:02 survivin-2B Tetramer-PE Kameshima H, et al., Cancer Sci. 102: 1181−1187 (2011)

Miyazaki A, et al., Cancer Sci. 102: 324−329 (2011) TS-M017-1 HLA-A*02:01 HTLV-1 Tax11-19 Tetramer-PE Kozako T, et al., Hum Immunol. 72: 1001−1006 (2011)

TS-M018-1 HLA-A*24:02 HTLV-1 Tax301-309 Tetramer-PE Kozako T, et al., J. Med. Virol. 83: 501−509 (2011)

TS-M019-1 HLA-A*02:01 HTLV-1 Tax178-186 Tetramer-PE Tanaka Y, et al., Cancer Res. 70: 6181−6192 (2010)

TS-M020-1 HLA-A*24:02 HTLV-1 Tax12-20 Tetramer-PE Sabouri AH, et al., Blood 112: 2411−2420 (2008)

TS-M021-1 HLA-A*24:02 HTLV-1 Tax187-195 Tetramer-PE Akimoto M, et al., J. Med Virol. 79: 977−986 (2007)

TS-M022-1 HLA-A*24:02 HTLV-1 Env11-19 Tetramer-PE Kozako T, et al., J. Immunol. 177: 5718−5726 (2006)

TS-0012-1 HLA-A*02:01 Influenza M1 Tetramer-PE Akiyama Y, et al., J. Transl. Med. 3: 4−13 (2005)

TS-0010-1 HLA-A*02:01 CMV pp65 Tetramer-PE Sabouri AH, et al., Blood 112: 2411−2420 (2008)

Watanabe K, et al., Int J Hematol. 88: 311−320 (2008) TS-0020-1 HLA-A*24:02 CMV pp65 Tetramer-PE Watanabe K, et al., Int J Hematol. 88: 311−320 (2008)

TS-M001-1 HLA-A*24:02 EBV LMP2 Tetramer-PE

Sato K, et al., Blood 117: 5663−5673 (2011) Watanabe K, et al.,

Int J Hematol. 88: 311−320 (2008)

TS-M002-1 HLA-A*24:02 EBV BRLF1 Tetramer-PE

TS-M003-1 HLA-A*24:02 EBV BMLF1Tetramer-PE

TS-M004-1 HLA-A*24:02 EBV EBNA3A Tetramer-PE

TS-M005-1 HLA-A*24:02 EBV EBNA3B Tetramer-PE

TS-M006-1 HLA-A*02:01 EBV LMP1 Tetramer-PE Shultz LD, et al., PNAS 107: 13022−13027 (2010)

TS-0011-1 HLA-A*02:01 EBV BMLF1 Tetramer-PE Shultz LD, et al., PNAS 107: 13022−13027 (2010)

Tomiyama M, et al., Anticancer Res. 24: 3327−3334 (2004) TS-M007-1 HLA-A*24:02 Negative Tetramer-PE Akiyama Y, et al., Anticancer Res. 29: 647−655 (2009)

Tsukahara T, et al., Cancer Sci. 99: 368−375 (2008) Akimoto

M, et al., J. Med Virol. 79: 977−86 (2007) Kozako T, et al., J.

Immunol. 177: 5718−5726 (2006) Akiyama Y, et al., J. Transl.

Med. 3: 4−13 (2005)

TS-5001-1C Kurachi S, et al., J. Exp. Med. 208: 1605−1620 (2011)

Yanai H, et al., PNAS 108: 11542−11547 (2011)

Takeshima T, et al., Cancer Res. 70: 2697−2706 (2010)

Asano J, et al., J. Immunol. 184: 736−745 (2010) Tang C, et al.,

J. Leukoc. Biol. 86: 187−194 (2009) Kijima M, et al., J. Immunol.

182: 3566−3572 (2009)

Senju S, et al., Stem Cells 27: 1021−31 (2009)

Miyakoda M, et al., J. Immunol. 181: 1420−1428 (2008)

Wakabayashi A, et al., J. Immunol. 180: 4000−4010 (2008)

Sugiyama T, et al., Int. Immunol. 20: 1−9 (2008)

Kumar H, et al., J. Immunol. 180: 683−687 (2008)

Li W, et al., J. Immunol. 178: 4482−4488 (2007)

Zhang Y, et al., Int. Immunol. 19: 151−161 (2007)

Taneichi M, et al., J. Immunol. 177: 2324−2330 (2006)

Wakita D, et al., Int. Immunol. 18: 425−434 (2006)

Chamoto K, et al., Cancer Res. 66: 1809−1817 (2006)

Saito K, et al., J. Immunol. 176: 2496−2504 (2006)

Yokouchi H, et al., Cancer Sci. 97: 148−154 (2006)

Yajima T, et al., J. Immunol. 176: 507−515 (2006)

Yajima T, et al., J. Immunol. 174: 3590−3597 (2005)

Li W, et al., Infect. Immunol. 72: 7005−7011 (2004)

Teramoto K, et al., Cancer Res. 63: 7920−7925 (2003)

H-2Kb OVA Tetramer-PE

货号产品名称使用文献 TS-5004-1 H-2Kb TRP2 Tetramer-PE Kuwada E, et al., Anticancer Res. 31: 881−891 (2011)

Takeshima T, et al., Cancer Res. 70: 2697−2706 (2010)

Okano F, et al., J. Immunol. 174: 2645−2652 (2005) TS-M502-1 H-2Db Influenza NP Tetramer-PE Nakamura R, et al., J. Virol. 84: 5574−5582 (2010)

Koyama S, et al., J. Immunol. 179: 4711−4720 (2007) TS-M508-1 H-2Db Influenza NP Tetramer-PE Seo S−U, et al., J. Virol. 84: 12713−12722 (2010)

TS-M520-1 H-2Kd Influenza HA Tetramer-PE Kayamuro H, et al., J. Virol. 84: 12703−12712 (2010)

TS-M503-1 H-2Kd LLO91-99 Tetramer-PE Ozawa Y, et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 41: 440−448 (2009)

Hayashi T, et al., J. Immunol. 182: 6360−6368 (2009) TS-5002-1 H-2Db LCMV gp33 Tetramer-PE Takagi A, et al., Clin. Vaccine Immunol. 16: 1383−1392 (2009)

Jung A, et al., J. Virol. 82: 196–206 (2008)

Kawagoe T, et al., J. Exp. Med. 204: 1013−1024 (2007) Gil MP, et

al., Blood 107: 987−993 (2006) TS-M008-1 H-2Kb Negative Tetramer-PE Asano J, et al., J. Immunol. 184: 736−745 (2010)

Wakita D, et al., Int. Immunol. 18: 425−434 (2006)

Chamoto K, et al., Cancer Res. 66: 1809−1817 (2006)

