Immunoglobulines
description
Transcript of Immunoglobulines
immunochemieIMMUNOGLOBULINES
Immunochemie
Boek biomedische kennis in het MLO H7-8 Basis: afweer en immuniteit H 3-3-5 immuno chemische technieken
Biologie voor het MLO H 8.5 Afweerreacties
DEZE PERIODE..
Binnendringen van micro-organismen
pathogenen -> infectieziekten
Kolonisatieresistentie van het lichaam (eerste verdediging)
Mechanische barrière Biologie barrière Chemische barrière
Immuunsysteem in actie! (tweede verdediging)
AFWEER
Algemene weerstandAlgemene weerstand• alle micro-organismen• Leukocyten (witte
bloedcellen)• Fagocytose (opeten van
indringers)
Neutrofiele Granulocyten en Monocyten in het bloed
Macrofagen in de weefsels
Specifieke weerstand Specifieke weerstand• Lichaamsvreemde stoffen • virussen, bacteriën
• “Immuniteit”• Cellulair afweer-
virussen en lichaamsvreemde weefsels (T-lymfocyten)
• Humorale afweer- vorming antistoffen als reactie op antigenen (B-lymfocyten)
WEERSTAND VAN IMUUNSYSTEEM
HUMORALE AFWEER
http://www.bioplek.org/animaties/afweer/Blymfocyten.html
BINDING ANTIGEEN-ANTILICHAAM
Antigeen (Ag)Zorgt voor herkenning Lichaamsvreemde stof
Virussen, bacteriën
Antistof (Ab) immunoglobulinespecifiek 1 Ab op 1 Ag Polyklonale
antistoffen Monoklonale
antistoffenBinding, Ag-Ab complex
gemaakt door B-cellen
HUMORALE (SPECIFIEKE) AFWEER
http://www.schooltv.nl/beeldbank/clippopup/20051109_immuumsysteem02
Opdracht: Beantwoord de volgende vragen ..1.Wat is een immunoglobuline (Ig) en hoe werkt het?2.Hoe zijn ze opgebouwd? (biomolecuul, Fab, Fc, lichte
keten, zware keten, etc.)3.Welke klassen (typen) zijn er in Ig en wat is het
verschil?4.Welk type wordt bij allergische reacties aangemaakt?
En de andere types?5.Ig kunnen worden gezuiverd en worden gebruikt voor
verschillende doeleinden/toepassingen. Welke?
IMMUNOGLOBULINES
+/- 15 min
OPBOUW ANTILICHAAM
KLASSEN (TYPEN) IMMUNOGLOBULINES
IMMUNOCHEMISCHE TECHNIEKEN
Principe:Een monoklonale antilichaam bindt met de stof
(antigeen) waartegen hij gericht is. Als deze stof aanwezig is in een monster zal er een binding optreden. Bij sommige technieken wordt deze binding zichtbaar gemaakt door middel van een label
Hoge concentratie – vorming neerslag en vertroebeling (Precipitatie reacties )
Lagere concentraties – samenklonteren van antigenen en cellen (agglutinatie reacties)
Erg lage concentraties- labelen van antigenen vb Fluoriscerend, radioactief enzymen, luminescentie
(Elisa – Enzym Linked Imunnosorbent Assay,Fluorescentie microscoop analyse)
AGGLUTINATIE
Wat is agglutinatie? een verschijnsel wat optreedt wanneer
antilichamen reageren met antigenen op het celmembraan waardoor er een binding en vervolgens een samenklontering plaatsvindt
Agglutininen - antil ichamen (antistoffen)
Agglutinogenen- antigenen
AGGLUTINATIE REACTIES
Toepassingen Bloedgroep bepalingen
Bloed transfusies
Antigeen bepalingen Zwangerschap – rhesus+ baby
Detectie antilichamen - ziekte beeld
Identificatie bacteriën en schimmels
Bloed transfusies
Opdracht!! Zie stencils.
Compatibiliteit agglutinatie test
Bloed transfusies
Waarom kan je soms wel een bepaalde bloedgroep ontvangen maar niet doneren?
Universele bloeddonor = ?
Universele bloedontvanger= ?
Precipitatie tests
Agglutinatie tests
Immunoassay - ELISA
IMMUNOCHEMISCHE TECHNIEKEN
3 belangrijke onderdelen
Binding van de te bepalen stof met een specifieke antistof (immunoglobuline)
Zeer gevoelige detectiemethode
Verwijdering overmaat antistof en overmaat label
IMMUNO ASSAY
Polyklonale anti lchamen Kan afkomstig zjn van dier of mens Mens of dier krijgt injectiemet antigeen van ziekteverwekker (immunoniseren) meerdere monoklonale antichamen met 1 specfiteit Maar zijn niet allemaal gelijk (gericht op verschillende delen van het molecuul
(ziekteverwekker) Kwaliteit is niet constant – geen 1 dier of mens reageert hetzelfde
Productie Monoklonale anti l ichamen Muis injecteren met antigeen van ziekteverwekker (immunoniseren) Cel oogsten uit de milt van een muis Fusie met Tumor cellen (snellere celdeling) vormt hybrdecel Selectie van 1 hybridecel Kloon (celkweek van 1 hybride cel) productie van onbeperkt antilichaam
Oefening: http://
biologiepagina.nl/Oefeningen/Monoklonaleantistof/monoklonaleantistof.htm
PRODUCTIE ANTILICHAMEN
PRODUCTIE ANTILICHAMEN
ELISA TEST
Enzym Linked Immuno Sorbent Assay
Immunochemische test Binding tussen antigenen en antilichamen Primaire en secundaire antilichamen Rol Enzym zorgt voor kleurreactie -> detectie Opbouw van de test kan variëren –twee typen
Indirect ELISA Plaat: Antigeen antil ichaam
directe ELISA (sandwich)
plaat: primaire antil ichaam Antigeen Secundaire antil ichaam
SOORTEN ELISA’S
SANDWICH (DIRECT) ELISA
INDIRECT ELISA
HIV Testen Detectie op HIV virus
antigenenZwangerschapstesten
Detectie op zwangerschaps hormoon (hCG)
Medicijnen Bv. residuen van
dierbehandelingsmiddelen, (milieu) contaminanten,
pesticidenAllergieën
(allergene) eiwitten in voedselproductieketens. Bijvoorbeeld in hazelnoten.
Plant pathologie Bloembollen keuringsdienst virustoetsen
TOEPASSINGEN ELISA
OPDRACHT
Leg uit hoe je met een ELISA test illegaal drugs gebruik kan detecteren van ten minstens 15 verschillende drugs?
Welk type ELISA test zou je gebruiken?
Hoe zou je ELISA test inrichten (op de microtiterplaat)?