Identifikasi Imidazole

7/28/2019 Identifikasi Imidazole

http://slidepdf.com/reader/full/identifikasi-imidazole 1/15

Identifikasi Imidazole

Fauziyah Dwi Utami

1106067601



IDENTIFIKASI UMUM

• Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 250 mg, kemudian

ditambahkan 0,5 mL HCl 2N dan 4,5 mL air.

•

Penambahan HCl 2 N bertujuan untuk menarik alkaloid daridalam simplisia. Alkaloid bersifat basa, sehingga dengan

penambahan asam seperti HCl akan terbentuk garam

•Penambahan air digunakan untuk melarutkan garamalkaloid yang terbentuk



IdentifikasiPilokarpin

Reaksi

Warna

KLT

HPLC-MS

GC

IR



Identifikasi Warna

1. Identifikasi Pilokarpin

Ekkert’s Colour Tests

1 ml 1% larutan pilocarpine hidrokloride + 1 ml larutan Na.nitroprusside

2% dan 1 ml of NaOH 1N (diamkan 6-8 menit) + HCl (diasamkan)

merah atau ungu. Jika ditambahkan sedikit lar. Na. Tiosulfat 0,1N

ungu.

Helch’s Violet-Colour Test

Pilocarpine berada dalam suasana basa dengan cepat membentuk

senyawa berwarna ungu



Pilokarpin nitrat

Pembuatan larutan uji (Larutan S)

• Larutkan 2,5 gram pilokarpin nitrat dalam 50 ml aquades bebas

CO2. Larutan uji harus jernih dengan pH sekitar 3,5-4,5.

• Encerkan 0,2 ml larutan S dengan 2 ml air + 0,05 ml larutan kalium

bikromat 50g/ml + 1 ml larutan hydrogen peroksida + 2 ml

metilenklorida, kocoklartan terbentuk warna violet pada

lapisan organik.

Rotasi optic larutan S : +80 sampai +83

Larutan pilokarpin 10% dalam air dicampur larutan ferro

sulfat sama banyak + 5 ml larutan H2Scincin coklat di

tengah-tengah larutan.



“Forms a violet coloured compound when a solution of either the base or

its salt is first treated with hydrogen peroxide (H2O2) then with

potassium dichromate (K2Cr2O7) in the presence of few drops of

dilute sulphuric acid” (Helch, 1902).

"Bentuk senyawa berwarna ungu ketika larutan baik dasar atau garamnya

yang pertama kali diobati dengan hidrogen peroksida (H2O2) maka

dengan kalium dikromat (K2Cr2O7) dengan adanya beberapa tetes

asam sulfat encer" (Helch, 1902).



2. Identifikasi Isopilokarpin

• Sangat larut dalam kloroform

• Bercampur dengan air dan alkohol

• Sedikit larut dalam eter

• Benzen tidak larut dalam petroleum eter.

Isopilokarpin Nitrat (C11H16N2O . HNO3)

• Titik leleh 159°C.

• Larut dalam 8,4 bagian air dan 350 bagian etanolabsolut



Isopilokarpin Hidroklorida Hemihidrat (C11H16N2O2.HCl.½H2O)

•

Titik leleh 127°C, dalam bentuk anhidrat nya 161°C.

• Larut dalam 0,27 bagian dan 0,21 etanol.

Reduksi Semu

Alkaloida klorida + kalomel + sedikit air hitam

Tereduksi menjadi logam raksa. Raksa (II) klorida yang

terbentuk terikat dengan alkaloid sebagai kompleks.



Isopilokarpin Hidroklorida (Farmakope III, 498)

• Kurang lebih 15 mg dilarutkan dalam 2 ml air + 2 tetes

asam sulfat encer P + 2 mL Hidrogen peroksida encer P 1

mL benzen P. + 3 tetes larutan Kalium bikromat P 0,35 %

b/v, dikocokmemisah, lapisan benzen bewarna violet,

lapisan air bewarna kuning.



Identifikasi Alkaloid Imidazole dengan GC

• Fase gerak : Gas Nitrogen

• Fase diam : SE-30 (non polar) dan XE-60 (semi polar)

• Suhu injektor : 4000 C.

• Sampel dilarutkan dalam aseton atau kloroform konsentrasi 0,5-1%

• Hasil :

–Pada fase diam SE-30 (suhu injektor 175

o

C) Rf: 0,40

– Pada fase diam XE-60 (suhu injektor 220oC) Rf: 2,20



Identifikasi dengan kromatografi cair

kinerja tinggi

• Kolom : Inertisil ODS-2 column 250 x 4.6 mm, dengan ukuran partikel 5 μm.

• Laju alir : 1 mL/menit

• Detektor : Electro Spray Ionization-Mass Spectrometry (ESI-MS)

•

Sampel dan standar yang diinjeksikan : 10 μL• Digunakan eluen gradient biner, yaitu :

– 97:3 v/v (pelarut A : pelarut B) selama 8 menit

– 85:15 v/v (pelarut A: pelarut B) selama 20- 23 menit.

Pelarut A : Buffer ammonium asetat 0,05 M dengan asamtrifluoroasetat, pH = 4,0

Pelarut B : Asetonitril



Identifikasi Alkaloid Imidazole dengan

HPLC-MS



A : Ekstrak daun jaborandi

B : Residu daun jaborandi setelah diekstrakpilokarpinnya



Identifikasi Pilosine dengan Spektrofotometer IR

• Menggunakan alat Equinox/55 (Bruker) Fourier Transformed Infrared

spectrometer.

• Sampel digerus dengan KBr



Identifikasi dengan kromatografi lapis

tipis

• Lempeng : silica gel G.

• Sampel : 10 mg sampel dilarutkan dalam 10 ml air.

• Standar : 10 mg pilokarpin nitrat dilarutkan dalam 10 ml air.

•

Elusi : Campuran ammonia:metanol:metilen klorida(1:14:85)

• Cara Kerja :

– Totolkan larutan sampel dan standar pada lempeng sebanyak 10 μl

–

Dielusi hingga eluen berjalan 15 cm. – Keringkan lempeng pada suhu 100-1050C selama 10 menit, dinginkan

– Semprot dengan larutan potassium iodobismuthate.

– Bandingkan ukuran, letak dan warna yang terbentuk pada bercak larutan

sampel dengan larutan standar.

Identifikasi Imidazole

Documents

Transcript of Identifikasi Imidazole