TS-5003-1 Mamu-A*01 SIV gag Tetramer-PE Cecchinato V, et al., J. Immunol. 180: 5439−5447 (2008)

Class I

Custom

Tetramer

Suemori K, et al., J. Gen. Virol. 90: 1806−1811 (2009)

Tsukamoto T, et al., J. Virol. 83: 9339−9346 (2009)

Akiyama Y, et al., Anticancer Res. 29: 647−655 (2009)

Yoshizaki M, et al., Blood 114: 1518−1527 (2009)

Takatsuka N, et al., Int. Immunol. 21: 1089−1100 (2009) Harao M, et

al., Int J Cancer 123: 2616−2625 (2008) Tsukahara T, et al., Cancer

Sci. 99: 368−375 (2008) Wakabayashi A, et al., J. Immunol.180:

4000−4010 (2008) Akimoto M, et al., J. Med Virol. 79: 977−86 (2007)

Kozako T, et al., J. Immunol. 177: 5718−5726 (2006) Akiyama

Y, et al., J. Transl. Med. 3: 4−13 (2005)

Jalili A, et al., Blood 106: 3538−3545 (2005)

Class II

Custom

Tetramer

Mizote Y, et al., Vaccine 28: 5338−5346 (2010)

Watanabe K, et al., Int J Hematol. 88: 311−320 (2008) TS-MCD-1 Mouse CD1d Tetramer-PE Yoshiga Y, et al., Clin Exp Immunol. 164: 236–247 (2011)

AM-1005 IMMUNOCYTO Cytotoxity Detection Kit Tanaka Y, et al., Cancer Res. 70: 6181−6192 (2010)

4844 IMMUNOCYTO CD107a Detection Kit Sabouri AH, et al., Blood 112: 2411−2420 (2008)

8223 IMMUNOCYTO IFN- ELISPOT Kit Yajima M, et al., J Infect Dis. 198: 673−682 (2008)

D271-4 Anti-mouse CD8 (clone KT15) Asano J, et al., J. Immunol. 184: 736−745 (2010)

Kayamuro H, et al., J. Virol. 84: 12703−12712 (2010)

关于 T-Select MHC Tetramer 试剂、CTL 诱导用多肽产品以及 MHC Tetramer 试剂定制等最新信息，请通过研究用试剂网址（http://ruo.mbl.co.jp）进行确认。本网址还可以下载各产品资料。

获得许可证的专利

US Patent Number 5,635,363Inventors: Altman JD, et al ., (Stanford University)"Compositions and methods for the detection, quantitation and purification of antigen-specific T cells."

French Application Number FR9911133Inventors: Lang F, et al ., (INSERM)"Means for detecting and for the purifying CD8+ T-lymphocyte populations specific for peptides presented in the HLA context."

特許第 3506384 号抗原特異的な T 細胞の検出および精製のための MHC 抗原複合体

MHC Class I 四聚体产品列表

抗原名 MHC Allele 多肽序列位置

Code No.

PE 标记 (50 tests)

APC 标记 (50 tests)

BV421 标记

(50 tests) 诱导用

peptide 人类癌症相关抗原

ACC-1 A*24:02 DYLQYVLQI 15-23 TS-M141-1 TS-M141-2 AIM-2 A*01:01 RSDSGQQARY TS-M137-1 TS-M137-2 BA46 A*02:01 GLQHWVPEL 97-106 TB-0151-1 TB-0151-2 TB-0151-4

BCR-ABL A*02:01 GVRGRVEEI bcr-abl fusion

TB-0169-1 TB-0169-2 TB-0169-4

A*24:02 EYRALQLHL 219-227 TS-M112-1 TS-M112-2 A*02:01 SLFLGILSV 188-196 TB-0158-1 TB-0158-2 TB-0158-4 A*02:01 AIISGDSPV 65-73 TS-M101-1 TS-M101-2 A*02:01 YIISGDSPV 65-73 TS-M102-1 TS-M102-2 A*02:01 YLSGANLNL 605-613 TS-M103-1 TS-M103-2 A*02:01 YLSGADLNL 605-613 TS-M080-1 TS-M080-2 A*02:01 TLADFDPRV 883-891 TS-M084-1 TS-M084-2 A*02:01 YMCSFLFNL 666-674 TB-0164-1 TB-0164-2 TB-0164-4 A*02:01 YLEPGPVTV TB-0120-1 TB-0120-2 TB-0120-4 A*03:01 ALLAVGATK TB-0166-1 TB-0166-2 TB-0166-4 A*02:01 KTWGQYWQV 154-162 TB-0035-1 TB-0035-2 TB-0035-4 A*02:01 YLEPGPVTA 280-288 TB-M082-1 TB-M082-2 A*02:01 ITDQVPFSV 209-217 TS-0014-1C TB-0014-2 TB-0014-4 A*02:01 IMDQVPFSV 209-217 TS-0013-1C TB-0013-2 TB-0013-4 A*24:02 VYFFLPDHL 170-178 TS-M089-1 TS-M089-2 A*02:01 FVGEFFTDV 144-152 TB-0134-1 TB-0134-2 TB-0134-4 A*24:02 EYILSLEEL 298-306 TB-0140-1 TB-0140-2 TB-0140-4 A*02:01 RLLQETELV 689-697 TB-0016-1 TB-0016-2 TB-0016-4 A*02:01 KIFGSLAFL 369-377 TB-0015-1 TB-0015-2 TB-0015-4

