Dinh lg DNA

XEÙT NGHIEÄMMEDIC

MEDIC 254 Hoøa Haûo Q. 10 TP. Hoà Chí Minh ÑT: 8357284 - 8355 136 fax: 84-8-8352543 email:

[email protected]

TRUNG TAÂM Y KHOA MEDIC

ÑÒNH LÖÔÏNG DNAÑÒNH LÖÔÏNG DNA

bDNA : branch DNA.bDNA coù HBV bDNA, HCV bDNA, HIV

bDNA.

XEÙT NGHIEÄMMEDICSIEÂU AÂMSIEÂU AÂM

CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]


Muïc ñích ñònh löôïng HBV DNA, HCV RNA Caùc tính chaát cuûa bDNA Moät soá lyù do choïn bDNA ñeå ñònh

löôïng HBV bDNA. Ñaëc ñieåm cuûa HBV bDNA Keát quaû ñònh löôïng vaø caùc yeáu toá

lieân quan Moái lieân quan giöõa löôïng HBV DNA vaø

vaán ñeà ñieàu trò HCV bDNA Keát luaän


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]

TRUNG TAÂM Y KHOA MEDICMuïc ñích ñònh löôïng HBV DNA, Muïc ñích ñònh löôïng HBV DNA, HCV RNAHCV RNA

Choïn beänh nhaân cho ñieàu trò ñaëc hieäu.

Theo doõi quaù trình ñieàu trò. Ñaùnh giaù hieäu quaû ñieàu trò.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]


Caùc tính chaát cuûa bDNACaùc tính chaát cuûa bDNA

Khoâng ñoøi hoûi moät quaù trình tinh saïch DNA (khoâng duøng Phenol, Ethanol).

Röûa ñeå loaïi caùc chaát öùc cheá, Probes, Amplifier khoâng phaûn öùng.

Laøm ñöôïc moät luùc nhieàu maãu (42 maãu).

Ñoïc keát quaû khoâng duøng ñoàng vò phoùng xaï.

Khoâng caàn phoøng thí nghieäm chuyeân bieät, kyõ thuaät laøm khoâng nghieâm ngaët.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]

TRUNG TAÂM Y KHOA MEDICMoät soá lyù do choïn bDNA ñeå Moät soá lyù do choïn bDNA ñeå ñònh löôïng HBV bDNA. ñònh löôïng HBV bDNA.

Bieân ñoä ñònh löôïng roäng : 0,7 4500 MEq/ ml.

Giaù trò laëp laïi coù theå tin caäy ñöôïc (CV thaáp).

Chính xaùc vaø ñònh löôïng ñöôïc cho moïi subtypes cuûa HBV.

Kyõ thuaät khoâng nghieâm ngaët. Nhaïy hôn (so vôùi Digene, Abbott).


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]


Ñaëc ñieåm cuûa HBV bDNAÑaëc ñieåm cuûa HBV bDNA

Maãu : serum. Giôùi haïn phaùt hieän ñöôïc : 0,7 MEq/ml. Laøm ñöôïc moät luùc nhieàu maãu (42

maãu), laøm duplicate. Ñoä ñaëc hieäu 99,7%. 1 Eq töông ñöông 1 phaân töû HBV DNA. 1 pg = 285.000 phaân töû HBV DNA. Caùc yeáu toá Lipomia, Hb, Rheumatoid

factor, ALT cao, bilirubine : khoâng aûnh höôûng ñeán phaûn öùng (thöïc teá : neân laáy maùu luùc ñoùi, ñöïng trong tubes voâ truøng, khoâng ñeå taùn huyeát).


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]

TRUNG TAÂM Y KHOA MEDICKeát quaû ñònh löôïng vaø caùc Keát quaû ñònh löôïng vaø caùc yeáu toá lieân quanyeáu toá lieân quan

a. Moái lieân quan giöõa HBV DNA vaø HBeAg HBeAg döông tính :

phaùt hieän ñöôïc caû vôùi bDNA vaø PCR. Ngöôøi laønh mang truøng + HBeAg (-):

HBV DNA thöôøng aâm tính nhöng neáu keøm men gan cao HBV DNA döông tính.

HBeAg aâm tính : Men gan bình thöôøng : thöôøng bDNA aâm

tính, PCR döông tính ôû 62%. Men gan taêng : thöôøng bDNA vaø PCR

döông tính. Khoâng tìm thaáy ñöôïc moái lieân quan giöõa

HBeAg vaø HBV DNA.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]


b. Moái lieân quan giöõa HBV DNA vaø ALT Men gan cao vaø löôïng HBV trong maùu thaáp :

tieân löôïng toát cho ñaùp öùng ñieàu trò ñaëc hieäu.

Beänh nhaân coù men gan bình thöôøng : löôïng HBV DNA cao hôn beänh nhaân coù men gan taêng.

Men gan bình thöôøng, HBeAg (-) : ña soá HBV DNA (-).

Men gan taêng, HBeAg (+) hoaëc (-) : HBV DNA (+).

Ngöôøi laønh mang truøng + HBeAg (+) : löôïng HBV DNA cao, dao ñoäng ít.

Beänh nhaân vieâm gan B maïn : löôïng men, HBV DNA, HBeAg dao ñoäng.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]

TRUNG TAÂM Y KHOA MEDICMoái lieân quan giöõa löôïng HBV Moái lieân quan giöõa löôïng HBV DNA vaø vaán ñeà ñieàu tròDNA vaø vaán ñeà ñieàu trò

Löôïng virus tröôùc ñieàu trò coù giaù trò tieân löôïng cho ñaùp öùng ñieàu trò.

