21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding...

19
Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase verlengt DNA-strengen vanaf de primers Proces wordt doorlopend herhaalt, resultaat: miljoenen identieke DNA- fragmenten Wat is hier de functie van?

Transcript of 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding...

Page 1: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

21.3 PCR-techniek

• Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA

• Afkoelen

• Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA

• Taq-polymerase verlengt DNA-strengen vanaf de primers

• Proces wordt doorlopend herhaalt, resultaat: miljoenen identieke DNA-fragmenten

• Wat is hier de functie van?

Page 2: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

PCR-techniek

Page 3: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

PCR-techniek

www.youtube.com/watch?v=HMC7c2T8fVk&feature=related

Page 4: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Het vormen van een eiwit

• Transcriptie (het maken van een DNA-mal = m(essenger) RNA)

• Splicing (het verwijderen van introns uit het pre-mRNA, de exons blijven over en vormen het rijpe mRNA)

• Transport van rijp mRNA door een kernporie naar het celplasma

• Translatie ( het aflezen en omzetten van de mRNA-code in eiwit met behulp van ribosomen)

• Later wordt het eiwit in het endoplasmatisch reticulum afgewerkt

Page 5: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

21.4 Transcriptie/Translatie

Page 6: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Transcriptie (aflezen DNA in kern)

www.youtube.com/watch?v=5MfSYnItYvg&feature=relmfu

Page 7: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Splicing: pre-mRNA wordt omgezet in rijp mRNA in de kern

Page 8: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Splicing: een gen kan meerdere eiwitten opleveren

www.youtube.com/watch?v=FVuAwBGw_pQ

Page 9: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Epigenetica

• Histonen bevatten een erfelijke code op de eiwitstaarten

• Dit zijn chemische groepen: methylgroep, acetylgroep, fosforgroep en het eiwit ubiquitine

• DNA kan hierdoor aan of uit staan

• Deel code wordt na de bevruchting van de eicel verwijderd

• Signalen in cel veroorzaken nieuwe code

Page 10: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

epigenetica 2

• Gedurende specialisatie verandert code

• Code speelt een rol in de ontwikkeling van het organisme

• Ook DNA methylering heeft effect op het aflezen van genen

www.youtube.com/watch?v=s7dDd1bvNfA

Page 11: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Translatie ( het aflezen en omzetten van de mRNA-code in eiwit met behulp van ribosomen)

• De translatie begint met de initiatie van de eiwitsynthese:

• het mRNA bindt zich aan de kleinste subeenheid van het ribosoom

• Hieraan bindt het eerste tRNA (AUG Met(hionine))

• Daarna bindt de grootste subeenheid van het ribosoom zich aan dit complex

Page 12: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Translatie (vervolg)

• tRNA op p-site

• nieuw tRNA op a-site

• fosfaat afsplitsen

• aminozuurketen wordt verbonden met nieuw aminozuur

• ribosoom schuift op (kost E)

• t-RNA zonder eiwit/aminozuur komt op e-site en laat los

• t-RNA kan een nieuw aminozuur halen

Page 13: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Translatie

QuickTime™ en een-decompressor

zijn vereist om deze afbeelding weer te geven.

Page 14: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Binding tRNA aan het aminozuur

= specifiek

Page 15: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Translatie (het ribosoom)

QuickTime™ en een-decompressor

zijn vereist om deze afbeelding weer te geven.

Page 16: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Translatie (einde aflezen mRNA)

• De e-site van het ribosoom nadert het stopcodon

• op het stopcodon past maar 1 eiwit: de releasing factor

• Het eiwit wordt ontkoppeld, het complex valt uiteen.

Page 17: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Translatie (vervolg)

QuickTime™ en eenSorenson Video 3-decompressor

zijn vereist om deze afbeelding weer te geven.

Page 18: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Overzicht eiwitsynthese

1.

2.

3.

5.

4.

7.

6.

1.

7.

6.

5.

4.3.

2.

Page 19: 21.3 PCR-techniek Dubbelstrengs DNA verhitten, resultaat: enkelstrengs DNA Afkoelen Binding complementaire DNA-primers op specifieke plekken los DNA Taq-polymerase.

Mutaties