CA9 CD20 CD33 CD33 A65Y CEA CEA N6D EphA2 EZH2Glycoprotein 100Glycoprotein 100 gp100 gp100 gp100 (wild) gp100 (mutant) gp100-intron 4 GPC3 GPC3 Her-2/neu Her-2/neu E75 HM1.24 A*02:01 KLQDASAEV 126-134 TS-M083-1 TS-M083-2 hTERT A*02:01 ILAKFLHWL 540-548 TS-M115-1 TS-M115-2 hTERT A*02:01 ALLTSRLRFI 615-624 TB-0128-1 TB-0128-2 TB-0128-4 hTERT A*02:01 GLLGASVLGL 674-683 TB-0150-1 TB-0150-2 TB-0150-4 hTERT A*02:01 YLFFYRKSV TB-0113-1 TB-0113-2 TB-0113-4 hTERT A*02:01 YLQVNSLQTV TB-0114-1 TB-0114-2 TB-0114-4 hTERT A*03:01 KLFGVLRLK TB-0105-1 TB-0105-2 TB-0105-4 hTERT A*24:02 VYGFVRACL 461-469 TS-M010-1 IDO A*02:01 ALLEIASCL 199-207 TS-M086-1 TS-M086-2 LIVIN A*02:01 QLCPICRAPV 175-184 TB-0156-1 TB-0156-2 TB-0156-4 LY6K A*24:02 RYCNLEGPPI 177-186 TB-0167-1 TB-0167-2 TB-0167-4 MAGE-A1 A*01:01 EADPTGHSY 161-169 TS-M114-1 TS-M114-2 MAGE-A1 A*02:01 KVLEYVIKV 278-286 TB-M070-1 TB-M070-2 TB-M070-4 MAGE-A1 B*07:02 RVRFFFPSL 289-297 TS-M071-1 TS-M071-2 MAGE-A10 A*02:01 GLYDGMEHL 254-262 TS-M078-1 TS-M078-2 MAGE-A2 A*02:01 YLQLVFGIEV 157-166 TB-M072-1 TB-M072-2 MAGE-A2 A*24:02 EYLQLVFGI 156-164 TS-M073-1 TS-M073-2 MAGE-A3 A*01:01 EVDPIGHLY 168-176 TB-M074-1 TB-M074-2 TB-M074-4 MAGE-A3 A*02:01 KVAELVHFL 112-120 TS-M075-1 TS-M075-2 MAGE-A3 A*02:01 FLWGPRALV 271-279 TS-M076-1 TB-M076-2 MAGE-A3 A*24:02 IMPKAGLLI 195-203 TS-M077-1 TS-M077-2 MAGE-C1 A*02:01 ILFGISLREV 959-968 TS-M138-1 TS-M138-2 Mart-1 A*02:01 ELAGIGILTV 26-35 TB-0009-1 TB-0009-2 TB-0009-4 TS-0009-P

Code No.

BV421 标记

peptide 人类癌症相关抗原

Mesothelin A*02:01 SLLFLLFSL

TB-0110-1 TB-0110-2 TB-0110-4

Mesothelin A*02:01 VLPLTVAEV TB-0112-1 TB-0112-2 TB-0112-4 MCPyV large T Ag

A*24:02 EWWRSGGFSF 92-101 TS-M091-1 TS-M091-2

MUC1 A*02:01 LLLLTVLTV 12-20 TB-M088-1 TB-M088-2 TS-M088-P MUC1 A*02:01 LLLTVLTVV 13-21 TB-0153-1 TB-0153-2 TB-0153-4

NY-ESO-1 A*02:01 SLLMWITQC 157-165 TS-M011-1 TB-M011-2 TB-M011-4 TS-M011-P NY-ESO-1 C9V A*02:01 SLLMWITQV 157-165 TS-M105-1 TS-M105-2 TB-M105-4

NY-ESO-1 B*35:01 MPFATPMEA 94-102 TB-0129-1 TB-0129-2 TB-0129-4 P2X5 B*07:02 TPNQRQNVC 110-118 TS-M109-1 TS-M109-2

p53 A*02:01 LLGRNSFEV 264-272 TS-M081-1 TS-M081-2 p53 A*02:01 KLCPVQLWV 139-147 TB-0152-1 TB-0152-2 TB-0152-4

p53 A*02:01 GLAPPQHLIRV 187-197 TB-0136-1 TB-0136-2 TB-0136-4 p53 A*02:01 SLPPPGTRV 149-157 TB-0159-1 TB-0159-2 TB-0159-4

p53 A*02:01 RMPEAAPPV 65-73 TB-0157-1 TB-0157-2 TB-0157-4 p53 A*02:01 YLGSYGFRL 103-111 TB-0163-1 TB-0163-2 TB-0163-4

PAP A*02:01 ALDVYNGLL 299-307 TS-M107-1 TS-M107-2 PP2A A*02:01 SLLPAIVEL 402-410 TS-M095-1 TS-M095-2

PRAME A*02:01 ALYVDSLFFL 300-309 TS-M116-1 TS-M116-2 PRAME A*02:01 VLDGLDVLL 100-108 TS-M117-1 TS-M117-2

PRAME A*02:01 SLLQHLIGL 425-433 TS-M118-1 TS-M118-2 PRAME A*02:01 SLYSFPEPEA 142-151 TS-M119-1 TS-M119-2

Proteinase 3 (PR-1)

A*02:01 VLQELNVTV 169-177 TB-0017-1 TB-0017-2 TB-0017-4

PSA A*02:01 FLTPKKLQCV 141-150 TS-M120-1 TS-M120-2

PSA A*02:01 KLQCVDLHV 146-154 TS-M087-1 TS-M087-2 PSA A*24:02 CYASGWGSI 153-161 TB-0139-1 TB-0139-2 TB-0139-4

PSCA A*02:01 AILALLPAL 105-113 TB-0127-1 TB-0127-2 TB-0127-4 PSMA A*02:01 VLAGGFFLL 27-38 TB-0161-1 TB-0161-2 TB-0161-4

RHAMM A*02:01 ILSLELMKL 165-173 TS-M104-1 TS-M104-2 SSX-2 A*02:01 KASEKIFYV 41-49 TS-M079-1 TS-M079-2

Survivin T2M A*02:01 LMLGEFLKL 96-104 TS-M085-1 TS-M085-2 Survivin A*02:01 LTLGEFLKL 96-104 TB-0155-1 TB-0155-2 TB-0155-4

Survivin (18-27)(modK)

A*03:01 RISTFKNWPK TB-0108-1 TB-0108-2 TB-0108-4

Survivin-2B A*24:02 AYACNTSTL 80-88 TS-M025-1 TS-M025-2

TS-M025-P topo II A*02:01 FLYDDNQRV 828-836 TB-0132-1 TB-0132-2 TB-0132-4 Tyrosinase A*02:01 YMDGTMSQV 368-376 TS-0019-1C TS-0019-2C TB-0019-4

Tyrosinase A*24:02 AFLPWHRLF 206-214 TS-M090-1 TS-M090-2 Tyrosinase A*01:01 KSDICTDEY 243-251 TB-0126-1 TB-0126-2 TB-0126-4

Tyrosinase B*07:02 LPWHRLFLL 208-216 TB-0119-1 TB-0119-2 TB-0119-4 WT1 A*02:01 RMFPNAPYL 126-134 TS-M016-1 TS-M016-2 TB-M016-4

WT1 A*02:01 VLDFAPPGA 37-45 TS-M140-1 TS-M140-2 TS-M140-P modified WT1 A*24:02 CYTWNQMNL 235-243 TS-M014-1 TS-M014-2 TB-M014-4

抗原名 MHC allele 多肽序列位置

Code No.