Tieân löôïng toát cho ñaùp öùng ñieàu trò : löôïng HBV DNA : 9 x 107 12 x 107 Eq/ml trong khoaûng 100 ngaøy tröôùc ñieàu trò.

Tieân löôïng keùm cho ñaùp öùng ñieàu trò : Löôïng HBV DNA töø 4 x 109 12 x 109 Eq/ml trong 10 tuaàn tröôùc ñieàu trò.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]


V. HCV bDNAV. HCV bDNA

Ñaëc ñieåm cuûa HCV bDNA Maãu : serum hoaëc plasma (EDTA K2).

Giöõ ôû - 200 C. Thôøi gian laáy maãu : trong voøng 3 - 4

giôø sau khi laáy maùu. Bieân ñoä phaùt hieän : 0,2 MEq/ml

120 MEq/ml. Ñònh löôïng ñöôïc cho moïi genotype

cuûa HCV RNA. 1 Eq töông ñöông 1 HCV RNA. Ñoä ñaëc hieäu 95%.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]


Ñaùnh giaù keát quaû ñònh löôïng vaø vaøi yeáu toá lieân quan

Caùc phöông phaùp ñònh löôïng cho HCV : bDNA, PCR khoâng coù giaù trò thoáng nhaát

vôùi nhau. Do ñoù theo doõi ñaùnh giaù ñieàu trò chæ neân vôùi 1 loaïi xeùt nghieäm ôû 1 beänh nhaân.

PCR do nhaïy neân ñöôïc duøng ñeå ñònh löôïng trong tröôøng hôïp ñaùp öùng ñieàu trò vaø ñònh löôïng vôùi nhöõng tröôøng hôïp löôïng virus thaáp.

bDNA HCV khueách ñaïi leân 765 laàn, RT PCR khueách ñaïi leân haøng tæ laàn.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]


HCV bDNA vaø caùc genotype Nhieàu nghieân cöùu cho thaáy : löôïng HCV

RNA ôû type 1 cao hôn type 2,3 (lyù do ñeå ñaùp öùng ñieàu trò khaùc nhau ?).

Genotype vaø löôïng HCV RNA laø nhöõng yeáu toá ñoäc laäp cho tieân löôïng ñieàu trò : khoâng phaûi type 1 chæ löôïng virus cao vaø ngöôïc laïi.

bDNA ñònh löôïng ñöôïc cho moïi genotypes cuûa HCV.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]

TRUNG TAÂM Y KHOA MEDICLöôïng HCV RNA ôû beänh nhaân Löôïng HCV RNA ôû beänh nhaân vieâm ganvieâm gan

Trong tröôøng hôïp caáp : 107 - 108 Eq/ml HCV RNA ñöôïc phaùt hieän tröôùc ñænh ALT vaø sau ñoù giaûm nhanh xuoáng döôùi ngöôõng phaùt hieän.

Beänh nhaân vieâm gan maïn : HCV RNA thaáp, dao ñoäng.

Söï thay ñoåi löôïng HCV RNA dao ñoäng gaàn song song vôùi men gan moái lieân quan giöõa sinh saûn virus vaø toån thöông teá baøo gan.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]

TRUNG TAÂM Y KHOA MEDICd. Löôïng HCV RNA vaø tieân d. Löôïng HCV RNA vaø tieân löôïng ñaùp öùng ñieàu tròlöôïng ñaùp öùng ñieàu trò

Nhöõng beänh nhaân coù löôïng HCV RNA < 2 x 106Eq/ml ñaùp öùng vôùi ñieàu trò khoâng phuï thuoäc vaøo genotype.

Coù tæ leä ñaùp öùng ñieàu trò khaùc nhau giöõa caùc genotype.

Toån thöông naëng qua moâ hoïc cuûa beänh khoâng coù moái töông quan vôùi ñaùp öùng hoaëc khoâng ñaùp öùng ñieàu trò. Nhöng nhöõng beänh nhaân coù ñaùp öùng ñieàu trò thì thöôøng laø toån thöông nheï.

löôïng HCV coù yù nghóa tieân löôïng cho ñaùp öùng ñieàu trò.

Moät nghieân cöùu khaùc : beänh nhaân coù löôïng HCV RNA > 2 x 106 khoâng coù ñaùp öùng vôùi Interferon.


CT SCANCT SCAN

NOÄI SOINOÄI SOI

PHOØNG KHAÙM

PHOØNG KHAÙM

XEÙT NGHIEÄM

XEÙT NGHIEÄM

DSADSA

X QUANGX QUANG

MRIMRI


[email protected]


Keát luaänKeát luaän

Ñònh löôïng DNA laø yeáu toá coù giaù trò nhaát trong vaán ñeà tieân löôïng vaø ñaùnh giaù ñieàu trò.

Choïn bDNA vì laø phöông phaùp ñònh löôïng tröïc tieáp, chính xaùc vaø ñaëc hieäu.

Moät beänh nhaân vieâm gan, trong vaán ñeà chaån ñoaùn vaø ñieàu trò neân thöïc hieän theo 3 böôùc : PCR, bDNA, PCR döïa vaøo tính chaát cuûa töøng loaïi xeùt nghieäm.

Giôùi haïn phaùt hieän cuûa HBV bDNA laø 0,7 MEq/ml ; HCV bDNA laø 0,2 MEq/ml.

Dinh lg DNA

Documents

Transcript of Dinh lg DNA