BV421 标记 (50 tests)

诱导用 peptide

人类病毒·细菌相关抗原

AdV 11 Hexon A*02:01 YLLFEVFDV 913-921 TS-M058-1 TS-M058-2 AdV 11 Hexon A*02:01 LLFEVFDVV 914-922 TB-M059-1 TB-M059-2 AdV 11 Hexon A*24:02 TYFNLGNKF 37-45 TS-M062-1 TS-M062-2 AdV 11 Hexon A*24:02 VYSGSIPYL 696-704 TS-M064-1 TS-M064-2 AdV 5 Hexon A*24:02 TYFSLNNKF 37-45 TS-M063-1 TS-M063-2 AdV Hexon A*02:01 YVLFEVFDV 917-925 TS-M061-1 TS-M061-2 AdV Hexon B*07:02 KPYSGTAYNSL 114-124 TS-M065-1 TS-M065-2 AdV Hexon B*07:02 KPYSGTAYNAL 114-124 TS-M066-1 TS-M066-2 AdV Hexon B*35:01 MPNRPNYIAF 320-329 TS-M067-1 TB-M067-2 AdV Hexon B*35:01 IPYLDGTFY 705-713 TS-M068-1 TB-M068-2 hCMV IE1 A*02:01 VLEETSVML 316-324 TS-M057-1 TB-M057-2 hCMV IE1 A*03:01 KLGGALQAK 184-192 TS-M100-1 TS-M100-2 hCMV IE1 B*08:01 ELRRKMMYM 199-207 TS-0026-1C TS-0026-2C TB-0026-4 hCMV IE1 B*08:01 QIKVRVDMV 88-96 TB-0147-1 TB-0147-2 TB-0147-4 hCMV pp50 A*01:01 VTEHDTLLY 245-253 TS-0024-1C TS-0024-2C TB-0024-4 hCMV pp65 A*02:01 NLVPMVATV 495-503 TS-0010-1C TS-0010-2C TB-0010-4 TS-0010-P hCMV pp65 A*11:01 ATVQGQNLK 501-509 TS-M012-1 TS-M012-P hCMV pp65 A*24:02 QYDPVAALF 341-349 TS-0020-1C TS-0020-2C TB-0020-4 TS-0020-P hCMV pp65 B*07:02 RPHERNGFTVL 265-275 TB-M099-1 TB-M099-2 hCMV pp65 B*07:02 TPRVTGGGAM 417-426 TS-0025-1C TB-0025-2 TB-0025-4 hCMV pp65 B*15:01 KMQVIGDQY 215-223 TS-M013-1 hCMV pp65 B*35:01 IPSINVHHY 123-131 TB-0027-1 TB-0027-2 TB-0027-4 EBNA1 B*35:01 HPVGEADYFEY TB-0168-1 TB-0168-2 TB-0168-4 EBNA4 B*15:01 GQGGSPTAM TB-0101-1 TB-0101-2 TB-0101-4 EBNA6 B*07:02 QPRAPIRPI TB-0123-1 TB-0123-2 TB-0123-4 EBV BALF4 A*02:01 FLDKGTYTL 276-284 TB-0131-1 TB-0131-2 TB-0131-4 EBV BMLF1 A*02:01 GLCTLVAML 280-288 TS-0011-1C TS-0011-2C TB-0011-4 TS-0011-P EBV BMLF1 A*24:02 DYNFVKQLF 320-328 TS-M003-1 TS-M003-P EBV BRLF1 A*24:02 TYPVLEEMF 198-206 TS-M002-1 TS-M002-P EBV BRLF1 A*03:01 RVRAYTYSK 148-156 TS-M124-1 TS-M124-2 EBV BZLF1 B*08:01 RAKFKQLL 190-197 TS-M036-1 TS-M036-2 EBV BZLF1 B*35:01 EPLPQGQLTAY 54-64 TS-M037-1 TS-M037-2 EBV EBNA1 C*03:03 FVYGGSKTSL 508-517 TS-M150-1 TS-M150-2 EBV EBNA3A A*03:01 RLRAEAQVK 603-611 TS-M033-1 TS-M033-2 EBV EBNA3A A*24:02 RYSIFFDYM 246-254 TS-M004-1 TS-M004-P EBV EBNA3A B*07:02 RPPIFIRRL 379-387 TS-M142-1 TS-M142-2 EBV EBNA3A B*08:01 FLRGRAYGL 325-333 TS-M123-1 TS-M123-2 EBV EBNA3B A*11:01 AVFDRKSDAK 399-408 TS-M028-1 EBV EBNA3B A*11:01 IVTDFSVIK 416-424 TS-M029-1 EBV EBNA3B A*24:02 TYSAGIVQI 217-225 TS-M005-1 TS-M005-P EBV LMP1 A*02:01 YLQQNWWTL 159-167 TS-M006-1 EBV LMP1 A*02:01 YLLEMLWRL 125-133 TB-0146-1 TB-0146-2 TB-0146-4 EBV LMP2 A*02:01 TVCGGIMFL 243-251 TS-M030-1 TS-M030-2 EBV LMP2 A*02:01 LLWTLVVLL 329-337 TS-M031-1 TS-M031-2 EBV LMP2 A*02:01 CLGGLLTMV 426-434 TS-M032-1 TS-M032-2 EBV LMP2 A*02:01 FLYALALLL 356-364 TS-M069-1 TS-M069-2 TS-M069-P EBV LMP2 A*11:01 SSCSSCPLSK 340-349 TS-M111-1 TS-M111-2 TS-M111-P

抗原名多肽序列位置

Code No.

FITC 标记 (50 tests)

诱导用 peptide

EBV LMP2 S9T

A*11:01 SSCSSCPLTK 340-349 TS-M135-1 TS-M135-2 TS-M135-P

EBV LMP2 A*24:02 IYVLVMLVL 222-230 TS-M001-1 TS-M001-P EBV LMP2 A*24:02 PYLFWLAAI 131-139 TS-M034-1 TS-M034-2 EBV LMP2 A*24:02 TYGPVFMSL 419-427 TS-M035-1 TS-M035-2 TS-M035-P EBV LMP2 B*35:01 MGSLEMVPM 1-9 TB-M038-1 TB-M038-2 EBV Mix A*24:02 TS-M009-1 Glycoprotein B A*02:01 LMWYELSKI TB-0154-1 TB-0154-2 TB-0154-4 GPC A*02:01 YLVSIFLHL TB-0116-1 TB-0116-2 TB-0116-4 HBV core A*02:01 FLPSDFFPSV 18-27 TB-0018-1 TB-0018-2 TB-0018-4 TS-0018-P HBV core A*24:02 EYLVSFGVW 117-125 TB-0022-1 TS-0022-2C TB-0022-4 TS-0022-P HBV env A*02:01 WLSLLVPFV 335-343 TS-M051-1 TS-M051-2 HBV env A*02:01 GLSPTVWLSV 348-357 TS-M052-1 TS-M052-2 HBV pol A*02:01 FLLSLGIHL 575-583 TS-M053-1 TB-M053-2 HBV pol A*24:02 KYTSFPWLL 756-764 TS-0023-1C TS-0023-2C TB-0023-4 HCV E2 A*24:02 EYVLLLFLL 717-725 TS-M044-1 TS-M044-2 HCV NS3 A*02:01 CINGVCWTV 1073-1081 TS-M039-1 TB-M039-2 TB-M039-4 HCV NS3 A*02:01 KLVALGINAV 1406-1415 TS-M040-1 TB-M040-2 TS-M040-P HCV NS3 A*02:01 CVNGVCWTV TB-0118-1 TB-0118-2 TB-0118-4 HCV NS4B A*02:01 VLSDFKTWL 1992-2000 TS-M041-1 TS-M041-2 HCV NS5B A*02:01 ALYDVVTKL 2594-2602 TS-M042-1 TS-M042-2 HCV NS5B A*02:01 ALYDVVSKL 2594-2602 TS-M043-1 TS-M043-2 HCV polyprotein

A*01:01 ATDALMTGY TB-0125-1 TB-0125-2 TB-0125-4

HHV-6B U54 A*02:01 ILYGPLTRI 129-137 TS-M143-1 TS-M143-2 HIV env gp160 A*24:02 RYLRDQQLL 584-592 TS-M007-1 TS-M007-2 TS-M007-3 TS-M007-P HIV env A*24:02 RYLKDQQLL 67-75 TB-0130-1 TB-0130-2 TB-0130-4 HIV env B*27:05 GRAFVTIGK 103-111 TB-0148-1 TB-0148-2 TB-0148-4 HIV gag A*02:01 SLYNTVATL 77-85 TS-M027-1 TS-M027-2 TS-M027-3 TB-M027-4 TS-M027-P HIV gag A*02:01 TLNAWVKVV 19-27 TS-M139-1 TS-M139-2 HIV gag A*03:01 RLRPGGKKK TB-0109-1 TB-0109-2 TB-0109-4 HIV gag B*07:02 GPGHKARVL 223-231 TB-0142-1 TB-0142-2 TB-0142-4 HIV gag B*27:05 KRWIILGLNK 265-274 TB-0124-1 TB-0124-2 TB-0124-4 HIV gag B*27:05 KRWIIMGLNK TB-0106-1 TB-0106-2 TB-0106-4 HIV gag B*57:01 ISPRTLNAW TB-0104-1 TB-0104-2 TB-0104-4 HIV nef A*24:02 RYPLTFGW 134-141 TS-M110-1 TS-M110-2 HIV nef A*03:01 QVPLRPMTYK 73-82 TB-0138-1 TB-0138-2 TB-0138-4 HIV nef B*07:02 TPGPGVRYPL 128-137 TS-M054-1 TS-M054-2 HIV nef B*35:01 VPLRPMTY 74-81 TB-M106-1 TS-M106-2 HIV pol A*02:01 ILKEPVHGV 476-484 TS-0008-1C TS-0008-2C TB-0008-4 HIV RT B*35:01 NPDIVIYQY 175-183 TB-M055-1 TS-M055-2 HIV RT B*35:01 VPLDEDFRKY 273-282 TB-0149-1 TB-0149-2 TB-0149-4 HIV Vif A*02:01 GLADQLIHL 101-109 TB-0135-1 TB-0135-2 TB-0135-4 HPV16 E6 A*02:01 KLPQLCTEL 18-26 TS-M047-1 TS-M047-2 HPV16 E6 A*24:02 VYDFAFRDL 49-57 TS-M049-1 TS-M049-2 HPV16 E6 A*03:01 KLCLRFLSK 64-72 TB-0137-1 TB-0137-2 TB-0137-4 HPV16 E7 A*02:01 YMLDLQPET 11-19 TB-0031-1 TB-0031-2 TB-0031-4 HPV16 E7 A*02:01 YMLDLQPETT 11-20 TS-M048-1 TS-M048-2 TS-M048-P HPV16 E7 A*02:01 MLDLQPETT 12-20 TB-0173-1 TB-0173-2 TB-0173-4

MHC allele

Code No.

诱导用 peptide

HPV16 E7 B*07:02 KPTLKEYVL 5-13 TB-0143-1 TB-0143-2 TB-0143-4

HTLV bZIP A*02:01 AVLDGLLSL 42-50 TB-0133-1 TB-0133-2 TB-0133-4 HTLV-1 Env A*24:02 FFQFCPLIF 11-19 TS-M022-1

HTLV-1 Tax A*02:01 LLFGYPVYV 11-19 TS-M017-1 TS-M017-2 TB-M017-4 TS-M017-P HTLV-1 Tax A*02:01 QLGAFLTNV 178-186 TS-M019-1

HTLV-1 Tax A*11:01 KVLTPPITH 88-96 TS-M023-1 HTLV-1 Tax A*11:01 QSSSFIFHK 272-280 TS-M024-1

HTLV-1 Tax A*24:02 LFGYPVYVF 12-20 TS-M020-1 HTLV-1 Tax A*24:02 PYKRIEELL 187-195 TS-M021-1

HTLV-1 Tax A*24:02 SFHSLHLLF 301-309 TS-M018-1 TS-M018-2 TS-M018-P Influenza M1 A*02:01 GILGFVFTL 58-66 TS-0012-1C TS-0012-2C TB-0012-4 TS-0012-P Influenza M1 A*02:01 ILGFVFTLTV TB-0165-1 TB-0165-2 TB-0165-4 Influenza NP A*01:01 CTELKLSDY 44-52 TS-M045-1 TS-M045-2

Influenza NP B*35:01 LPFEKSTVM 418-426 TB-M046-1 TB-M046-2 Influenza PA A*24:02 YYLEKANKI 130-138 TS-M144-1 TS-M144-2

Influenza PB1 A*24:02 SYLIRALTL 216-224 TS-M145-1 TS-M145-2 Influenza PB1 A*24:02 RYTKTTYWW 430-438 TS-M146-1 TS-M146-2

Influenza PB1 A*24:02 SYINRTGTF 482-490 TS-M147-1 TS-M147-2 Influenza PB1 A*24:02 RYGFVANF 498-505 TS-M148-1 TS-M148-2

Influenza PB2 A*24:02 TYQWIIRNW 549-557 TS-M149-1 TS-M149-2 LCMV ND A*02:01 ALPHIIDEV

TB-0121-1 TB-0121-2 TB-0121-4

LMP-2 A*24:02 TYGPVFMCL TB-0117-1 TB-0117-2 TB-0117-4 M. tuberculosis 16 kDa

A*02:01 GILTVSVAV 120-128 TS-M132-1 TS-M132-2

M. tuberculosis 19 kDa

A*02:01 VLTDGNPPEV 88-97 TS-M133-1 TS-M133-2

M. tuberculosis Ag85A

A*02:01 GLPVEYLQV 48-56 TS-M128-1 TS-M128-2

M. tuberculosis Ag85A

A*02:01 KLIANNTRV 242-250 TS-M129-1 TS-M129-2

M. tuberculosis Ag85B

A*02:01 KLVANNTRL 199-207 TS-M131-1 TS-M131-2

M. tuberculosis Ag85C

A*02:01 WPTLIGLAM 204-212 TS-M134-1 TS-M134-2

M. tuberculosis ESAT-6

A*02:01 AMASTEGNV 82-90 TS-M125-1 TS-M125-2

M. tuberculosis E Hsp65

A*02:01 KLQERLAKL 362-370 TS-M130-1 TS-M130-2

M. tuberculosis MPT51

A*02:01 TLAGKGISVV 53-62 TS-M026-1

TS-M026-P

M. tuberculosis Rv1614

A*02:01 FLYELIWNV 197-205 TS-M127-1 TS-M127-2

Measles virus HA A*02:01 KLWCRHFCV 576-584 TS-M092-1 TS-M092-2

NS3 B*08:01 HSKKKCDEL TB-0145-1 TB-0145-2 TB-0145-4 Nucleoprotein (NP) A*03:01 ILRGSVAHK

TB-0103-1 TB-0103-2 TB-0103-4

Nucleoprotein (NP) B*27:05 SRYWAIRTR TB-0111-1 TB-0111-2 TB-0111-4 RSV matrix protein A*01:01 YLEKESIYY 229-237 TS-M056-1 TS-M056-2

S protein A*02:01 FLLTRILTI TB-0122-1 TB-0122-2 TB-0122-4 VZV IE62 A*02:01 ALWALPHAA 593-601 TS-M122-1 TS-M122-2

Code No.

BV421 标记

(50 tests) 诱导用 peptide

人类 HLA-E Tetramer HLA-A*02, A*24 leader

HLA-E*01:03 VMAPRTLVL 3-11 TS-ME01-1

HLA-A*02, A*24 leader Negative

HLA-E*01:03 VMAPKTLVL 3-11 TS-ME02-1

HLA-A*02, A*24 leader

HLA-E*01:01 VMAPRTLVL 3-11 TS-ME03-1

HLA-A*02, A*24 leader Negative

HLA-E*01:01 VMAPKTLVL 3-11 TS-ME04-1

Code No.

BV421 标记

peptide 人类其他抗原

BTG1 A*02:01 TLWVDPYEV 103-111 TS-M097-1 TS-M097-2 H-Y A*02:01 FIDSYICQV 311-319 TS-M094-1 TS-M094-2 HA-1 A*02:01 VLHDDLLEA 137-145 TS-M093-1 TS-M093-2 HA-2 A*02:01 YIGEVLVSV 41-49 TS-M108-1 TS-M108-2 HA-8 A*02:01 RTLDKVLEV 149-157 TS-M098-1 TS-M098-2 IAPP A*02:01 KLQVFLIVL 5-13 TB-0170-1 TB-0170-2 TB-0170-4 IGRP A*02:01 LNIDLLWSV TB-0107-1 TB-0107-2 TB-0107-4 IGRP A*02:01 VLFGLGFAI 265-273 TB-0162-1 TB-0162-2 TB-0162-4 Insulin B A*02:01 HLVEALYLV TB-0102-1 TB-0102-2 TB-0102-4 RNA-dependent helicase

A*02:01 YLLPAIVHI 148-156 TS-M096-1 TS-M096-2

SMCY H-Y B*07:02 SPSVDKARAEL TB-0144-1 TB-0144-2 TB-0144-4

Code No.

诱导用 peptide

小鼠癌症相关抗原

CEA H-2Db EAQNTTYL 526-533 TS-M518-1 TS-M518-P Erk2 K136Q H-2Kd QYIHSANVL 136-144 TS-M545-1 TS-M545-2 gp100 (human) H-2Db KVPRNQDWL 25-33 TS-M505-1 TS-M505-2 TB-M505-4 TS-M505-P gp100 (mouse) H-2Db EGSRNQDWL 25-33 TS-M546-1 TS-M546-2 HER2/neu H-2Kd TYLPTNASL 63-71 TS-M526-1 TS-M526-P JAK1 H-2Kd SYFPEITHI 367-375 TS-M544-1 TS-M544-2 MAGE-A3 H-2Kd SYVKVLHHM TB-5105-1 TB-5105-2 TB-5105-4 MAGE-A5 H-2Kb HNTQYCNL 5-12 TS-M559-1 TS-M559-2 MAGE-AX H-2Kb LGITYDGM 169-176 TS-M558-1 TS-M558-2 P815A P1A H-2Ld LPYLGWLVF 35-43 TS-M519-1 TS-M519-P pBM1 H-2Kb INFDFNTI 207-214 TS-M563-1 TS-M563-2 PSA (human) H-2Db HCIRNKSVIL 65-74 TS-M561-1 TS-M561-2 Survivin H-2Db ATFKNWPFL 20-28 TB-5108-1 TB-5108-2 TB-5108-4 Survivin H-2Kb MFFCFKEL TB-5102-1 TB-5102-2 TB-5102-4 TERT (mouse) H-2Kb VGRNFTNL 198-205 TS-M562-1 TB-M562-2 Transportin-3 H-2Kd SYMLQALCI TB-5104-1 TB-5104-2 TB-5104-4 TRP-2 H-2Kb SVYDFFVWL 180-188 TB-5004-1 TB-5004-2 TB-5004-4 TS-5004-P WT1 H-2Db RMFPNAPYL 126-134 TS-M504-1 TS-M504-2

Code No.

诱导用

peptide 小鼠病毒·细菌相关抗原

Adv5 E1A H-2Db SGPSNTPPEI 234-243 TS-M564-1 TS-M564-2 HBsAg H-2Ld IPQSLDSWWTSL 28-39 TS-M522-1 TS-M522-P HBV core H-2Kb MGLKFRQL 93-100 TS-M537-1 TS-M537-2 HBV HBsAg H-2Kb VWLSVIWM 190-197 TB-5110-1 TB-5110-2 TB-5110-4 HCV NS3 H-2Db GAVQNEVTL 1629-1637 TS-M532-1 TS-M532-2 HIV env H-2Dd IGPGRAFYA 315-323 TB-M536-1 TS-M536-2 HIV gag H-2Kd AMQMLKETI 197-205 TB-5007-1 TB-5007-2 TB-5007-4 HIV P18-I10 H-2Dd RGPGRAFVTI 318-327 TS-M516-1 TS-M516-P HPV16 E7 H-2Db RAHYNIVTF 49-57 TB-5008-1 TS-5008-2C TB-5008-4 TS-5008-P HSV-1 gB H-2Kb SSIEFARL 498-505 TS-M523-1 TS-M523-P HTLV-1 Tax H-2Dk ARLHRHALL 38-46 TS-M531-1 TS-M531-P Influenza HA H-2Kd IYSTVASSL 533-541 TS-M520-1 TS-M520-2 TS-M520-P Influenza HA H-2Kd LYQNVGTYV 204-212 TS-M535-1 TS-M535-2 Influenza NP H-2Kd TYQRTRALV 147-155 TB-M534-1 TS-M534-2 TS-M534-P Influenza NP H-2Db ASNENMDAM 366-374 TS-M527-1 TS-M527-2 TS-M527-P Influenza NP H-2Db ASNENMDTM 366-374 TS-M502-1 TS-M502-2 TS-M502-P Influenza NP H-2Db ASNENMETM 366-374 TS-M508-1 TS-M508-2 TS-M508-P Influenza NS2 H-2Kb 114-121 TS-M566-1 TS-M566-2 Influenza PA H-2Db 224-233 TS-M528-1 TS-M528-2 TS-M528-P Influenza PB1 H-2Kb 703-711 TS-M533-1 TS-M533-2 LCMV gp H-2Kb 118-125 TB-5012-1 TB-5012-2 TB-5012-4 LCMV gp H-2Db 276-286 TB-5009-1 TB-5009-2 TB-5009-4 LCMV gp H-2Db

RTFSFQLI SSLENFRAYV SSYRRPVGI ISHNFCNL SGVENPGGYCL KAVYNFATC 33-41 TS-5002-1C TS-5002-2C TB-5002-4 TS-5002-P

MHC allele

Code No.

诱导用

peptide 小鼠病毒·细菌相关抗原

LCMV gp C9M H-2Db KAVYNFATM 33-41 TS-M512-1 TS-M512-2 TS-M512-P LCMV gp H-2Kb AVYNFATC 34-41 TS-5010-1C TS-5010-2C TB-5010-4 LCMV gp H-2Kb AVYNFATCGI 34-43 TB-5011-1 TB-5011-2 TB-5011-4 LCMV L protein H-2Kb LEYDFNKL 825-832 TB-5014-1 TB-5014-2 TB-5014-4 LCMV NP H-2Ld RPQASGVYM 118-126 TS-M514-1 TS-M514-P LCMV NP H-2Kb YTVKYPNL 205-212 TB-5015-1 TB-5015-2 TB-5015-4 LCMV NP H-2Db FQPQNGQFI 396-404 TS-M513-1 TS-M513-2 TB-M513-4 TS-M513-P MCMV IE1 H-2Ld YPHFMPTNL 168-176 TS-M510-1 TS-M510-P MCMV M45 H-2Db HGIRNASFI 985-993 TB-5109-1 TB-5109-2 TB-5109-4 MCMV M164 H-2Dd AGPPRYSRI 257-265 TB-5111-1 TB-5111-2 TB-5111-4 MHV M2 H-2Kd GFNKLRSTL 91-99 TS-M568-1 TS-M568-2 MoMSV H-2Db (Abu)(Abu)L(Abu)LTVFL 85-93 TB-5016-1 TB-5016-2 TB-5016-4 MuLV gp70 H-2Ld SPSYVYHQF 423-431 TS-M521-1 TS-M521-2 TS-M521-P MuLV p15E H-2Kb KSPWFTTL 604-611 TS-M507-1 TS-M507-2 TS-M507-P Polyomavirus MT H-2Dk RRLGRTLLL 389-397 TS-M530-1 TS-M530-P RSV F glycoprotein H-2Kd KYKNAVTEL 85-93 TS-M555-1 TS-M555-2 RSV M protein H-2Db NAITNAKII 187-195 TS-5018-1C TS-5018-2C TB-5018-4 RSV M2 protein H-2Kd SYIGSINNI 82-90 TS-M506-1 TS-M506-2 TB-M506-4 TS-M506-P RSV M2 protein H-2Kd SYIGINNI TS-M567-1 TS-M567-2 S protein H-2Db CSLWNGPHL TB-5101-1 TB-5101-2 TB-5101-4 SeV H-2Kb FAPGNYPAL 324-332 TS-M509-1 TS-M509-P SIV gag H-2Db AAVKNWMTQTL 312-322 TB-5017-1 TB-5017-2 TB-5017-4 SV40 large T Ag H-2Db SAINNYAQKL 206-215 TB-M539-1 TB-M539-2 TB-M539-4 SV40 large T Ag H-2Db QGINNLDNL 489-497 TS-M540-1 TS-M540-2 VACV B8R H-2Kb TSYKFESV 20-27 TB-M538-1 TB-M538-2 VSV NP H-2Kb RGYVYQGL 52-59 TS-M529-1 TS-M529-P

Code No.

诱导用

peptide 小鼠其他抗原

BCG MPT51 H-2Dd GGPHAVYLL 24-32 TS-M517-1 TS-M517-P β-galactosidase H-2Ld TPHPARIGL 876-884 TS-M511-1 TS-M511-2 TS-M511-P β-galactosidase H-2Kb DAPIYTNV 96-103 TS-M501-1 TS-M501-2 TS-M501-P Chlamydia CrpA H-2Db ASFVNPIYL 63-71 TS-M548-1 TS-M548-2 EGFP H-2Kd HYLSTQSAL 200-208 TS-M525-1 TS-M525-P HA-60 H-2Kb LTFNYRNL 39-46 TS-M551-1 TS-M551-2 HY Uty H-2Db WMHHNMDLI 246-254 TS-M524-1 TB-M524-2 TB-M524-4 TS-M524-P IGRP H-2Kd VYLKTNVFL 206-214 TB-M552-1 TB-M552-2 InsB H-2Kd LYLVCGERL 15-23 TS-M554-1 TS-M554-2 Listeria LLO H-2Kd GYKDGNEYI 91-99 TS-M503-1 TS-M503-P Malaria (P. berghei ) CSP

H-2Kd SYIPSAEKI 252-260 TS-M515-1 TS-M515-P

Malaria (P. yoelii ) CSP

H-2Kd SYVPSAEQI 280-288 TB-M547-1 TB-M547-2

M. tuberculosis 32a

H-2Db GAPINSATAM 309-318 TS-M549-1 TS-M549-2

MHC allele

Code No.

诱导用

peptide 小鼠其他抗原

MimA2 H-2Db YAIENYLEL TS-M557-1 TS-M557-2 MTB Ag85A H-2Ld MPVGGQSSF 70-78 TB-5112-1 TB-5112-2 TB-5112-4 NRP-V7 H-2Kd KYNKANVFL TB-M553-1 TS-M553-2 OVA H-2Kb SIINFEKL 257-264 TS-5001-1C TS-5001-2C TB-5001-4 TS-5001-P OVA E1 H-2Kb EIINFEKL 257-264 TS-M541-1 TS-M541-2 OVA G4 H-2Kb SIIGFEKL 257-264 TS-M542-1 TS-M542-2 OVA Q4H7 H-2Kb SIIQFEHL 257-264 TS-M543-1 TS-M543-2 TB10.4 H-2Kb IMYNYPAM 4-11 TS-M550-1 TS-M550-2 Toxoplasma gondii H-2Kb SVLAFRRL TB-5103-1 TB-5103-2 TB-5103-4 TSKB20 H-2Kb ANYKFTLV 380-387 TS-M560-1 TS-M560-2

Code No.

诱导用 peptide

人类·小鼠阴性对照

HIV env gp160 A*24:02 RYLRDQQLL 584-592 TS-M007-1 TS-M007-2 TS-M007-P Negative A*02:01 序列保密 TS-0029-1C TS-0029-2C TB-0029-4 TS-0029-P

SIY (Negative) H-2Kb SIYRYYGL designed peptide

TS-M008-1 TS-M008-2 TS-M008-P

※为了鉴定 MHC 四聚体试剂的特异性，推荐使用 allele 相同但多肽序列不同的 MHC 四聚体试剂作为阴性对照。

MHC Class II 四聚体产品列表

Code No.

BV421 标记

(20 tests) 诱导用 peptide

人类

EBV EBNA1 DRB1*01:01 TSLYNLRRGTALA 515-527 TS-M803-1 TS-M803-2 TS-M803-P HIV gag DRB1*01:01 DYVDRFYKTLRAE 295-307 TS-M802-1 TS-M802-2 TS-M802-P HTLV-1 Tax DRB1*01:01 YLYQLSPPITWPL 155-167 TS-M815-1 TS-M815-2 TS-M815-P Influenza HA DRB1*01:01 PKYVKQNTLKLAT 306-318 TS-M804-1 TS-M804-2 TS-M804-P Influenza HA DRB1*04:05 PKYVKQNTLKLAT 306-318 TS-M806-1 TS-M806-2 Influenza HA DRB1*04:01 PKYVKQNTLKLAT 306-318 TS-M810-1 TS-M810-2 Influenza HA DRB1*11:01 PKYVKQNTLKLAT 306-318 TS-M808-1 TS-M808-2 CLIP DRB1*01:01 PVSKMRMATPLLMQA 103-117 TS-M801-1 TS-M801-2 TS-M801-P CLIP DRB1*04:05 PVSKMRMATPLLMQA 103-117 TS-M805-1 TS-M805-2 CLIP DRB1*04:01 PVSKMRMATPLLMQA 103-117 TS-M809-1 TS-M809-2 CLIP DRB1*11:01 PVSKMRMATPLLMQA 103-117 TS-M807-1 TS-M807-2

Code No.

BV421 标记

peptide 小鼠

FMLV I-Ab EPLTSLTPRCNTAWNRLKL 123-141 TS-M705-1 Eα I-Ab ASFEAQGALANIAVDKA 52-68 TS-M706-1 ESAT-6 I-Ab MTEQQWNFAGIEAAASAIQG 1-20 TS-M707-1 TS-M707-P MOG I-Ab MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK 35-55 TS-M704-1 TS-M704-2 TS-M704-P OVA I-Ab ISQAVHAAHAEINEAGR 323-339 TS-M710-1 TS-M710-2 TS-M703-P

其他四聚体产品列表

Code No.

BV421 标记

peptide 其他物种 MHC 产品

SIV gag Mamu-A*90120-5 SSVDEQIQW 241-249 TS-M901-1 TS-M901-2 SIV gag Mamu-A*01 CTPYDINQM 181-189 TB-5003-1 TB-5003-2 TB-5003-4 SIV gag GW9 Mafa-A1*063 GPRKPIKCW 386-394 TB-5022-1 TB-5022-2 TB-5022-4 SIV gag NA9 Mafa-B*104:01 NCVGDHQAA 192-200 TB-5024-1 TB-5024-2 TB-5024-4 SIV nef RM9 Mafa-A1*063 RPKVPLRTM 103-111 TB-5021-1 TB-5021-2 TB-5021-4 SIV nef HW8 Mafa-A1*063 HPAQTSQW 196-203 TB-5023-1 TB-5023-2 TB-5023-4 SIV nef LT9 Mafa-B*104:01 LNMADKKET 254-262 TB-5025-1 TB-5025-2 TB-5025-4 IBDV VP2 BF2*1201 ALRPVTLV 338-345 TS-M951-1 TB-M951-2 IBV NP BF2*1501 WRRQARYK 71-78 TS-M952-1 TS-M952-2 Qdm Qa-1b AMAPRTLLL TB-5106-1 TB-5106-2 TB-5106-4

制品名

Code No.

诱导用 peptide

检测 NKT 细胞的产品

Human CD1d Tetramer TS-HCD-1 TS-HCD-2 Mouse CD1d Tetramer TS-MCD-1 TS-MCD-2 ※ 本产品不含有 α-GalCer

Code No. 制品名称包装

其他相关产品

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Code No. 制品名称多肽序列来源位置对应 MHC 包装

诱导 CTL 用多肽

TS-M701-P I-Ab HBc helper peptide TPPAYRPPNAPIL HBc 128-140 I-Ab 1 mg

TS-M702-P I-Ad Tetanus toxin p30 helper peptide

FNNFTVSFWLRVPKVSA SHLE TT p30 947-967 I-Ad 1 mg

TS-M703-P I-Ad OVA helper peptide ISQAVHAAHAEINEAGR OVA 323-339 I-Ab, I-Ad 1 mg TS-M704-P I-Ab MOG35-55 Peptide MEVGWYRSPFSRVVHL YRNGK MOG 35-55 I-Ab 1 mg TS-M707-P I-Ab ESAT-61-20 peptide MTEQQWNFAGIEAAASA IQG ESAT-6 1-20 I-Ab 1 mg TS-M708-P I-Ak HEL Peptide DGSTDYGILQINSRW HEL 48-62 I-Ak 1 mg

产品名 MHC Allele Code No.

PE 标记 (25 μg)

APC 标记 (25 μg)

BV421 标记

(25 μg) 诱导用

peptide QuickSwitch

TM Custom Tetramer Kit

QuickSwitch™ Quant HLA-A*02:01 Tetramer Kit A*02:01 TB-7300-K1 TB-7300-K2 TB-7300-K4 QuickSwitch™ HLA-A*02:01 Tetramer Kit A*02:01 TB-7301-K1 TB-7301-K2 TB-7301-K4 QuickSwitch™ Quant H-2Kb Tetramer Kit H-2Kb TB-7400-K1 TB-7400-K2 TB-7400-K4 QuickSwitch™ H-2Kb Tetramer Kit H-2Kb TB-7401-K1 TB-7401-K2 TB-7401-K4

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